Cellules SiHa : un éclairage sur la recherche sur le cancer du col de l'utérus
Les cellules SiHa sont des cellules cancéreuses du col de l'utérus largement utilisées dans la recherche biomédicale. Elles constituent d'excellents hôtes de transfection et sont donc adaptées aux études d'expression génique. En raison de leur origine humaine et de leur lien avec le cancer du col de l'utérus, ces cellules sont principalement utilisées dans la biologie du cancer, la virologie et les études de développement de médicaments.
- Milieu de culture
- Le milieu minimal essentiel d’Eagle (EMEM) contenant 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃ et la solution saline équilibrée d’Earle (EBSS) est utilisé pour assurer une croissance optimale des cellules SiHa. Le milieu est renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules SiHa est d’environ 17 heures.
- Type de croissance
- SiHa est une lignée cellulaire adhérente.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander SiHa
Caractéristiques générales et origine des cellules SiHa
Il est essentiel de bien comprendre l’origine et les caractéristiques générales d’une lignée cellulaire, car cela influe sur son utilisation dans le cadre de vos recherches. Dans cette section de l’article, vous découvrirez l’origine de la lignée cellulaire SiHa, ses caractéristiques distinctives et bien plus encore : Qu’est-ce que la lignée cellulaire cancéreuse SiHa ? Les cellules SiHa sont-elles associées au HPV ? Quelle est l’origine de la lignée cellulaire SiHa ? Quelle est la morphologie des cellules SiHa ?
- SiHa, la lignée cellulaire de carcinome cervical, a été dérivée de fragments d’une biopsie utérine primaire prélevée sur une femme asiatique (âgée de 55 ans) atteinte d’un cancer épidermoïde [1].
- La lignée cellulaire SiHa présente un caryotype hypertriploïde. La plupart des cellules ont un nombre moyen de chromosomes compris entre 69 et 72. Cependant, environ 24 % des cellules possèdent un nombre modal de chromosomes égal à 71.
- Les cellules SiHa sont positives au virus du papillome humain de type 16. Elles présentent une intégration d’environ 1 à 2 copies du génome du HPV par cellule [2].
- Ces cellules de cancer du col de l'utérus présentent une morphologie épithéliale.
Lignée cellulaire SiHa : informations sur la culture
Il n’est pas facile d’entretenir une culture de lignée cellulaire tant que l’on ne connaît pas tous les points clés de sa culture. Vous devez savoir : quel est le temps de doublement des cellules SiHa ? Quel est le milieu de culture des cellules SiHa ? Comment cultiver la lignée cellulaire SiHa ?
Points clés pour la culture des cellules SiHa
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules SiHa est d’environ 17 heures.
Adhérentes ou en suspension :
La lignée cellulaire SiHa est une lignée adhérente.
Rapport de repiquage :
Le rapport de repiquage des cellules SiHa est compris entre 1:2 et 1:4. Pour le repiquage, les cellules adhérentes sont rincées avec du PBS 1x. On ajoute une solution d’Accutase, puis les cellules sont incubées pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Ensuite, on ajoute le milieu de culture, puis on centrifuge les cellules. Le culot cellulaire est remis en suspension, et les cellules sont transférées dans un nouveau flacon pour la culture.
Milieu de croissance :
Le milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM) contenant 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃ et la solution saline équilibrée d'Earle (EBSS) est utilisé pour assurer une croissance optimale des cellules SiHa. Le milieu est renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de culture :
Les cellules SiHa sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO₂.
Conservation :
Les flacons congelés de la lignée cellulaire SiHa de cancer du col de l'utérus sont conservés à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique ou, pour une conservation à plus long terme, dans la phase vapeur d'azote liquide.
Procédé et milieu de congélation :
Le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF est utilisé pour la congélation des cellules SiHa. Les cellules sont congelées selon une méthode de congélation lente qui ne permet qu’une baisse de 1 °C par minute afin de préserver la viabilité des cellules.
Procédé de décongélation :
Les cellules congelées sont maintenues pendant 40 à 60 secondes dans un bain-marie à 37 °C jusqu’à ce qu’il ne reste plus qu’un petit amas de glace. Ensuite, un milieu de culture frais est ajouté et les cellules sont centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Le culot cellulaire est remis en suspension, puis les cellules sont transférées dans un flacon de culture pour la culture.
Niveau de biosécurité :
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est requis pour la manipulation et l’entretien des cultures cellulaires SiHa.
Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire SiHa
À l’instar d’autres lignées cellulaires de carcinomes humains, la lignée SiHa présente également certaines caractéristiques distinctives associées à des avantages et des inconvénients. Nous en avons abordé ici quelques-unes parmi les plus significatives.
