Cellules CTX

Le DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) est un milieu de base très polyvalent et largement utilisé, conçu pour favoriser la croissance d'une gamme variée de cellules de mammifères dans la recherche biologique. C'est un milieu idéal pour la culture de fibroblastes primaires, de neurones, de cellules gliales, de HUVEC, de cellules musculaires lisses, ainsi que de lignées cellulaires populaires telles que HeLa, 293, Cos-7 et PC-12.
Le DMEM se distingue des autres milieux par sa composition unique. Il contient une concentration impressionnante d'acides aminés et de vitamines, multipliée par quatre par rapport au milieu minimal essentiel d'Eagle. Initialement développé avec un faible taux de glucose (1 g/L) et du pyruvate de sodium, le DMEM est fréquemment utilisé avec des taux de glucose plus élevés, avec ou sans pyruvate de sodium. Notamment, le DMEM ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance, ce qui nécessite une supplémentation. Pour obtenir une croissance optimale, une approche courante consiste à compléter le DMEM avec 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). En outre, le DMEM utilise un système tampon de bicarbonate de sodium, nécessitant un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologique.
Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est très apprécié parmi les milieux définis pour la culture de cellules et de tissus, car il répond aux besoins de croissance de divers phénotypes de cellules adhérentes. Il surpasse le milieu Eagle original, mis au point dans les années 1950 pour la culture de cellules de poulet, grâce à une formulation supplémentaire améliorée connue sous le nom de modification de Dulbecco. Cette modification multiplie par quatre la teneur en certains acides aminés et en vitamines par rapport au milieu d'origine.
Dans le domaine de la culture cellulaire, le DMEM joue un rôle essentiel en tant que milieu de croissance pour différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. Les chercheurs utilisent également la version modifiée du DMEM pour un large éventail d'applications de recherche, telles que la découverte de médicaments, l'ingénierie tissulaire et l'étude des voies de signalisation cellulaire.

Contrôle de la qualité

Filtré stérilement


Stockage et durée de conservation

Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.


Conditions d'expédition

Température ambiante


Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.


Composition



Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)


Acides aminés
Glycine
30.00



L-Arginine HCl
84.00



L-Cystine 2 HCl
62.57



L-Glutamine
584.00



L-Histidine HClH2O
42.00



L-Isoleucine
105.00



L-Leucine
105.00



L-Lysine HCl
146.00



L-Méthionine
30.00



L-Phénylalanine
66.00



L-Sérine
42.00



L-Thréonine
95.00



L-Tryptophane
16.00



L-Tyrosine 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Vitamines
Chlorure de choline
4.00



D-Pantothénate de calcium
4.00



Acide folique
4.00



myo-Inositol
7.20



Nicotinamide
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavine
0.40



Thiamine HCl
4.00


Sels inorganiques
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Autres composants
D-Glucose
4500.00



Sel de sodium de rouge de phénol
15.90



Pyruvate de sodium
110.00

Solution de détachement cellulaire Accutase avec EDTA et rouge de phénol – 100 ml

Accutase est une solution de détachement cellulaire prête à l'emploi et filtrée de manière stérile, conçue comme une alternative douce à la trypsine/EDTA pour dissocier les cellules mammifères adhérentes des récipients en plastique standard pour culture tissulaire et des surfaces revêtues d'un agent d'adhérence. Elle combine une activité enzymatique protéolytique et collagénolytique dans une solution saline équilibrée pour offrir une dissociation efficace mais contrôlée, préservant les protéines de surface cellulaire et favorisant une viabilité élevée après passage ainsi qu'une réadhérence rapide.

La formulation d'Accutase est basée sur une solution saline tamponnée au phosphate de Dulbecco (DPBS) avec de l'EDTA et du rouge de phénol comme indicateur visuel de pH. Les enzymes sont d'origine non mammifère et non bactérienne, ce qui rend Accutase particulièrement adapté à la recherche sur les cellules souches, aux processus de fabrication de vaccins et à toute application où les contaminants d'origine animale ou microbienne doivent être minimisés. La solution s'auto-inhibe à 37 °C ; aucun réactif neutralisant ni milieu contenant du sérum n'est donc nécessaire après le détachement – les cellules peuvent être transférées directement dans un milieu frais.

Caractéristiques principales

Liquide 1x stérilisé par filtration, prêt à l'emploi – aucune dilution ni reconstitution requise
Activité enzymatique combinée protéolytique et collagénolytique pour une dissociation en douceur
Chaque lot est standardisé à une activité de dissociation définie pour garantir la cohérence d'un lot à l'autre
Enzymes d'origine non mammifère et non bactérienne
S'auto-inhibe à 37 °C – aucune solution neutralisante n'est nécessaire
Formulé dans du PBS de Dulbecco avec de l'EDTA
Rouge de phénol inclus comme indicateur visuel de pH
pH 6,8 – 7,8


Applications typiques
Accutase dissocie en douceur une grande variété de types de cellules adhérentes et sensibles, notamment les cellules souches embryonnaires humaines (hESC), les cellules souches pluripotentes induites humaines (iPSC), les cellules souches neurales, les neurones primaires et les lignées adhérentes couramment cultivées telles que HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 et A549. Exemples d'utilisation :

