Cellules CT26

Le milieu RPMI 1640, également connu sous le nom de milieu RPMI, est un milieu de culture cellulaire très polyvalent, largement utilisé dans la recherche biologique pour cultiver diverses cellules de mammifères. Développé par George E. Moore, Robert E. Gerner et H. Addison Franklin en 1966 au célèbre Roswell Park Comprehensive Cancer Center, ce milieu tire son nom de son origine au Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Initialement conçu pour favoriser la croissance de cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI 1640 a évolué au fil des modifications apportées par les chercheurs et les fournisseurs commerciaux pour convenir à une gamme variée de cellules de mammifères. Il est exceptionnellement compatible avec des lignées cellulaires telles que HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes et carcinomes.
Le milieu RPMI 1640 se distingue des autres milieux de culture cellulaire par sa composition unique. Il contient une quantité substantielle de phosphate, d'acides aminés et de vitamines. Il contient notamment de la biotine, de la vitamine B12 et du PABA, absents du milieu minimal essentiel d'Eagle ou du milieu modifié d'Eagle de Dulbecco. En outre, le milieu RPMI 1640 présente des concentrations significativement élevées de vitamines inositol et choline. Cependant, il ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, une supplémentation avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS) est généralement nécessaire pour fournir des conditions optimales pour la croissance des cellules.
Le système tampon du milieu RPMI 1640 repose sur le bicarbonate de sodium et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologiquement approprié. L'inclusion d'un agent réducteur, le glutathion, distingue encore davantage ce milieu des autres.
Contrôle de la qualité

Filtré stérilement


Stockage et durée de conservation

Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.


Conditions d'expédition

Température ambiante


Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.



Composition




Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)


Acides aminés
Glycine
10.00



L-Alanyl-L-Glutamine
434.40



L-Arginine
200.00



L-AsparagineH2O
56.82



Acide L-Aspartique
20.00



L-Cystine 2HCl
65.20



Acide L-Glutamique
20.00



L-Histidine HClH2O
20.27



L-Hydroxy-L-Proline
20.00



L-Isoleucine
50.00



L-Leucine
50.00



L-Lysine HCl
40.00



L-Méthionine
15.00



L-Phénylalanine
15.00



L-Proline
20.00



L-Sérine
30.00



L-Thréonine
20.00



L-Tryptophane
5.00



L-Tyrosine 2Na 2H2O
28.83



L-Valine
20.00


Vitamines
acide p-amino-benzoïque
1.00



D-Biotine
0.20



Chlorure de choline
3.00



D-Pantothénate de calcium
0.25



Acide folique
1.00



myo-Inositol
35.00



Nicotinamide
1.00



Pyridoxine HCl
1.00



Riboflavine
0.20



Thiamine HCl
1.00



Vitamine B12
0.005


Sels inorganiques
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Autres composants
D-Glucose
2000.00



L-Glutathion réduit
1.00



Sel de sodium du rouge de phénol
5.30

Réactif de dissociation cellulaire Accutase
- Une alternative douce à la trypsine
Accutase est une solution de détachement cellulaire qui révolutionne l'industrie de la culture cellulaire. Il s'agit d'un mélange d'enzymes protéolytiques et collagénolytiques qui imite l'action de la trypsine et de la collagénase. Contrairement à la trypsine, Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est beaucoup plus doux pour les cellules, ce qui en fait une solution idéale pour le détachement de routine des cellules du matériel plastique de culture tissulaire standard et du matériel plastique à revêtement adhésif. Dans cet article de blog, nous allons explorer les avantages et les utilisations d'Accutase et la façon dont il change la donne dans la culture cellulaire.
Avantages d'Accutase
Accutase présente plusieurs avantages par rapport aux solutions de trypsine traditionnelles. Tout d'abord, il peut être utilisé chaque fois qu'un détachement doux et efficace d'une lignée cellulaire adhérente est nécessaire, ce qui en fait un substitut direct à la trypsine. Deuxièmement, Accutase fonctionne extrêmement bien sur les cellules souches embryonnaires et neuronales, et il a été démontré qu'il maintient la viabilité de ces cellules après le passage. Troisièmement, Accutase préserve la plupart des épitopes pour une analyse ultérieure par cytométrie de flux, ce qui la rend idéale pour l'analyse des marqueurs de la surface cellulaire.
En outre, il n'est pas nécessaire de neutraliser Accutase lors du passage des cellules adhérentes. L'ajout de milieu après la séparation des cellules dilue Accutase de sorte qu'elle n'est plus en mesure de détacher les cellules. Ceci élimine le besoin d'une étape d'inactivation et permet aux techniciens de culture cellulaire de gagner du temps. Enfin, Accutase n'a pas besoin d'être aliquoté et un flacon est stable au réfrigérateur pendant 2 mois.
Applications d'Accutase
Accutase remplace directement la solution de trypsine et peut être utilisé pour le passage des lignées cellulaires. En outre, Accutase donne de bons résultats lors du détachement de cellules pour l'analyse de nombreux marqueurs de surface cellulaire par cytométrie de flux et pour le tri cellulaire. D'autres applications en aval du traitement par Accutase comprennent l'analyse des marqueurs de surface cellulaire, les essais de croissance virale, la prolifération cellulaire, les essais de migration des cellules tumorales, le passage de routine des cellules, l'augmentation de la production (bioréacteur) et la cytométrie de flux.
Composition d'Accutase
Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est un mélange enzymatique naturel avec une activité enzymatique protéolytique et collagénolytique. Il est formulé à une concentration beaucoup plus faible que la trypsine et la collagénase, ce qui le rend moins toxique et plus doux, mais tout aussi efficace.
Efficacité d'Accutase
Accutase s'est avéré efficace pour détacher les cellules primaires et les cellules souches et maintenir une viabilité cellulaire élevée par rapport aux enzymes d'origine animale telles que la trypsine. 100 % des cellules sont récupérées après 10 minutes, et il n'y a aucun inconvénient à laisser les cellules dans Accutase jusqu'à 45 minutes, grâce à l'autodigestion d'Accutase.
En résumé
En conclusion, Accutase est une solution puissante qui change la donne dans le domaine de la culture cellulaire. Grâce à sa nature douce, son efficacité et sa polyvalence, Accutase est l'alternative idéale à la trypsine. Si vous recherchez une solution fiable et efficace pour le détachement cellulaire, Accutase est la solution qu'il vous faut.