Sel B-LCL-HROC60
€800,00*
Produk dikirim dalam keadaan beku menggunakan es kering dalam tabung kriogenik. Setiap tabung kriogenik biasanya mengandung 3 × 10⁶ sel untuk garis sel yang melekat atau 5 × 10⁶ sel untuk garis sel suspensi (lihat sertifikat analisis batch untuk detailnya).
Informasi umum
| Deskripsi | B-LCL-HROC60 adalah garis sel limfoblastoid B manusia yang diimortalkan oleh virus Epstein-Barr (EBV), yang didirikan dari sel B yang menembus tumor (TiBc) yang diisolasi dari karsinoma kolorektal primer yang diberi nama HROC60. Tumor induk berasal dari pasien laki-laki dewasa dengan karsinoma kolorektal sisi kanan yang memiliki subtipe molekuler CpG island methylator phenotype-high (CIMP-H). Jaringan tumor segar dipisahkan secara mekanis untuk mendapatkan suspensi sel tunggal, dan sel B diimortalkan secara selektif in vitro menggunakan supernatant yang mengandung EBV dari garis sel marmoset B95/8 dalam kehadiran cyclosporin A untuk menekan pertumbuhan sel T dan NK. Ekspansi jangka panjang menghasilkan kultur sel B monoklonal, seperti yang dikonfirmasi oleh analisis pengaturan gen rantai berat dan ringan imunoglobulin menggunakan uji klonalitas standar. B-LCL-HROC60 menghasilkan imunoglobulin M (IgM) sebagai isotipe dominan, dengan produksi stabil selama kultur jangka panjang. Pada serangkaian garis sel B yang menembus tumor yang dihasilkan dari karsinoma kolorektal, sekresi imunoglobulin dibatasi pada satu isotipe utama per klon, dan tidak terjadi pertumbuhan spontan tanpa EBV eksogen, mengesampingkan transformasi yang didorong oleh EBV laten in vivo. Sebagai garis sel monoklonal yang berasal dari sel T-B yang terpapar antigen dari karsinoma kolorektal CIMP-H, B-LCL-HROC60 menyediakan model in vitro yang relevan untuk menyelidiki respons imun humoral dalam mikro lingkungan tumor kolorektal dan untuk mengkarakterisasi sifat fungsional antibodi yang dihasilkan oleh sel B yang menembus tumor. |
|---|---|
| Organisme | Manusia |
| Jaringan | Darah tepi |
| Penyakit | Karsinoma |
| Sinonim | Bc HROC60, TiBcHROC60 |
Karakteristik
| Usia | 71 tahun |
|---|---|
| Jenis Kelamin | Laki-laki |
| Etnis | Kaukasia |
| Morfologi | Sel bulat |
| Jenis sel | Limfoblas B |
| Sifat pertumbuhan | Penangguhan |
Data Peraturan
| Kutipan | B-LCL-HROC60 (Nomor katalog Cytion 302004) |
|---|---|
| Tingkat keamanan hayati | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Aksesi Cellosaurus | CVCL_A7UT |
Data Biomolekuler
| Antigen permukaan | CD19 |
|---|---|
| Virus | Transformant: EBV |
Penanganan
| Media Kultur | RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a) |
|---|---|
| Suplemen | Lengkapi media dengan 10% FBS yang dinonaktifkan dengan panas |
| Subkultur | Homogenisasi secara perlahan suspensi sel dalam flask dengan cara menghisap dan mengeluarkan cairan menggunakan pipet, lalu ambil sampel representatif untuk menentukan kepadatan sel per ml.encerkan suspensi tersebut hingga mencapai konsentrasi sel 1 x 10⁵ sel/ml menggunakan medium kultur segar, dan bagi suspensi yang telah disesuaikan ke dalam flask baru untuk budidaya lebih lanjut. |
| Media pembekuan | Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi. |
| Pencairan dan Kultur Sel |
|
| Suasana Inkubasi | 37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan. |
| Pelapisan Labu | Tidak ada |
| Prosedur Pembekuan | Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai. |
| Ketentuan Pengiriman | Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai. |
| Kondisi Penyimpanan | Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair. |
Kontrol kualitas / Profil genetik / HLA
| Kemandulan | Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran. Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari. |
|---|---|
| Alel HLA |
A*: '02:01:01, '11:01:01
B*: '44:02:01, '55:01:01
C*: '03:03:01, '05:01:01
DRB1*: '01:01:01, '13:01:01
DQA1*: '01:01:01, '01:03:01
DQB1*: '05:01:01, '06:03:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01
|