Cellules TT
Informations générales
Description | Les cellules TT produisent continuellement des niveaux élevés de calcitonine et d'ACE.On a constaté que la calcitonine immunoréactive était produite dans la culture cellulaire à des niveaux de 3900 pg/million de cellules et de 7700 pg/million de cellules 24 et 72 heures respectivement, après un changement de milieu.On a constaté que l'ACE s'accumulait à plus de 27 ng/million de cellules sur une période de 72 heures.L'analyse chromosomique de la lignée cellulaire et des tumeurs induites chez les souris nude révèle un caryotype humain aneuploïde avec plusieurs chromosomes marqueurs.Les études initiales de caractérisation de la lignée cellulaire TT ont été menées en utilisant des cellules TT de premier passage cultivées dans un milieu RPMI 1640 supplémenté avec 15% de sérum bovin fœtal et 1mM de L-glutamine.On ne sait pas si les neuropeptides produits par cette lignée cellulaire lorsqu'elle est cultivée dans le milieu RPMI 1640 sont également produits par les cellules lorsqu'elles sont cultivées dans le milieu Ham's F-12K.L'analyse chromosomique de la lignée cellulaire et des tumeurs induites chez la souris nude révèle un caryotype humain aneuploïde avec plusieurs chromosomes marqueurs. |
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Organisme | Humain |
Tissus | Thyroïde, médullaire |
Maladie | Carcinome médullaire héréditaire de la glande thyroïde, néoplasie endocrinienne multiple de type 2 |
Synonymes | MTC-TT |
Caractéristiques
L'âge | 77 ans |
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Genre | Femme |
Ethnicité | Européen |
Morphologie | Épithéliale |
Propriétés de croissance | Adhérent |
Identifiants / Biosécurité / Citation
Citation | TT (numéro de catalogue 305027 de Cytion) |
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Niveau de biosécurité | 1 |
Expression / Mutation
Expression des protéines | Calcitonine, Antigène carcino-embryonnaire (ACE) |
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Tumorigène | Oui |
Manipulation
Milieu de culture | Milieu Ham's F12K, w : 2.0 mM L-Glutamine, w : 2.0 mM Sodium pyruvate, w : 2.5 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820608a) |
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Suppléments moyens | Compléter le milieu avec 10% de FBS |
Solution de passage | Accutase |
Sous-culture | Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
Taux de fractionnement | 1:2 à 1:4 |
Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
Congélation du milieu | CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100) ou CM-ACF (numéro de catalogue Cytion 806100) |
Manipulation des cultures cryoconservées |
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Contrôle de qualité / Profil génétique / HLA
Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence. Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes. |
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Profil STR |
Amélogénine: x,x
CSF1PO: 10,13
D13S317: 11
D16S539: 12,13
D5S818: 12,13
D7S820: 10,12
TH01: 6,9
TPOX: 8,11
vWA: 16,18
D3S1358: 15
D21S11: 29,32.2
D18S51: 12
Penta E: 7,13
Penta D: 13,13
D8S1179: 15,16
FGA: 21,25
D6S1043: 12,13
D2S1338: 17,23
D12S391: 15,21
D19S433: 14,15
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