Cellules SiHa - Éclairer la recherche sur le cancer du col de l'utérus

Les cellulesSiHa sont des cellules cancéreuses du col de l'utérus largement utilisées dans la recherche biomédicale. Elles sont d'excellents hôtes de transfection et conviennent donc aux études d'expression génique. En raison de leur origine humaine et de leur pertinence pour le cancer du col de l'utérus, ces cellules sont principalement utilisées dans les études de biologie du cancer, de virologie et de développement de médicaments.

Caractéristiques générales et origine des cellules SiHa

Il est essentiel de comprendre l'origine et les caractéristiques générales d'une lignée cellulaire, car elles influencent son utilisation dans le cadre de votre recherche. Dans cette section de l'article, vous découvrirez l'origine de la lignée cellulaire SiHa, ses caractéristiques distinctives et bien d'autres choses encore : Qu'est-ce que la lignée cellulaire SiHa ? Que sont les cellules SiHa HPV ? Quelle est l'origine de la lignée cellulaire SiHa ? Quelle est la morphologie de SiHa ?

  • SiHa, la lignée cellulaire de carcinome cervical, a été dérivée de fragments d'une biopsie utérine primaire d'une femme asiatique (55 ans) atteinte d'un cancer épidermoïde [1].
  • La lignée cellulaire SiHa présente un caryotype hypertriploïde. La plupart des cellules ont un nombre moyen de chromosomes compris entre 69 et 72. Cependant, environ 24% des cellules possèdent un nombre modal de chromosomes de 71.
  • Les cellules SiHa sont positives au virus du papillome humain 16. Elles présentent une intégration d'environ 1 à 2 copies du génome HPV par cellule [2].
  • Ces cellules cancéreuses du col de l'utérus présentent une morphologie épithéliale.

Division des cellules cancéreuses du col de l'utérus HeLa au microscope.

Lignée cellulaire SiHa : Informations sur la culture

Maintenir la culture d'une lignée cellulaire n'est pas facile tant que l'on ne connaît pas tous les points clés de sa mise en culture. Vous devez savoir : Quel est le temps de doublement de SiHa ? Qu'est-ce que le milieu cellulaire SiHa ? Comment cultiver la lignée cellulaire SiHa ?

Points clés pour la culture des cellules SiHa

Temps de doublement :

Le temps de doublement des cellules SiHa est d'environ 17 heures.

Adhérentes ou en suspension :

SiHa est une lignée cellulaire adhérente.

Ratio de sous-culture :

Le rapport de sous-culture pour les cellules SiHa est de 1:2 à 1:4. Pour le passage, les cellules adhérentes sont rincées avec 1x PBS. La solution d'Accutase est ajoutée et les cellules sont incubées pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Ensuite, le milieu de culture est ajouté et les cellules sont centrifugées. Le culot cellulaire est remis en suspension et les cellules sont versées dans le nouveau flacon pour la culture.

Milieu de croissance :

Le milieu minimum essentiel d'Eagle (EMEM) contenant 10 % de FBS, 2 mM de L-Glutamine, 2,2 g/L de NaHCO3 et la solution saline équilibrée d'Earle (EBSS) est utilisé pour la croissance idéale des cellules SiHa. Le milieu est remplacé 2 à 3 fois par semaine.

Conditions de croissance :

Les cellules SiHa sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37°C avec un apport de 5% de CO2.

Stockage :

Les flacons congelés de la lignée cellulaire SiHa du cancer du col de l'utérus sont conservés à une température inférieure à -150°C dans un congélateur électrique ou dans la phase vapeur de l'azote liquide pour une plus longue durée.

Processus de congélation et milieu :

Le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF est utilisé pour la congélation des cellules SiHa. Les cellules sont congelées à l'aide d'une méthode de congélation lente qui ne permet qu'une diminution de 1 °C par minute afin de protéger la viabilité des cellules.

