Cellules L5178-R
Informations générales
Description | Cette lignée cellulaire est dérivée du lymphome thymique L5178 induit par le méthylcholanthrène chez une souris DBA/2. Les cellules sont résistantes aux rayons X, mais sensibles aux rayons ultraviolets, à la chaleur et à certains médicaments anti-néoplasiques potentiels (par exemple, le cis-PAD). Après 6 mois à 3 ans de culture, la lignée se convertit en un état sensible aux rayons X. La lignée L5178-S sensible aux rayons X est dérivée de cette lignée. |
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Organisme | Souris |
Tissus | Thymus |
Maladie | Leucémie |
Synonymes | L5178Y-R, L5178YR, L-5178-Y-R, LY-R, LYR |
Caractéristiques
Morphologie | Cellules rondes |
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Type de cellule | Lymphocyte T |
Propriétés de croissance | Suspension |
Identifiants / Biosécurité / Citation
Citation | L5178-R (numéro de catalogue Cytion 400258) |
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Niveau de biosécurité | 1 |
Expression / Mutation
Tumorigène | Chez les souris DBA/2 |
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Virus | MAP-test négatif : Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis. |
Manipulation
Milieu de culture | RPMI 1640, w : 2.1 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a) |
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Suppléments moyens | Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 1 mM de pyruvate de sodium, 1 % de NEAA |
Sous-culture | Maintenir les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Commencer les cultures avec une densité de 2 x 10^5 cellules/ml et maintenir la concentration cellulaire entre 1 x 10^5 et 1 x 10^6 cellules/ml pour une croissance optimale |
Densité de semis | 1 x 10^6 cellules/ml |
Renouvellement des fluides | Tous les 3 jours |
Recouvrement par congélation | 2 à 4 jours |
Congélation du milieu | CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100) ou CM-ACF (numéro de catalogue Cytion 806100) |
Manipulation des cultures cryoconservées |
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Contrôle de qualité / Profil génétique / HLA
Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence. Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes. |
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Produits requis
Dans la recherche biologique, la cryoconservation des cellules de mammifères est un outil inestimable. La conservation réussie des cellules est une priorité absolue, car la perte d'une lignée cellulaire en raison d'une contamination ou de mauvaises conditions de stockage entraîne une perte de temps et d'argent, ce qui retarde en fin de compte les résultats de la recherche. Une fois les cellules transférées d'un milieu de croissance cellulaire à un milieu de congélation, elles sont généralement congelées à une vitesse régulée et stockées dans de la vapeur d'azote liquide ou à une température inférieure à -130°C dans un congélateur mécanique. Le milieu de congélation CM-ACF permet la cryoconservation des cellules à une température inférieure à -130°C (ou dans l'azote liquide), ce qui élimine essentiellement le besoin d'un congélateur ultra-bas supplémentaire et coûteux, ainsi que les processus de congélation à vitesse contrôlée, longs et exigeants. Il suffit de prélever les cellules, d'aspirer le milieu de croissance, de les remettre en suspension dans le CM-ACF, de les transférer dans un cryovial et de conserver le flacon à une température inférieure à -130 °C.
Longue durée de conservation
CM-ACF est un milieu de cryoconservation sans sérum, prêt à l'emploi, qui peut être conservé au réfrigérateur jusqu'à un an.
Des centaines de chercheurs font confiance au CM-ACF
Notre milieu de congélation cellulaire sans sérum CM-ACF est un produit leader sur le marché en Allemagne et en Europe et se distingue par de nombreuses publications impliquant des centaines de lignées cellulaires différentes dans le monde entier. Nous l'avons testé avec plus de 1000 lignées cellulaires issues de notre banque de cellules propriétaire.
Ingrédients optimisés sans sérum
CM-ACF ne contient pas de produits à base de sérum. Les milieux de cryoconservation contenant du sérum présentent l'inconvénient d'avoir des taux de récupération fluctuants et une composition peu claire. Étant donné que la composition et la concentration des protéines et autres composants biologiques varient d'un lot à l'autre dans le sérum, la reproductibilité des expériences avec des cellules congelées dans un milieu contenant du sérum peut être compromise. Comme chaque composant de CM-ACF est soigneusement défini, vous pouvez être assuré que les cellules se rétablissent toujours à l'identique.
