Cellules RBL-2H3 - Importance de la RBL-2H3 dans la réponse allergique et les études immunologiques
La lignée cellulaire RBL-2H3 est une lignée cellulaire de leucémie basophile dérivée du rat, utilisée dans la recherche immunologique. Elle sert de système modèle pour l'étude de la physiologie, du comportement et des fonctions des mastocytes. Ces cellules sont également utilisées pour étudier les réactions allergiques, les processus immunologiques, ainsi que les tests et le développement de médicaments.
Cet article donne un aperçu de l'origine des cellules RBL-2H3, de leurs caractéristiques générales, de leurs conditions de culture et de leurs applications en recherche.
Cellules RBL-2H3 : Origine et caractéristiques générales
Avant d'utiliser une lignée de cellules basophiles dans vos recherches, vous devez connaître son origine et ses caractéristiques générales. Cette section de l'article vous informera sur les principes de base des cellules RBL-2H3. Par exemple, qu'est-ce que les mastocytes RBL-2H3 ? Pourquoi utiliser les cellules RBL-2H3 ? Que sont les cellules RBL-2H3 dans la leucémie basophile du rat ? Quelle est la morphologie des cellules RBL-2H3 ? Les cellules RBL-2H3 sont-elles immortelles ?
- Les cellules RBL-2H3 sont des cellules de leucémie basophile dérivées de cellules basophiles de rats Wistar en 1978 au Laboratoire d'immunologie de l'Institut national de recherche dentaire.
- Les cellules RBL-2H3 possèdent le récepteur tyrosine kinase c-kit et les récepteurs de la protéase mastocytaire II (RMCP-II), ce qui en fait un modèle mastocytaire potentiel. C'est pourquoi elles sont communément appelées mastocytes, bien qu'elles soient issues de basophiles de rat [1].
- Ils libèrent de l'histamine et d'autres médiateurs lors de l'activation et expriment des récepteurs d'IgE de haute affinité.
- Les cellules RBL-2H3 présentent une morphologie de type fibroblaste.
Cellules RBL-2H3 : Informations sur la culture
Cette section vous aidera à apprendre quelques aspects clés de la culture de la lignée cellulaire RBL-2H3. Vous saurez Quel est le temps de doublement des cellules RBL-2H3 ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules RBL-2H3 ? Quel est le protocole de culture des cellules RBL-2H3 ? Quel est le milieu de congélation de la lignée cellulaire RBL-2H3 ?
Points clés pour la culture des cellules RBL-2H3
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Temps de doublement de la population : |
Le temps de doublement des mastocytes RBL-2H3 est d'environ 50 à 60 heures. |
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Adhérentes ou en suspension : |
La lignée RBL-2H3 est une lignée cellulaire adhérente. |
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Ratio de sous-culture : |
Pour les cellules RBL-2H3, le ratio de division est maintenu entre 1:2 et 1:4. Les cellules adhérentes sont lavées avec une solution 1 x PBS exempte de magnésium et de calcium. La solution de passage Accutase est ajoutée et les cellules sont maintenues à température ambiante pendant 10 minutes pour se détacher du fond du récipient de culture. Du milieu frais est ajouté et les cellules sont centrifugées. Les cellules récoltées sont soigneusement remises en suspension dans du milieu frais et versées dans de nouveaux flacons contenant du milieu de croissance. |
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Milieu de croissance : |
Le milieu EMEM contenant 10 % de FBS, 2 mM de L-Glutamine, 2,2 g/L de NaHCO3 et du sel EBSS est utilisé pour la culture des cellules RBL-2H3. Le milieu doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine. |
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Conditions de croissance : |
Les cellules RBL-2H3 sont cultivées dans un incubateur humidifié réglé à une température de 37 °C et connecté à une source deCO2 à 5 %. |
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Stockage : |
Les cellules sont conservées dans la phase vapeur de l'azote liquide ou à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique afin de protéger la viabilité des cellules à long terme. |
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Processus de congélation et milieu : |
Le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF est utilisé pour congeler les cellules RBL-2H3 en utilisant un processus de congélation lente. En bref, cette méthode permet une diminution de la température de 1 °C par minute et protège les cellules contre les chocs. |
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Processus de décongélation : |
Les cellules RBL-2H3 sont décongelées dans un bain-marie préréglé (37 °C) pendant environ 60 secondes. Ensuite, les cellules sont ajoutées à un milieu de culture frais et centrifugées. Cette étape est essentielle pour éliminer les composants du milieu de congélation. Ensuite, le culot cellulaire est remis en suspension dans un milieu de croissance et les cellules sont distribuées dans un flacon pour la culture. |
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Niveau de biosécurité : |
Les cellules RBL-2H3 doivent être conservées dans des laboratoires de biosécurité 1. |
Avantages et limites de la lignée cellulaire de basophiles RBL-2H3
Les cellules RBL-2H3 sont couramment utilisées dans la recherche immunologique. Cette section présente leurs principaux avantages et limites.
