Cellules HuH-6
Informations générales
Description | Les cellules HuH-6, abréviation de Human Hepatoma 6, sont une lignée cellulaire permanente établie à partir du tissu d'un hépatome prélevé sur un Japonais de 57 ans en 1982. Ces cellules sont devenues un outil précieux pour la recherche biologique, car elles constituent un substitut pratique aux hépatocytes primaires. La principale application des cellules HuH-6 réside dans l'étude de l'infection par le virus de l'hépatite C (VHC) et de l'hépatome. Les chercheurs utilisent souvent ces cellules comme modèle de culture cellulaire pour étudier les mécanismes de l'infection par le VHC et explorer les traitements potentiels de l'hépatome. Un domaine d'étude crucial impliquant les cellules HuH-6 est la compréhension du métabolisme et de la pharmacocinétique des médicaments. Ces cellules sont couramment utilisées pour évaluer le potentiel d'interactions médicamenteuses (DDI) en analysant l'expression génétique de diverses enzymes CYP450. Les organismes de réglementation exigent une évaluation du potentiel de DDI dans les hépatocytes pour des enzymes spécifiques telles que CYP3A4, CYP1A2 et CYP2B6. Les cellules HuH-6, connues sous le nom de Cryopreserved Human Hepatocytes, Induction qualified (HUCPI), ont été caractérisées pour présenter les niveaux d'induction enzymatique recommandés par la FDA pour l'évaluation des DDI. Une autre application importante des cellules HuH-6 est l'étude de l'inhibition de l'efflux médiée par les transporteurs. Le placage des hépatocytes sur du collagène et leur recouvrement par un extrait de membrane basale permet la formation de structures de surface cellulaire polarisées et la réexpression des transporteurs d'efflux biliaires. Cela permet aux chercheurs d'étudier les effets de l'inhibition des médicaments sur le transport de l'efflux biliaire, qui peuvent aller des interactions médicamenteuses à la toxicité hépatique causée par l'accumulation d'acides biliaires intracellulaires. Les hépatocytes pré-caractérisés pour leur fonction de transporteur sont bien adaptés à ces études. En outre, les cellules HuH-6 jouent un rôle crucial dans la découverte pharmaceutique de médicaments au métabolisme plus lent. En mesurant les propriétés métaboliques de base des médicaments qui sont métabolisés à un rythme plus lent, les chercheurs peuvent développer des médicaments qui restent efficaces pendant des périodes plus longues. Les hépatocytes en plaques, comme les cellules HuH-6, conservent leur activité métabolique pendant une longue période, ce qui les rend idéaux pour les essais d'une durée de quatre heures ou plus. Les hépatocytes préqualifiés pour une faible clairance sont particulièrement utiles pour ces études, bien que les hépatocytes qualifiés pour l'induction ou le transporteur (HUCPI) puissent également être utilisés. Les cellules HuH-6 sont une lignée cellulaire précieuse dérivée de tissus d'hépatome. Elles sont couramment utilisées dans la recherche biologique pour étudier l'infection par le virus de l'hépatite C, l'hépatome, le métabolisme et la pharmacocinétique des médicaments, les interactions médicamenteuses, l'inhibition de l'efflux médiée par le transporteur et la découverte de médicaments au métabolisme plus lent. Ces cellules offrent aux chercheurs un modèle pratique et fiable pour étudier divers aspects de la biologie du foie et du développement de médicaments. |
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Organisme | Humain |
Tissus | Foie |
Maladie | Hépatoblastome |
Synonymes | HUH-6, HuH 6, HuH6, HUH6, Huh6 |
Caractéristiques
L'âge | 1 an |
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Genre | Homme |
Ethnicité | Asiatique |
Morphologie | Épithéliale |
Propriétés de croissance | Adhérent |
Identifiants / Biosécurité / Citation
Citation | HuH-6 (numéro de catalogue Cytion 305092) |
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Niveau de biosécurité | 1 |
Expression / Mutation
Manipulation
Milieu de culture | DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 1.5 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a) |
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Suppléments moyens | Compléter le milieu avec 10% de FBS |
Solution de passage | Accutase |
Sous-culture | Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
Taux de fractionnement | 1:2 à 1:4 |
Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
Congélation du milieu | CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100) ou CM-ACF (numéro de catalogue Cytion 806100) |
Manipulation des cultures cryoconservées |
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Contrôle de qualité / Profil génétique / HLA
Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence. Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes. |
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Profil STR |
Amélogénine: x,y
CSF1PO: 10,12
D13S317: 8,12
D16S539: 10,11
D5S818: 8,11
D7S820: 11,12
TH01: 7,8
TPOX: 8
vWA: 14,17
D3S1358: 14,17
D21S11: 29,30
D18S51: 13,21
Penta E: 11
Penta D: 9,13
D8S1179: 10,11
FGA: 19,24
D6S1043: 13,18
D2S1338: 18
D12S391: 18,20
D19S433: 12,12.2
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