Contient du DMSO, du glucose, des sels
Pouvoir tampon pH = 7,2 à 7,6
Universel
- même pour la préservation des cellules souches
Toutes les lignées cellulaires courantes peuvent être congelées et décongelées pour obtenir de nombreuses cellules viables. Par rapport aux milieux standard, le taux de récupération des cellules, même les plus délicates, est nettement plus élevé. En utilisant CM-ACF, nous conservons plus de 1000 lignées cellulaires différentes avec un succès exceptionnel.
Applications et validation
Les cellules conservées dans notre milieu de congélation CM-ACF peuvent être utilisées pour le comptage, la viabilité et la cryoconservation des cellules, la culture cellulaire, la culture de cellules de mammifères, l'analyse de l'expression génétique et le génotypage, la transcription in vitro et les réactions en chaîne par polymérase. L'efficacité de chaque lot est évaluée sur des cellules CHO-K1. Chaque lot est soumis à des tests de pH, d'osmolalité, de stérilité et d'endotoxines afin de garantir une qualité élevée.
Dans la recherche biologique, la cryoconservation des cellules de mammifères est un outil inestimable. La conservation réussie des cellules est une priorité absolue, car la perte d'une lignée cellulaire en raison d'une contamination ou de mauvaises conditions de stockage entraîne une perte de temps et d'argent, ce qui retarde en fin de compte les résultats de la recherche. Une fois les cellules transférées d'un milieu de croissance cellulaire à un milieu de congélation, elles sont généralement congelées à une vitesse régulée et stockées dans de la vapeur d'azote liquide ou à une température inférieure à -130°C dans un congélateur mécanique. Le milieu de congélation CM-1 permet la cryoconservation des cellules à une température inférieure à -130°C (ou dans l'azote liquide), ce qui élimine essentiellement le besoin d'un congélateur ultra-bas supplémentaire et coûteux, ainsi que les processus de congélation à vitesse contrôlée, longs et exigeants. Il suffit de prélever les cellules, d'aspirer le milieu de croissance, de les remettre en suspension dans le CM-1, de les transférer dans un cryovial et de conserver le flacon à une température inférieure à -130 °C.
Longue durée de conservation
CM-1 est un milieu de cryoconservation contenant du sérum, prêt à l'emploi, qui peut être conservé au réfrigérateur jusqu'à un an.
Des centaines de chercheurs lui font confiance
Notre milieu de congélation cellulaire CM-1 est un produit leader sur le marché en Allemagne et en Europe et se distingue par de nombreuses publications impliquant des centaines de lignées cellulaires différentes dans le monde entier. Nous l'avons testé avec plus de 1000 lignées cellulaires issues de notre banque de cellules propriétaire.
Ingrédients optimisés
CM-1 contient des produits sériques. Les milieux de cryoconservation contenant du sérum protègent de manière optimale les cellules pendant leur congélation et présentent l'avantage d'un taux de récupération élevé. CM-1 ayant été testé avec une multitude de lignées cellulaires, vous pouvez être assuré que vos cellules se rétablissent toujours bien.
Contient du FBS, du DMSO, du glucose et des sels
Pouvoir tampon pH = 7,2 à 7,6
Applications et validation
Les cellules conservées dans notre milieu de congélation CM-1 peuvent être utilisées pour le comptage cellulaire, la viabilité et la cryoconservation, la culture cellulaire, la culture de cellules de mammifères, l'analyse de l'expression génique et le génotypage, la transcription in vitro et les réactions en chaîne par polymérase. L'efficacité de chaque lot est évaluée sur des cellules CHO-K1. Chaque lot est soumis à des tests de pH, d'osmolalité, de stérilité et d'endotoxines afin de garantir une qualité élevée.