Avantages
- Facile à cultiver : Les cellules RBL-2H3 peuvent être facilement cultivées et maintenues en laboratoire. Cela facilite une expérimentation rentable et reproductible, ce qui en fait un choix populaire pour les études initiales en immunologie.
Limites
- Origine non humaine : Provenant de basophiles de rat, les cellules RBL-2H3 peuvent ne pas imiter avec précision les processus biologiques humains, ce qui peut limiter leur applicabilité dans les études de recherche spécifiques à l'homme. Cela nécessite une interprétation prudente des données lors de l'extrapolation des résultats aux systèmes humains.
- Modèle simplifié de mastocytes : Bien que ces cellules constituent un modèle de base pour l'étude des fonctions des mastocytes, elles ne représentent pas entièrement la nature complexe des interactions entre les mastocytes et le système immunitaire humain. Par conséquent, elles peuvent ne pas modéliser de manière adéquate les rôles multiples des mastocytes dans les réponses immunitaires ou les conditions pathologiques in vivo.
La lignée cellulaire RBL-2H3 : Une pierre angulaire de la recherche immunologique
Recherche sur les basophiles et les mastocytes à l'aide de la lignée cellulaire RBL-2H3
La lignée cellulaire RBL-2H3, dérivée de Rattus norvegicus, est un modèle clé pour l'étude de la biologie des basophiles et des mastocytes. Ces mastocytes de rat fournissent des informations essentielles sur la libération de médiateurs par les mastocytes, ce qui est crucial pour comprendre les conditions allergiques telles que la rhinite allergique. Grâce à ces cellules, les chercheurs explorent la dynamique des récepteurs cellulaires et l'établissement de synapses immunologiques, qui sont au cœur de la réponse du système immunitaire aux allergènes.Une étude intéressante publiée en 2019 a utilisé la lignée cellulaire RBL-2H3 et a étudié les mécanismes à l'origine des réactions pseudo-allergiques produites par l'injection de Qingkailing. L'étude a révélé que la cascade de signalisation PI3K-RAC1 déclenche partiellement cette réponse allergique dans les cellules [2]
Dynamique des synapses immunologiques dans la recherche sur les allergies
Largement utilisées dans la recherche en immunologie, les cellules RBL-2H3 sont particulièrement efficaces pour étudier la dynamique des synapses immunologiques. Cela permet d'élucider les processus de communication du système immunitaire, avec des applications dans l'étude des mastocytes du sang périphérique et du péritoine. Ces recherches sont essentielles pour une compréhension globale de la réponse immunitaire dans des contextes à la fois systémiques et localisés
Dépistage des médicaments et tests de toxicité
Dans le cadre du dépistage et des tests de médicaments, la réactivité des cellules RBL à divers stimuli est exploitée, y compris l'étude de la façon dont H2O2 inhibe les réponses médiées par les IgE. Ces cellules jouent un rôle essentiel dans le développement de traitements pour des maladies telles que les infections streptococciques, où les streptocoques du groupe mitis inhibent l' activation des mastocytes. En outre, les chercheurs évaluent les effets toxiques de diverses substances, y compris les produits chimiques, les médicaments et les nanoparticules, à l'aide de ce modèle RBL 2H3 mc. Ainsi, une étude récente (2022) a évalué la cytotoxicité des microplastiques en polystyrène sur les cellules RBL-2H3. Ils ont constaté que les microplastiques endommagent les organites des cellules RBL-2H3 et favorisent la mort cellulaire [3]. Une autre étude réalisée en 2021 a évalué le potentiel antiallergique et anti-inflammatoire d'un produit naturel, la néférine, en utilisant le modèle de la cellule RBL-2H3. L'étude a révélé les bonnes propriétés antiallergiques et anti-inflammatoires du composé [4]
Méthodologies avancées de mesure immunologique
La libération constante et mesurable de médiateurs par les cellules RBL-2H3 les rend idéales pour une fluorimétrie pratique, facilitant des mesures précises et exactes cruciales pour l'étude des maladies et l'évaluation des agents thérapeutiques.