Avantages de la lignée cellulaire SiHa du cancer du col de l'utérus
- Modèle de cancer du col de l'utérus
- Issue d’un carcinome épidermoïde du col de l’utérus.
- Utilisée pour étudier les mécanismes, la croissance et le développement du cancer du col de l'utérus.
- Exprime les gènes p53+ et pRB+, qui sont liés à la réparation de l’ADN, à la régulation du cycle cellulaire et à la suppression tumorale.
- Potentiel tumorigène
- Les cellules SiHa sont tumorigènes et peuvent induire des tumeurs épidermoïdes de grade III peu différenciées chez la souris nue.
- Utilisées pour la recherche sur le cancer in vivo et pour tester des traitements anticancéreux.
Inconvénients des cellules SiHa
- Taux de prolifération
- Les cellules SiHa prolifèrent rapidement, ce qui entraîne une croissance excessive.
- Elles nécessitent des repiquages fréquents, ce qui augmente le risque d’instabilité génétique, susceptible d’influencer le comportement cellulaire au fil du temps.
Applications de la lignée cellulaire SiHa dans la recherche
La lignée cellulaire SiHa est largement utilisée dans la recherche sur le cancer du col de l'utérus. Quelques applications spécifiques de cette lignée cellulaire sont abordées ici.
- Études liées au papillomavirus humain (HPV) : les cellules SiHa sont positives pour le HPV 16 ; elles constituent donc des modèles précieux pour étudier l’infection par le papillomavirus humain, ses mécanismes moléculaires et son rôle dans le développement et la progression du cancer du col de l’utérus. Les chercheurs utilisent également ces cellules pour étudier la réplication et l’intégration virales, ainsi que leur impact sur les processus des cellules hôtes. Une étude menée en 2020 a utilisé la lignée cellulaire SiHa pour examiner le rôle des oncoprotéines E6/E7 du HPV dans le développement du cancer du col de l’utérus en les ciblant à l’aide de la technologie CRISPR. Les résultats ont révélé que l’inhibition de l’expression des gènes E6/E7 entraînait une inhibition de la croissance des cellules SiHa et leur apoptose. Par conséquent, ces gènes viraux pourraient constituer des cibles thérapeutiques cruciales pour le développement de traitements contre le cancer du col de l’utérus associé au HPV [3].
- Biologie du cancer : les cellules SiHa constituent un modèle inestimable pour l’étude de la biologie du cancer du col de l’utérus, notamment son développement, sa progression, ses métastases et son invasion. Les chercheurs utilisent ces cellules pour explorer les mutations génétiques et les voies moléculaires sous-jacentes contribuant au développement et à la croissance du cancer du col de l’utérus ; par exemple, une étude a utilisé des cellules SiHa et a montré que la surexpression de SEC61G (sous-unité gamma du translocon SEC61) favorise la prolifération des cellules cancéreuses du col de l’utérus par l’activation de la cascade MAPK [4].
- Criblage et essais de médicaments : la lignée SiHa est largement utilisée pour évaluer l’efficacité de médicaments anticancéreux potentiels spécifiques au cancer du col de l’utérus associé au HPV. Les chercheurs étudient le potentiel antiprolifératif, apoptotique et antimétastatique des médicaments à l’aide de ces cellules. C’est le cas notamment d’une étude menée en 2019 qui a examiné le potentiel cytotoxique d’extraits de fruits de Vatica diospyroides Symington Type SS sur la lignée cellulaire SiHa du cancer du col de l’utérus [5].
Des cellules SiHa pour vos recherches !
Publications scientifiques consacrées aux cellules SiHa
Certaines publications scientifiques importantes et fréquemment citées portent sur la lignée cellulaire SiHa de carcinome épidermoïde du col de l'utérus.
Cette publication parue dans *OncoTargets and Therapy* (2019) a suggéré qu’un composé naturel, l’aloé-émodine, exerce des effets apoptotiques liés aux protéines E6/E7 du HPV et au métabolisme du glucose sur les cellules cancéreuses du col de l’utérus SiHa.
Cet article a été publié dans le *Future Journal of Pharmaceutical Sciences* en 2022. Cette étude a examiné les activités antitumorales de l’extrait de feuilles de la plante *Excoecaria agallocha (L.)* sur la lignée cellulaire de cancer du col de l’utérus SiHa.
Cette étude, publiée dans le Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), a montré que la molécule de 1,10-phénanthroline, une fois couplée à des nanoparticules de sulfate de zinc, exerce des effets antiprolifératifs significatifs sur les cellules SiHa.