Initialement conçu pour favoriser la croissance de cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI 1640 a évolué au fil des modifications apportées par les chercheurs et les fournisseurs commerciaux pour convenir à une gamme variée de cellules de mammifères. Il est exceptionnellement compatible avec des lignées cellulaires telles que HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes et carcinomes.
Le milieu RPMI 1640 se distingue des autres milieux de culture cellulaire par sa composition unique. Il contient une quantité substantielle de phosphate, d'acides aminés et de vitamines. Il contient notamment de la biotine, de la vitamine B12 et du PABA, absents du milieu minimal essentiel d'Eagle ou du milieu modifié d'Eagle de Dulbecco. En outre, le milieu RPMI 1640 présente des concentrations significativement élevées de vitamines inositol et choline. Cependant, il ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, une supplémentation avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS) est généralement nécessaire pour fournir des conditions optimales pour la croissance des cellules.
Le système tampon du milieu RPMI 1640 repose sur le bicarbonate de sodium (2,0 g/L) et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologiquement approprié. L'inclusion d'un agent réducteur, le glutathion, distingue encore davantage ce milieu des autres.
La composition unique de cette formule RPMI comprend 2,1 mM de glutamine stable, 2,0 grammes par litre de NaHCO3 et du rouge de phénol.
Contrôle de qualité
pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants
mg/L
Sels inorganiques
Nitrate de calcium x 4H2O
100,00
Sulfate de magnésium anhydre
48,83
Chlorure de potassium
400,00
Chlorure de sodium
5,950.00
hydrogénophosphate de sodium
800,49
Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
2,000.00
Glutathion (rouge)
1,00
Rouge de phénol
5,00
NaHCO3
2,000.00
Acides aminés
L-Arginine x HCl
241,86
L-Asparagine x H2O
56,82
Acide L-aspartique
20,00
L-Cystine x 2HCl
65,19
L-Alanyl-L-Glutamine
447,00
Acide L-Glutamique
20,00
Glycine
10,00
L-Histidine x HCl x H2O
20,27
L-Hydroxyproline
20,00
L-Isoleucine
50,00
L-Leucine
50,00
L-Lysine x HCl
40,00
L-Méthionine
15,00
L-Phénylalanine
15,00
L-Proline
20,00
L-Sérine
30,00
L-Thréonine
20,00
L-Tryptophane
5,00
L-Tyrosine x 2Na
28,83
L-Valine
20,00
Vitamines
acide p-aminobenzoïque
1,00
D-(+)-Biotine
0,20
D-Pantothénate de calcium
0,25
Chlorure de choline
3,00
Acide folique
1,00
myo-Inositol
35,00
Nicotinamide
1,00
Pyridoxine x HCl
1,00
Riboflavine
0,20
Thiamine x HCl
1,00
Vitamine B12
0.005
Initialement conçu pour favoriser la croissance de cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI 1640 a évolué au fil des modifications apportées par les chercheurs et les fournisseurs commerciaux pour convenir à une gamme variée de cellules de mammifères. Il est exceptionnellement compatible avec des lignées cellulaires telles que HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes et carcinomes.
Le milieu RPMI 1640 se distingue des autres milieux de culture cellulaire par sa composition unique. Il contient une quantité substantielle de phosphate, d'acides aminés et de vitamines. Il contient notamment de la biotine, de la vitamine B12 et du PABA, absents du milieu minimal essentiel d'Eagle ou du milieu modifié d'Eagle de Dulbecco. En outre, le milieu RPMI 1640 présente des concentrations significativement élevées de vitamines inositol et choline. Cependant, il ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, une supplémentation avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS) est généralement nécessaire pour fournir des conditions optimales pour la croissance des cellules.
Le système tampon du milieu RPMI 1640 repose sur le bicarbonate de sodium (2,0 g/L) et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologiquement approprié. L'inclusion d'un agent réducteur, le glutathion, distingue encore davantage ce milieu des autres.
