Sel HK-CRISPR-mEGFP-RanBP2/Nup358

€800,00*

Produk dikirim dalam keadaan beku menggunakan es kering dalam tabung kriogenik. Setiap tabung kriogenik biasanya mengandung 3 × 10^⁶ sel untuk garis sel yang melekat atau 5 × 10^⁶ sel untuk garis sel suspensi (lihat sertifikat analisis batch untuk detailnya).

Harga belum termasuk pajak ditambah biaya pengiriman

cryovial

Nomor produk: 301575

Lembar data keselamatan

Lembar produk

Sertifikat Analisis (CoA)

Perjanjian Pihak Ketiga

Deskripsi	Garis sel HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 adalah turunan rekayasa genetika dari sel HeLa Kyoto, yang dikenal karena ketangguhannya dan digunakan secara luas dalam penelitian ilmiah. Lini sel ini telah dimodifikasi menggunakan teknologi CRISPR-Cas9 untuk mengekspresikan mEGFP (monomer Enhanced Green Fluorescent Protein) yang ditandai dengan Nup358, komponen penting dari kompleks pori nuklir (NPC). Nup358, juga dikenal sebagai RanBP2, memainkan peran penting dalam transpor nukleositoplasma, perakitan spindel mitosis, dan proses seluler lainnya. Tag mEGFP memungkinkan visualisasi Nup358, memfasilitasi pengamatan waktu nyata dari dinamika dan interaksinya di dalam sel. Sel HeLa Kyoto, subgalur dari sel HeLa asli, dicirikan oleh kemampuan beradaptasi dan pertumbuhan yang stabil dalam kultur. Sistem CRISPR-Cas9 dalam garis sel ini memungkinkan pengeditan genom yang tepat, memastikan tag mEGFP secara akurat menyatu dengan protein Nup358 tanpa mengganggu fungsinya. Hal ini menjadikan jalur sel HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 sebagai alat yang berharga untuk mempelajari aspek struktural dan fungsional dari kompleks pori nuklir. Para peneliti dapat menggunakan garis sel ini untuk mendapatkan wawasan tentang mekanisme yang mengatur transpor nukleositoplasma dan peran Nup358 dalam homeostasis seluler dan keadaan penyakit, seperti kanker dan infeksi virus.
Organisme	Manusia
Jaringan	Endoserviks
Penyakit	Adenokarsinoma

Usia	30 tahun
Jenis Kelamin	Perempuan
Etnis	Afrika-Amerika
Morfologi	Sel mirip epitel dengan bentuk batu mosaik
Sifat pertumbuhan	Patuh

Kutipan	HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 (Nomor katalog Cytion 301575)
Tingkat keamanan hayati	1
NCBI_TaxID	9606
Aksesi Cellosaurus	CVCL_B7FS
Deposan	Laboratorium Ellenberg (Ellenberg Lab) (EMBL)
Status transgenik	GMO-S1: Jalur HeLa Kyoto ini mengandung tag mEGFP terintegrasi CRISPR pada lokus RanBP2/Nup358, yang memungkinkan visualisasi filamen sitoplasma dari pori nuklir. Klasifikasi ini hanya berlaku di Jerman dan mungkin berbeda di tempat lain.

Produk	EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein)

Media Kultur	DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suplemen	Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen Disosiasi	Accutase
Subkultur	Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pembaruan cairan	2 hingga 3 kali per minggu
Media pembekuan	Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Pencairan dan Kultur Sel	Pastikan botol tetap dalam keadaan beku pada saat pengiriman, karena sel dikirim dengan es kering untuk mempertahankan suhu optimal selama perjalanan. Setelah diterima, segera simpan cryovial pada suhu di bawah -150°C untuk memastikan pelestarian integritas sel, atau lanjutkan ke langkah 3 jika kultur segera diperlukan. Untuk kultur segera, segera cairkan botol dengan merendamnya dalam penangas air bersuhu 37°C dengan air bersih dan agen antimikroba, aduk perlahan selama 40-60 detik hingga gumpalan es kecil tetap ada. Lakukan semua langkah selanjutnya dalam kondisi steril di dalam tudung alir, desinfektan kriovial dengan etanol 70% sebelum dibuka. Buka botol yang telah didesinfeksi dengan hati-hati dan pindahkan suspensi sel ke dalam tabung sentrifugasi 15 ml yang berisi 8 ml media kultur suhu kamar, aduk perlahan. Sentrifus campuran pada 300 x g selama 3 menit untuk memisahkan sel dan dengan hati-hati membuang supernatan yang mengandung sisa media pembekuan. Resuspensi pelet sel dengan hati-hati dalam 10 ml medium kultur segar. Untuk sel yang melekat, bagi suspensi di antara dua labu kultur T25; untuk kultur suspensi, pindahkan semua media ke dalam satu labu T25 untuk mendorong interaksi dan pertumbuhan sel yang efektif. Patuhi protokol subkultur yang telah ditetapkan untuk pertumbuhan dan pemeliharaan garis sel yang berkelanjutan, memastikan hasil eksperimental yang andal.
Suasana Inkubasi	37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.
Pelapisan Labu	Untuk perlekatan dan kelangsungan hidup yang optimal setelah pencairan, kami sarankan untuk menggunakan labu atau pelat berlapis kolagen.
Prosedur Pembekuan	Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
Ketentuan Pengiriman	Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
Kondisi Penyimpanan	Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Kemandulan	Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran. Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Nomor Lot	Jenis Sertifikat	Tanggal	Nomor Katalog
301575-010825	Sertifikat Analisis	22. Oct. 2025	301575

Harap diperhatikan bahwa jalur sel ini tidak tersedia di bawah Cytion MTA standar, karena memerlukan perjanjian pihak ketiga dan/atau tunduk pada negosiasi dengan pemberi lisensi asli.

Sel HK-CRISPR-mEGFP-RanBP2/Nup358

Informasi umum

Karakteristik

Data Peraturan

Data Biomolekuler

Penanganan

Kontrol kualitas / Profil genetik / HLA

Sertifikat Analisis (CoA)

Perjanjian Pihak Ketiga