Processus de décongélation :

Les cellules congelées sont maintenues pendant 40 à 60 secondes dans un bain-marie à 37°C jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Ensuite, un milieu de croissance frais est ajouté et les cellules sont centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Le culot cellulaire est remis en suspension et les cellules sont distribuées dans un flacon de culture pour la croissance.

Niveau de biosécurité :

Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est nécessaire pour manipuler et maintenir les cultures de cellules SiHa.

Couche adhérente de cellules SiHa à un grossissement de 10× et 20×.

Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire SiHa

Comme d'autres lignées cellulaires de carcinome humain, SiHa possède également des caractéristiques distinctes associées à certains avantages et inconvénients. Nous en présentons ici quelques-uns.

Avantages de la lignée cellulaire SiHa de cancer du col de l'utérus

  • Modèle de cancerdu col de l'utérus
    • Dérivé du carcinome épidermoïde du col de l'utérus.
    • Utilisée pour étudier les mécanismes, la croissance et le développement du cancer du col de l'utérus.
    • Exprime les gènes p53+ et pRB+ qui sont liés à la réparation de l'ADN, à la régulation du cycle cellulaire et à la suppression des tumeurs.
  • Potentiel tumorigène
    • Les cellules SiHa sont tumorigènes et peuvent induire des tumeurs épidermoïdes peu différenciées de grade III chez la souris nude.
    • Elles sont utilisées pour la recherche in vivo sur le cancer et pour tester des traitements anticancéreux.

Inconvénients des cellules SiHa

  • Taux de prolifération
    • Les cellules SiHa prolifèrent rapidement, ce qui entraîne une croissance excessive.
    • Nécessite des passages fréquents, ce qui augmente le risque d'instabilité génétique, qui peut avoir un impact sur le comportement des cellules au fil du temps.

Applications de la recherche sur les cellules SiHa

La lignée cellulaire SiHa est largement utilisée dans la recherche sur le cancer du col de l'utérus. Quelques applications spécifiques de cette lignée cellulaire sont présentées ici.

  • Études liées au papillomavirus humain (HPV) : Les cellules SiHa sont positives au HPV 16 et constituent donc des entités précieuses pour l'étude de l'infection par le papillomavirus humain, de ses mécanismes moléculaires et de son rôle dans le développement et la progression du cancer du col de l'utérus. Les chercheurs utilisent également ces cellules pour étudier la réplication virale, l'intégration et son impact sur les processus des cellules hôtes. Une étude menée en 2020 a utilisé la lignée cellulaire SiHa pour examiner le rôle des oncoprotéines E6/E7 du VPH dans le développement du cancer du col de l'utérus en les ciblant à l'aide de la technologie CRISPR. Les résultats ont révélé que l'élimination des gènes E6/E7 entraînait l'inhibition de la croissance et l'apoptose des cellules SiHa. Par conséquent, ces gènes viraux peuvent servir de cibles médicamenteuses cruciales pour le développement de thérapies contre le cancer du col de l'utérus associé au HPV [3].
  • Biologie du cancer : Les cellules SiHa constituent un modèle inestimable pour l'étude de la biologie du cancer du col de l'utérus, notamment le développement, la progression, les métastases et l'invasion du cancer. Les chercheurs utilisent ces cellules pour explorer les mutations génétiques et les voies moléculaires sous-jacentes qui contribuent au développement et à la croissance du cancer du col de l'utérus. Par exemple, une étude utilisant les cellules SiHa a révélé que la régulation de SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) favorise la prolifération des cellules cancéreuses du col de l'utérus par l'activation de la cascade MAPK [4].
  • Dépistage et test des médicaments : SiHa est une lignée de cancer du col de l'utérus largement utilisée pour évaluer l'efficacité de médicaments anticancéreux potentiels spécifiques au cancer du col de l'utérus associé au HPV. Les chercheurs explorent le potentiel antiprolifératif, apoptotique et anti-métastatique des médicaments en utilisant ces cellules. C'est le cas d'une étude réalisée en 2019 sur le potentiel cytotoxique des extraits de fruits Vatica diospyroides Symington Type SS sur la lignée cellulaire SiHa du cancer du col de l'utérus [5].