La sous-culture et le repiquage courants de cellules mammifères adhérentes
Dissociation douce de cellules individuelles issues de hESC, d'iPSC et d'autres lignées sensibles
Préparation d'échantillons pour la cytométrie en flux et l'analyse FACS
L'analyse des marqueurs de surface cellulaire où l'intégrité de l'épitope est cruciale
Tests de migration, de prolifération et d'apoptose cellulaires
Tests de quiescence par privation de sérum et études de transfection d'oncogènes
Tests de migration des cellules tumorales et des cellules de la crête neurale
Augmentation de la production dans les flux de travail en bioréacteur

Pour les travaux de routine, appliquez environ 10 ml d'Accutase par 75 cm² de surface de culture et incubez pendant 5 à 10 minutes à température ambiante. La durée d'incubation optimale doit être déterminée pour chaque lignée cellulaire et ne doit pas dépasser une heure. Avant l'ajout, rincez la couche cellulaire avec une solution saline exempte de Ca²⁺/Mg²⁺, telle que du DPBS sans calcium ni magnésium, afin d'éliminer le sérum résiduel et les cations divalents.

Manipulation et conservation
Conserver le flacon non ouvert congelé à -15 °C ou moins. Décongeler soit à température ambiante, soit pendant une nuit entre +2 °C et +8 °C. Ne pas décongeler Accutase dans un bain-marie à 37 °C, car les températures élevées réduisent l’activité enzymatique. Après décongélation, la solution peut être conservée jusqu’à 2 mois entre +2 °C et +8 °C ; ne pas conserver à température ambiante. Ne préchauffez pas le réactif à 37 °C avant utilisation – ajoutez-le directement aux cellules lavées à température ambiante. Pour une conservation à long terme, il est recommandé de prélever des aliquotes à usage unique afin d'éviter les cycles de décongélation répétés. Travaillez toujours dans des conditions aseptiques.

Qualité
Fabriqué selon des normes de qualité strictes. Chaque lot d'Accutase est filtré à stérilité et testé pour vérifier sa stérilité, son pH, son aspect et son activité de dissociation afin de garantir des performances constantes et reproductibles d'un lot à l'autre.

Spécifications du produit



Spécifications
Détails



Type de produitRéactif de détachement/dissociation cellulaire
FormatLiquide filtré stérile, prêt à l'emploi
Volume100 ml
Concentration d'utilisation1x (prêt à l'emploi)
Activité enzymatiqueProtéolytique et collagénolytique combinées
Origine de l'enzymeNon mammifère et non bactérienne
Système tamponPBS de Dulbecco avec EDTA
Indicateur de pHRouge de phénol
Plage de pH6,8 – 7,8
AspectSolution limpide, de couleur rouge pâle à orange
Température de stockage-15 °C ou moins
Stabilité après décongélationJusqu'à 2 mois entre +2 °C et +8 °C
Volume d'utilisation recommandé~10 ml par 75 cm² de surface de culture
Durée d'incubation typique5 à 10 minutes à température ambiante
Conditions d'expéditionCongelé dans de la glace carbonique
Utilisation prévueÀ usage exclusif pour la recherche et la fabrication ultérieure



Formulation (composition par litre)



Composant
Concentration (mg/L)




Sels inorganiques

Chlorure de sodium (NaCl)8000,00
Hydrogénophosphate disodique (Na₂HPO₄)1150,00
Chlorure de potassium (KCl)200,00
Dihydrogénophosphate de potassium (KH₂PO₄)200,00

Autres composants

EDTA · 4Na (EDTA tétrasodique)220,00
Rouge de phénol3,00
Mélange enzymatique exclusif (activité protéolytique et collagénolytique)1x



Accutase est une marque déposée d'Innovative Cell Technologies, Inc.

Aperçu du produit
Volume : 100 ml Stockage : ≤-15°C Stérilité : Filtration stérile
Lasolution antibiotique/antimycosique (100x) est un concentré stérile, prêt à l'emploi, conçu pour réduire les risques de contamination microbienne dans les cultures cellulaires et les applications de laboratoire connexes. Cette solution 100x contient une combinaison bien établie de pénicilline, de streptomycine et d'amphotéricine B, qui fournit une activité antimicrobienne à large spectre contre les bactéries Gram-positives et Gram-négatives, les levures et les champignons filamenteux. La formulation convient aux cultures de cellules eucaryotes, aux milieux bactériens et à d'autres systèmes sensibles à la contamination, ce qui favorise des opérations de laboratoire propres et cohérentes.
Applications et avantages Optimisée pour les protocoles de recherche de routine, cette solution est largement utilisée pour maintenir des conditions aseptiques dans les flux de culture cellulaire. Elle offre des performances fiables dans les environnements sensibles à la contamination, aidant les chercheurs à réduire le risque de prolifération microbienne sans compromettre la santé des cellules ou la reproductibilité des expériences. La formulation stérile-filtrée élimine le besoin d'étapes de solubilisation supplémentaires, ce qui permet de rationaliser la préparation des milieux et de réduire la variabilité des procédures de laboratoire quotidiennes.
Utilisation et compatibilité Pour obtenir des concentrations de travail standard, diluer la solution au 1:100 dans votre milieu de culture complet. Le produit est compatible avec une large gamme de lignées cellulaires de mammifères et de milieux de base. Grâce à la disponibilité constante des stocks, les chercheurs bénéficient d'une continuité d'approvisionnement fiable et d'une planification logistique simplifiée. La solution doit être conservée à une température ≤ -15 °C et protégée des cycles répétés de congélation-décongélation pour maintenir sa stabilité. Réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures diagnostiques ou thérapeutiques. Ne pas utiliser chez l'homme ou l'animal.