Cellules A204

Le DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) est un milieu de base très polyvalent et largement utilisé, conçu pour favoriser la croissance d'une gamme variée de cellules de mammifères dans la recherche biologique. C'est un milieu idéal pour la culture de fibroblastes primaires, de neurones, de cellules gliales, de HUVEC, de cellules musculaires lisses, ainsi que de lignées cellulaires populaires telles que HeLa, 293, Cos-7 et PC-12.
Le DMEM se distingue des autres milieux par sa composition unique. Il contient une concentration impressionnante d'acides aminés et de vitamines, multipliée par quatre par rapport au milieu minimal essentiel d'Eagle. Initialement développé avec un faible taux de glucose (1 g/L) et du pyruvate de sodium, le DMEM est fréquemment utilisé avec des taux de glucose plus élevés, avec ou sans pyruvate de sodium. Notamment, le DMEM ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance, ce qui nécessite une supplémentation. Pour obtenir une croissance optimale, une approche courante consiste à compléter le DMEM avec 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). En outre, le DMEM utilise un système tampon de bicarbonate de sodium (3,7 g/L), nécessitant un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologique.
Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est très apprécié parmi les milieux définis pour la culture de cellules et de tissus, car il répond aux besoins de croissance de divers phénotypes de cellules adhérentes. Il surpasse le milieu Eagle original, mis au point dans les années 1950 pour la culture de cellules de poulet, grâce à une formulation supplémentaire améliorée connue sous le nom de modification de Dulbecco. Cette modification multiplie par quatre la teneur en certains acides aminés et en vitamines par rapport au milieu d'origine.
Dans le domaine de la culture cellulaire, le DMEM joue un rôle essentiel en tant que milieu de croissance pour différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. Les chercheurs utilisent également la version modifiée du DMEM pour un large éventail d'applications de recherche, telles que la découverte de médicaments, l'ingénierie tissulaire et l'étude des voies de signalisation cellulaire.
Contrôle de qualité

pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.

Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.