Des cellules SiHa pour votre recherche !

Publications de recherche sur les cellules SiHa

La lignée cellulaire SiHa de carcinome squameux du col de l'utérus fait l'objet de quelques publications de recherche importantes et fréquemment citées.

L'effet antitumoral de l'aloe-émodine sur les cellules cancéreuses du col de l'utérus était associé au papillomavirus humain E6/E7 et au métabolisme du glucose

Cette publication dans OncoTargets and Therapy (2019) a proposé qu'un composé naturel, l'aloe-émodine, exerce des effets apoptotiques associés au HPV E6/E7 et au métabolisme du glucose dans les cellules cancéreuses du col de l'utérus SiHa.

Évaluation du potentiel anticancéreux de l'extrait de feuille d'Excoecaria agallocha (L.) sur la lignée cellulaire du cancer du col de l'utérus humain (SiHa) et évaluation du mécanisme d'action sous-jacent

Cet article a été publié dans le Future Journal of Pharmaceutical Sciences en 2022. Cette étude a examiné les activités antitumorales de l'extrait de feuille d'Excoecaria agallocha (L.) sur la lignée cellulaire SiHa du cancer du col de l'utérus.

Effet antiprolifératif de la 1, 10-Phénanthroline couplée à des nanoparticules de ZnO sulfatées sur la lignée cellulaire du cancer du col de l'utérus SiHa

Cette étude publiée dans le Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) propose que la molécule de 1, 10-Phénanthroline, couplée à des nanoparticules de sulfate de zinc, exerce des effets antiprolifératifs significatifs sur les cellules SiHa.

L'astragaloside IV inhibe l'invasion et la métastase des cellules cancéreuses cervicales SiHa par l'intermédiaire des voies PI3K et MAPK médiées par le TGF-β1

Cette recherche a été publiée dans Oncology Reports en 2019. L'étude a révélé que l'Astragaloside IV, un produit naturel, supprime la migration et l'invasion des cellules SiHa en modulant les voies de signalisation PI3K et MAPK médiées par le TGF-β1.

L'IFI16 favorise la progression du cancer du col de l'utérus en régulant PD-L1 dans l'immunomicroenvironnement par le biais de la voie STING-TBK1-NF-kB

Cette étude parue dans Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) révèle que l'IFI16 (interferon-gamma inducible protein 16) régule le gène PD-L1 en activant la voie STING-TBK1-NF-kB pour favoriser la croissance des cellules cancéreuses du col de l'utérus SiHa.

Ressources pour la lignée cellulaire SiHa : Protocoles, vidéos et autres

Voici quelques ressources en ligne concernant les cellules SiHa.

  • Transfection des cellules SiHa : Cet article de recherche contient un protocole pour le maintien des cellules SiHa du cancer du col de l'utérus et pour la transfection des cellules SiHa.

Le lien suivant contient des informations sur la culture des cellules SiHa.

  • Lignée cellulaire SiHa: Ce site web contient de nombreuses données précieuses sur la lignée cellulaire SiHa. Il contient notamment des informations sur les milieux de croissance, les conditions de culture, les protocoles de sous-culture des cellules SiHa et la manipulation de ses cultures prolifératives et cryoconservées.

FAQ pour les cellules SiHa de carcinome cervical

Références

  1. Melzer, C., J. von der Ohe, et R. Hass, Concise review : crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem cells, 2018. 36(7) : p. 951-968.
  2. Ostrowska, K.M., et al, Investigation of the influence of high-risk human papillomavirus on the biochemical composition of cervical cancer cells using vibrational spectroscopy. Analyst, 2010. 135(12) : p. 3087-3093.
  3. Chen, Y., et al, In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7 mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
  4. Fan, Y., et al, SEC61G favorise la prolifération du cancer du col de l'utérus en activant la voie de signalisation MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
  5. Chothiphirat, A., et al, Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cells lines. The Scientific World Journal, 2019. 2019.

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