Ce milieu RPMI 1640 contient 4,5 grammes de glucose par litre.
Contrôle de qualité
pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants
mg/L
Sels inorganiques
Nitrate de calcium x 4H2O
100,00
Sulfate de magnésium anhydre
48,83
Chlorure de potassium
400,00
Chlorure de sodium
5450,00
hydrogénophosphate de sodium
800,49
Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
4500,00
Glutathion (rouge)
1,00
HEPES
2383,00
Rouge de phénol
5,00
Pyruvate de sodium
110,00
Acides aminés
L-Arginine x HCl
241,86
L-Asparagine x H2O
56,82
Acide L-aspartique
20,00
L-Cystine x 2HCl
65,19
L-Glutamine
300,00
Acide L-Glutamique
20,00
Glycine
10,00
L-Histidine x HCl x H2O
20,27
L-Hydroxyproline
20,00
L-Isoleucine
50,00
L-Leucine
50,00
L-Lysine x HCl
40,00
L-Méthionine
15,00
L-Phénylalanine
15,00
L-Proline
20,00
L-Sérine
30,00
L-Thréonine
20,00
L-Tryptophane
5,00
L-Tyrosine x 2Na
28,83
L-Valine
20,00
Vitamines
acide p-aminobenzoïque
1,00
D-(+)-Biotine
0,20
D-Pantothénate de calcium
0,25
Chlorure de choline
3,00
Acide folique
1,00
myo-Inositol
35,00
Nicotinamide
1,00
Pyridoxine x HCl
1,00
Riboflavine
0,20
Thiamine x HCl
1,00
Vitamine B12
0,01
NaHCO3
1500,00
La solution saline tamponnée au phosphate (PBS) est une solution tampon polyvalente utilisée dans de nombreuses applications biologiques et chimiques, ainsi que dans le traitement des tissus. Notre solution PBS est formulée avec des ingrédients de haute qualité pour garantir un pH constant pendant les expériences. L'osmolarité et les concentrations ioniques de notre solution PBS correspondent à celles du corps humain, ce qui la rend isotonique et non toxique pour la plupart des cellules.
Composition de notre solution PBS
Notre solution PBS est un mélange de tampons phosphatés et de solutions salines de qualité supérieure dont le pH est ajusté. À une concentration de travail de 1X, elle contient 137 mM de NaCl, 2,7 mM de KCl, 8 mM de Na2HPO4 et 2 mM de KH2PO4. Nous avons choisi cette composition sur la base des protocoles du CSHL et de Molecular cloning by Sambrook, qui sont des normes bien établies dans la communauté des chercheurs.
Applications de notre solution PBS
Notre solution PBS est idéale pour une large gamme d'applications dans la recherche biologique. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent idéale pour la dilution de substances et le rinçage de récipients cellulaires. Notre solution PBS avec EDTA peut également être utilisée pour désengager les cellules attachées et agglutinées. Cependant, il est important de noter que les métaux divalents tels que le zinc ne peuvent pas être ajoutés au PBS, car cela peut entraîner une précipitation. Dans ce cas, il est recommandé d'utiliser les tampons Good's. En outre, notre solution PBS s'est avérée être une alternative acceptable au milieu de transport viral pour le transport et le stockage de virus à ARN, tels que le SARS-CoV-2.
Stockage de notre solution PBS
Notre solution PBS peut être conservée à température ambiante, ce qui en facilite l'utilisation et l'accès.
En résumé
En résumé, notre solution PBS est un composant essentiel dans de nombreuses expériences biologiques et chimiques. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent adaptée à de nombreuses applications, de la culture cellulaire au milieu de transport viral. En choisissant notre solution PBS de haute qualité, les chercheurs peuvent optimiser leurs expériences et garantir des résultats précis et fiables.
Composition du PBS
Composants
mg/L
Sels inorganiques
Chlorure de potassium
200,00
Phosphate de potassium dihydrogène
200,00
Chlorure de sodium
8,000.00
hydrogénophosphate de di-sodium anhydre
1,150.00