Composition




Composants
mg/L


Sels inorganiques
Chlorure de calcium anhydre
200,00



Nitrate de fer (III) x 9H2O
0,10



Sulfate de magnésium anhydre
97,66



Chlorure de potassium
400,00



Chlorure de sodium
6.400,00



Dihydrogénophosphate de sodiumanhydre
108,69


Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
4.500,00



Pyruvate de sodium
110,00



Rouge de phénol
15,00



NaHCO3
1.500,00


Acides aminés
L-Arginine x HCl
84,00



L-Cystine x 2HCl
62,58



L-Glutamine
584,00



Glycine
30,00



L-Histidine x HCl xH2O
42,00



L-Isoleucine
104,80



L-Leucine
104,80



L-Lysine x HCl
146,20



L-Méthionine
30,00



L-Phénylalanine
66,00



L-Sérine
42,00



L-Thréonine
95,20



L-Tryptophane
16,00



L-Tyrosine x Na
103,79



L-Valine
93,60


Vitamines
D-Pantothénate de calcium
4,00



Chlorure de choline
4,00



Acide folique
4,00



myo-Inositol
7,00



Nicotinamide
4,00



Pyridoxine x HCl
4,00



Riboflavine
0,40



Thiamine x HCl
4,00

Stockage à long terme
Dans la recherche biologique, la cryoconservation des cellules de mammifères est un outil inestimable. La conservation réussie des cellules est une priorité absolue, car la perte d'une lignée cellulaire en raison d'une contamination ou de mauvaises conditions de stockage entraîne une perte de temps et d'argent, ce qui retarde en fin de compte les résultats de la recherche. Une fois les cellules transférées d'un milieu de croissance cellulaire à un milieu de congélation, elles sont généralement congelées à une vitesse régulée et stockées dans de la vapeur d'azote liquide ou à une température inférieure à -130°C dans un congélateur mécanique. Le milieu de congélation CM-1 permet la cryoconservation des cellules à une température inférieure à -130°C (ou dans l'azote liquide), ce qui élimine essentiellement le besoin d'un congélateur ultra-bas supplémentaire et coûteux, ainsi que les processus de congélation à vitesse contrôlée, longs et exigeants. Il suffit de prélever les cellules, d'aspirer le milieu de croissance, de les remettre en suspension dans le CM-1, de les transférer dans un cryovial et de conserver le flacon à une température inférieure à -130 °C.
Longue durée de conservation
CM-1 est un milieu de cryoconservation contenant du sérum, prêt à l'emploi, qui peut être conservé au réfrigérateur jusqu'à un an.
Des centaines de chercheurs lui font confiance
Notre milieu de congélation cellulaire CM-1 est un produit leader sur le marché en Allemagne et en Europe et se distingue par de nombreuses publications impliquant des centaines de lignées cellulaires différentes dans le monde entier. Nous l'avons testé avec plus de 1000 lignées cellulaires issues de notre banque de cellules propriétaire.
Ingrédients optimisés
CM-1 contient des produits sériques. Les milieux de cryoconservation contenant du sérum protègent de manière optimale les cellules pendant leur congélation et présentent l'avantage d'un taux de récupération élevé. CM-1 ayant été testé avec une multitude de lignées cellulaires, vous pouvez être assuré que vos cellules se rétablissent toujours bien.

Contient du FBS, du DMSO, du glucose et des sels
Pouvoir tampon pH = 7,2 à 7,6

Applications et validation
Les cellules conservées dans notre milieu de congélation CM-1 peuvent être utilisées pour le comptage cellulaire, la viabilité et la cryoconservation, la culture cellulaire, la culture de cellules de mammifères, l'analyse de l'expression génique et le génotypage, la transcription in vitro et les réactions en chaîne par polymérase. L'efficacité de chaque lot est évaluée sur des cellules CHO-K1. Chaque lot est soumis à des tests de pH, d'osmolalité, de stérilité et d'endotoxines afin de garantir une qualité élevée.

Réactif de dissociation cellulaire Accutase
- Une alternative douce à la trypsine
Accutase est une solution de détachement cellulaire qui révolutionne l'industrie de la culture cellulaire. Il s'agit d'un mélange d'enzymes protéolytiques et collagénolytiques qui imite l'action de la trypsine et de la collagénase. Contrairement à la trypsine, Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est beaucoup plus doux pour les cellules, ce qui en fait une solution idéale pour le détachement de routine des cellules du matériel plastique de culture tissulaire standard et du matériel plastique à revêtement adhésif. Dans cet article de blog, nous allons explorer les avantages et les utilisations d'Accutase et la façon dont il change la donne dans la culture cellulaire.
Avantages d'Accutase
Accutase présente plusieurs avantages par rapport aux solutions de trypsine traditionnelles. Tout d'abord, il peut être utilisé chaque fois qu'un détachement doux et efficace d'une lignée cellulaire adhérente est nécessaire, ce qui en fait un substitut direct à la trypsine. Deuxièmement, Accutase fonctionne extrêmement bien sur les cellules souches embryonnaires et neuronales, et il a été démontré qu'il maintient la viabilité de ces cellules après le passage. Troisièmement, Accutase préserve la plupart des épitopes pour une analyse ultérieure par cytométrie de flux, ce qui la rend idéale pour l'analyse des marqueurs de la surface cellulaire.
En outre, il n'est pas nécessaire de neutraliser Accutase lors du passage des cellules adhérentes. L'ajout de milieu après la séparation des cellules dilue Accutase de sorte qu'elle n'est plus en mesure de détacher les cellules. Ceci élimine le besoin d'une étape d'inactivation et permet aux techniciens de culture cellulaire de gagner du temps. Enfin, Accutase n'a pas besoin d'être aliquoté et un flacon est stable au réfrigérateur pendant 2 mois.
Applications d'Accutase
Accutase remplace directement la solution de trypsine et peut être utilisé pour le passage des lignées cellulaires. En outre, Accutase donne de bons résultats lors du détachement de cellules pour l'analyse de nombreux marqueurs de surface cellulaire par cytométrie de flux et pour le tri cellulaire. D'autres applications en aval du traitement par Accutase comprennent l'analyse des marqueurs de surface cellulaire, les essais de croissance virale, la prolifération cellulaire, les essais de migration des cellules tumorales, le passage de routine des cellules, l'augmentation de la production (bioréacteur) et la cytométrie de flux.
Composition d'Accutase
Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est un mélange enzymatique naturel avec une activité enzymatique protéolytique et collagénolytique. Il est formulé à une concentration beaucoup plus faible que la trypsine et la collagénase, ce qui le rend moins toxique et plus doux, mais tout aussi efficace.
Efficacité d'Accutase
Accutase s'est avéré efficace pour détacher les cellules primaires et les cellules souches et maintenir une viabilité cellulaire élevée par rapport aux enzymes d'origine animale telles que la trypsine. 100 % des cellules sont récupérées après 10 minutes, et il n'y a aucun inconvénient à laisser les cellules dans Accutase jusqu'à 45 minutes, grâce à l'autodigestion d'Accutase.
En résumé
En conclusion, Accutase est une solution puissante qui change la donne dans le domaine de la culture cellulaire. Grâce à sa nature douce, son efficacité et sa polyvalence, Accutase est l'alternative idéale à la trypsine. Si vous recherchez une solution fiable et efficace pour le détachement cellulaire, Accutase est la solution qu'il vous faut.