Cette recherche a été publiée dans la revue Oncology Reports en 2019. L’étude a révélé que l’astragaloside IV, un produit naturel, inhibe la migration et l’invasion des cellules SiHa en modulant les voies de signalisation PI3K et MAPK médiées par le TGF-β1.
Cette étude publiée dans *Biomedicine & Pharmacotherapy* (2020) a révélé que l’IFI16 (protéine 16 inductible par l’interféron gamma) régule le gène PD-L1 en activant la voie STING-TBK1-NF-kB afin de favoriser la croissance des cellules cancéreuses cervicales SiHa.
Ressources sur la lignée cellulaire SiHa : protocoles, vidéos et plus encore
Voici quelques ressources en ligne consacrées aux cellules SiHa.
- Transfection des cellules SiHa : cet article de recherche contient un protocole pour la culture des cellules SiHa issues d'un cancer du col de l'utérus et pour leur transfection.
Le lien suivant contient des informations sur la culture des cellules SiHa.
- Lignée cellulaire SiHa : ce site web contient de nombreuses données précieuses sur la lignée cellulaire SiHa. Il s'agit notamment d'informations sur les milieux de croissance, les conditions de culture, les protocoles de repiquage des cellules SiHa et la manipulation de leurs cultures prolifératives et cryoconservées.
Foire aux questions sur les cellules de carcinome cervical SiHa
Les cellules SiHa sont une lignée cellulaire cancéreuse humaine dérivée du carcinome épidermoïde du col de l'utérus. Elles sont largement utilisées dans la recherche sur les carcinomes cervicaux, en particulier dans les études liées au papillomavirus humain de type 16 (HPV-16), dont on sait qu'il joue un rôle crucial dans la pathogenèse du cancer du col de l'utérus.
Dans les cellules SiHa, l'ADN du HPV-16 est généralement intégré dans les chromosomes de la cellule hôte. Les sites d'intégration chromosomique du HPV peuvent être essentiels pour comprendre la progression et la résistance au traitement du carcinome du col de l'utérus.
Oui, les cellules SiHa sont un élément essentiel du panel de cellules du cancer du col de l'utérus utilisé pour la caractérisation biologique des cellules tumorales, l'examen des effets des chimiothérapies et le développement de nouveaux médicaments pour la recherche scientifique.
Absolument. Les cellules SiHa, qui contiennent de l'ADN de VPH intégré, sont précieuses pour l'hybridation in situ et d'autres techniques de biologie moléculaire afin d'étudier le rôle du VPH dans le développement des néoplasmes cervicaux et l'amélioration potentielle des effets de la curcumine sur le traitement du cancer.
Les cellules SiHa sont tumorigènes chez les souris immunodéficientes, ce qui en fait un modèle approprié pour étudier la pathogénicité du carcinome cervical et les effets in vivo de thérapeutiques potentielles.
Les références concernant les cellules SiHa se trouvent dans la littérature scientifique de revues telles que Cancer Research (Cancer Res), Biochemistry and Cell Biology, Journal of Cellular Physiology, et bien d'autres encore. Elles fournissent des informations détaillées sur l'utilisation des cellules SiHa dans le contexte des études du génome du cancer, du phénotypage et de l'examen des fonctions des gènes.
Le profil génétique des cellules SiHa, y compris l'expression de plusieurs gènes et l'acquisition du CDV, contribue à la compréhension globale de l'étiologie du carcinome cervical et au développement de thérapies ciblées.
Les cellules SiHa sont maintenues en culture cellulaire primaire, en adhérant à des conditions de croissance spécifiques et à des exigences en matière de milieu afin de préserver leurs caractéristiques et leur fonctionnalité à des fins de recherche.
Références
- Melzer, C., J. von der Ohe et R. Hass, « Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential ». Stem cells, 2018. 36(7) : p. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al., Étude de l’influence du papillomavirus humain à haut risque sur la composition biochimique des cellules cancéreuses du col de l’utérus à l’aide de la spectroscopie vibrationnelle. Analyst, 2010. 135(12) : p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., Inhibition de la croissance in vitro et in vivo de cellules cancéreuses du col de l’utérus humain par clivage des ARNm E6/E7 du papillomavirus humain à l’aide du système CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178 : p. 104794.
- Fan, Y., et al., SEC61G favorise la prolifération du cancer du col de l’utérus en activant la voie de signalisation MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Potentiel anticancéreux des extraits de fruits de Vatica diospyroides de type Symington SS et leur effet sur la mort cellulaire programmée des lignées cellulaires du cancer du col de l’utérus. The Scientific World Journal, 2019. 2019.