La lignée cellulaire RBL-2H3, originaire de Rattus norvegicus, est un atout inestimable pour la recherche fondamentale et appliquée dans le domaine de l'immunologie. Elle offre de grandes possibilités pour faire progresser nos connaissances et le traitement des maladies immunologiques
Ligne cellulaire RBL-2H3 pour la recherche immunologique avancée
Cellules RBL-2H3 : Publications de recherche
Voici quelques publications de recherche passionnantes sur les mastocytes RBL-2H3 :
Activité inhibitrice de la narirutine sur la dégranulation des cellules RBL-2H3
Cet article de recherche a été publié dans la revue Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). L'étude propose que la narirutine, un composé naturel, exerce des effets inhibiteurs sur la dégranulation des cellules RBL 2H3 en régulant les voies de signalisation NF-κB, MAPK et tyrosine kinase.
Cette recherche publiée dans l'International Journal of Molecular Sciences (2020) propose que le composé apigénine supprime de manière significative les réponses allergiques et inflammatoires des cellules RBL-2H3 et RAW264.7. Il peut donc servir d'agent potentiel pour lutter contre les maladies liées à l'immunité.
Cet article de recherche publié dans l'International Journal of Molecular Sciences (2021) évalue les effets antiallergiques et anti-inflammatoires d'un produit naturel, la saponarine, en utilisant différentes lignées cellulaires, y compris RBL-2H3.
Cette étude Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) a révélé que les extraits de Benchalokawichian et certains constituants actifs exercent des effets inhibiteurs potentiels sur la libération de la ß-hexosaminidase par les cellules RBL 2H3.
Cet article a été publié en 2018 dans l'International Journal of Biological Macromolecules. L'étude indique que la spiruline maxima, un produit naturel, inhibe la dégranulation des cellules RBL 2H3 en empêchant la phosphorylation des MAPK et de l'AKT.
Ressources pour la lignée cellulaire RBL-2H3 : Protocoles, vidéos et autres
RBL-2H3 est une lignée de mastocytes largement utilisée. Les ressources disponibles couvrant les protocoles de culture et de transfection de RBL-2H3 sont mentionnées ici :
- RBL 2H3 MC model : Cet article de recherche comprend des protocoles pour le maintien des cultures de RBL-2H3 et pour la transfection de RBL-2H3.
Voici quelques ressources expliquant le protocole de culture des cellules RBL-2H3 :
- Cellules RBL-2H3 : Ce site web vous permet d'apprendre les protocoles de culture cellulaire pour la lignée cellulaire RBL-2H3. Il contient également des informations sur les milieux et les conditions de culture des cellules RBL-2H3.
Ligne cellulaire RBL-2H3 : FAQ essentielles pour les chercheurs
Références
- Passante, E. et N. Frankish, The RBL-2H3 cell line : its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11) : p. 737-45.
- Li, Q., et al, Pseudo-allergic reaction caused by Qingkailing injection partially via the PI3K-Rac1 signaling pathway in RBL-2H3 cells. Toxicology Research, 2019. 8(3) : p. 353-360.
- Liu, L., et al, Les micro (nano) plastiques de polystyrène endommagent les organites des cellules RBL-2H3 et favorisent MOAP-1 pour induire l'apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al, Anti-allergic and anti-inflammatory effects of neferine on RBL-2H3 cells. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20) : p. 10994.