Solution saline tamponnée au phosphate (PBS) : Le tampon optimal pour votre recherche biologique
La solution saline tamponnée au phosphate (PBS) est une solution tampon polyvalente utilisée dans de nombreuses applications biologiques et chimiques, ainsi que dans le traitement des tissus. Notre solution PBS est formulée avec des ingrédients de haute qualité pour garantir un pH constant pendant les expériences. L'osmolarité et les concentrations ioniques de notre solution PBS correspondent à celles du corps humain, ce qui la rend isotonique et non toxique pour la plupart des cellules.
Composition de notre solution PBS
Notre solution PBS est un mélange de tampons phosphatés et de solutions salines de qualité supérieure dont le pH est ajusté. À une concentration de travail de 1X, elle contient 137 mM de NaCl, 2,7 mM de KCl, 8 mM de Na2HPO4 et 2 mM de KH2PO4. Nous avons choisi cette composition sur la base des protocoles du CSHL et de Molecular cloning by Sambrook, qui sont des normes bien établies dans la communauté des chercheurs.
Applications de notre solution PBS
Notre solution PBS est idéale pour une large gamme d'applications dans la recherche biologique. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent idéale pour la dilution de substances et le rinçage de récipients cellulaires. Notre solution PBS avec EDTA peut également être utilisée pour désengager les cellules attachées et agglutinées. Cependant, il est important de noter que les métaux divalents tels que le zinc ne peuvent pas être ajoutés au PBS, car cela peut entraîner une précipitation. Dans ce cas, il est recommandé d'utiliser les tampons Good's. En outre, notre solution PBS s'est avérée être une alternative acceptable au milieu de transport viral pour le transport et le stockage de virus à ARN, tels que le SARS-CoV-2.
Stockage de notre solution PBS
Notre solution PBS peut être conservée à température ambiante, ce qui en facilite l'utilisation et l'accès.
En résumé
En résumé, notre solution PBS est un composant essentiel dans de nombreuses expériences biologiques et chimiques. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent adaptée à de nombreuses applications, de la culture cellulaire au milieu de transport viral. En choisissant notre solution PBS de haute qualité, les chercheurs peuvent optimiser leurs expériences et garantir des résultats précis et fiables.
Composition du PBS




Composants
mg/L


Sels inorganiques
Chlorure de potassium
200,00



Phosphate de potassium dihydrogène
200,00



Chlorure de sodium
8,000.00



hydrogénophosphate de di-sodium anhydre
1,150.00