תאי U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP

‏800.00 ‏€*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300444

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

הסכם צד שלישי

תיאור	U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP הוא קו תאים של אוסטאוסרקומה מהונדס גנטית, שמקורו בקו התאים האנושי U-2 OS. קו תאים זה הונדס באמצעות עריכת גנום בתיווך CRISPR/Cas9 כדי לשלב תג SNAP בגן NUP96, מה שמאפשר הדמיה וחקירה של הדינמיקה של קומפלקס הנקבוביות הגרעיניות. קומפלקסים של נקבוביות גרעיניות (NPC) חיוניים לוויסות הובלת חומרים בין הגרעין לציטופלזמה, ו-NUP96 הוא מרכיב משמעותי ב-NPC, הממלא תפקיד מרכזי בשלמותו המבנית ובתפקודו. בשיבוט U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP מס' 33, שילוב התג SNAP בלוקוס NUP96 מאפשר חיבור ספציפי וקובלנטי של מצעים פלואורסצנטיים או גלאים כימיים אחרים, שניתן להשתמש בהם להדמיה של תאים חיים ולבדיקות ביוכימיות אחרות. תכונה זו הופכת אותו לכלי יקר ערך לחקר הדינמיקה המולקולרית של הובלה גרעינית-ציטופלזמית, להבנת פתולוגיות הקשורות ל-NPC ולסינון תרכובות טיפוליות המשפיעות על תפקוד ה-NPC. קו התאים שומר גם על המאפיינים של קו ה-U-2 OS ההורי, הכוללים רמה גבוהה של יציבות גנטית וקלות גידול, מה שהופך אותו מתאים לסינון תפוקה גבוהה ולמחקרים ממושכים בביולוגיה תאית. בשל הספציפיות של השינוי בגן NUP96, U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP clone no.33 מספק מודל ייחודי למחקר מפורט של רכיבי NPC בהקשר של תפקוד ותפקוד לקוי של התא. חוקרים יכולים לנצל את מערכת SNAP-tag כדי לסמן באופן סלקטיבי ומהיר את NUP96, מה שמאפשר הדמיה בזמן אמת של הדינמיקה של NPC בתנאים פיזיולוגיים ופתולוגיים. שיבוט ספציפי זה יכול לשמש כפלטפורמה איתנה הן למחקר בסיסי והן למחקרים ביו-רפואיים יישומיים, ותורם באופן משמעותי לתחומי הביולוגיה התאית, הגנטיקה והאונקולוגיה.
אורגניזם	אדם
רקמה	עצם
מחלה	אוסטאוסרקומה

גיל	15 שנים
מגדר	נקבה
מוצא אתני	קווקזי
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP (מספר קטלוגי Cytion 300444)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FL
מפקיד	מעבדת אלנברג (EMBL)
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים זה של אוסטאוסרקומה אנושית (U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP, שיבוט 33) מכיל פיוז'ן NUP96-SNAP מהונדס CRISPR המאפשר תיוג כימי של נקבוביות גרעיניות באמצעות SNAP-tag. השינוי משולב באופן יציב. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

ביטוי חלבון	NUP96-SNAP (חלבון מורכב נקבוביות גרעיניות 96, SNAP-tag)

תרבית ביניים	McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS, 3.0 גרם/ליטר גלוקוז, גלוטמין יציב, 2.0 מ"מ נתרן פירובט, 2.2 גרם/ליטר NaHCO3, 1% NEAA
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	לצורך היצמדות וחיוניות מיטביות לאחר ההפשרה, אנו ממליצים להשתמש בבקבוקים או בצלחות מצופים בקולגן.
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300444-040724	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300444

יש לשים לב כי קו תאים זה אינו זמין תחת הסכם Cytion MTA סטנדרטי, שכן הוא מצריך הסכם עם צד שלישי ו/או כפוף למשא ומתן עם בעל הרישיון המקורי.

מופעל על ידי Bioz לפרטים נוספים על Bioz

תאי U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)

הסכם צד שלישי