WI-38 rakud

Cytion's Freeze Medium CM-1 on tipptasemel krüokonserveerimise keskkond, mis on loodud selleks, et tagada rakkude elujõulisuse ja funktsionaalsuse kõrgeim tase pärast sulatamist. See mitmekülgne keskkond sobib laiale spektrile rakutüüpe, sealhulgas nii inim
- kui ka loomsetele rakkudele, muutes selle oluliseks vahendiks mitmesuguste teadusrakenduste jaoks. Freeze Medium CM-1, mis on koostatud hoolikalt tasakaalustatud krüoprotektiivide ja oluliste toitainete kombinatsiooniga, minimeerib jääkristallide moodustumist ja rakkude stressi külmutamise ajal, säilitades seega rakkude terviklikkuse.
Freeze Medium CM-1 põhiomadused on järgmised:

Laiaulatuslik kokkusobivus: Tõhus paljude rakutüüpide, sealhulgas primaarsete rakkude, tüvirakkude ja väljakujunenud rakuliinide puhul.
Kõrge elujõulisus: Optimeeritud selleks, et maksimeerida rakkude taastumist ja elujõulisust pärast sulatamist, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Kasutusvalmis: Mugav valmistada ja steriliseerida koheseks kasutamiseks, vähendades ettevalmistusaega ja saastumisohtu.
Suurendatud stabiilsus: Säilitab järjepideva tulemuslikkuse standardsetes krüokonserveerimistingimustes, tagades reprodutseeritavad tulemused.
Pikk säilivusaeg: CM-1 on seerumit sisaldav, kasutusvalmis krüokonserveerimissöötme, mida võib säilitada külmkapis kuni üks aasta.


CM-1 kasutamine rakkude külmutamiseks

CM-1 kasutamiseks nii adherentsete kui ka suspensioonirakkude külmutamiseks järgige järgmisi samme

Adherentsete rakkude puhul peske ja eraldage need kultuurisubstraadist. Suspensioonirakkude puhul jätkake otse järgmise sammuga.
Arvutage rakke, et tagada nende õige kontsentratsioon.
Pelleteerimiseks tsentrifuugige rakud, seejärel resuspenseerige need CM-1 külmutuskeskkonnas.
Ülekandke resuspendeeritud rakud krüoklaasidesse.
Kasutage enne rakkude pikaajalisse säilitamisse viimist aeglast külmutamist





Meetod
Kirjeldus
Sammud





❄️
Käsitsi külmutamine

Järkjärguline meetod, mis hõlmab järk-järgulist temperatuuri vähendamist rakkude elujõulisuse tagamiseks

1️⃣ Asetage rakud külmutuskeskkonda 4 °C sügavkülmikusse 40 minutiks.
2️⃣ Viiakse 24 tunniks -80 °C sügavkülmikusse.
3️⃣ Säilitada rakke pikaajalise säilitamise eesmärgil vedelas lämmastikus



❄️
Mr. Frosty kasutamine

Mugav seade, mis võimaldab kontrollitud külmutamiskiirust ilma elektrienergiata

1️⃣ Valmistage rakud krüoviaalides külmutuskeskkonnaga ette.
2️⃣ Asetage krüoviaalid Mr. Frosty konteinerisse.
3️⃣ Säilitage 24 tundi temperatuuril -80 °C enne vedela lämmastiku sisse viimist



❄️
Reguleeritava kiirusega sügavkülmik

Thermo Fisheri või teiste tootjate kõrge täpsusega sügavkülmik, mis on ette nähtud temperatuuri kontrollitud langetamiseks

1️⃣ Programmeerige seade nii, et temperatuur langeb järk-järgult.
2️⃣ Asetage ettevalmistatud rakud sügavkülmikusse.
3️⃣ Pärast külmutamistsüklit viige rakud üle vedela lämmastikuga









Säilitage krüoviaalid temperatuuril alla -130 °C või pikaajalise säilitamise eesmärgil vedelas lämmastikus.


Koostisosad

Sisaldab FBS, DMSO, glükoosi, soolasid
Puhverdusvõime: pH = 7,2 kuni 7,6


Cytion's Freeze Medium CM-1 pakub usaldusväärset lahendust krüokonserveerimiseks, tagades rakkude kõrge elujõulisuse ja funktsionaalsuse pärast sulatamist mitmesuguste teadusrakenduste jaoks.

Eagle’i minimaalne põhikeskkonna (EMEM) on üks laialdasemalt kasutatavaid põhikeskkonnaid mitmesuguste imetajate rakkude, eriti adhesiivsete rakuliinide kasvatamiseks. Selle klassikalise koostise, mille töötas algselt välja Harry Eagle, sisaldab esmavajalikke aminohappeid, vitamiine ja anorgaanilisi sooli, mis on vajalikud nii esmaste rakkude kui ka väljakujunenud rakuliinide kasvu toetamiseks standardsetes kultiveerimistingimustes.

Seda kasutusvalmis, steriilselt filtreeritud vedelat koostist on täiendatud Earle’i tasakaalustatud soolalahusega (EBSS), 2 mM L-glutamiiniga, D-glükoosiga (1,0 g/l) ja 2,2 g/l naatriumvesinikkarbonaadiga (NaHCO3), mis muudab selle sobivaks kasutamiseks CO2-kontrollitud inkubaatori keskkonnas (tavaliselt 5 % CO2). Lisatud fenoolpunane toimib pH-indikaatorina, võimaldades rakukultuuri ajal keskkonna seisundi mugavat visuaalset jälgimist.

Peamised omadused

Klassikaline Eagle’i MEM-koostis Earle’i tasakaalustatud soolalahusega (EBSS)
Sisaldab 2 mM L-glutamiini – valmis koheseks kasutamiseks
2,2 g/l naatriumvesinikkarbonaati – puhverdatud 5 % CO2 inkubeerimiseks
Peamise süsinikuallikana D-glükoos (1,0 g/l)
Fenoolpunane pH-indikaatorina
Ilma HEPES-ita ja ilma naatrium-püruvaadita
Steriilselt filtreeritud vedel keskkond, valmis kasutamiseks
pH 7,0 – 7,6


Tüüpilised rakendused
EMEM toetab mitmesuguste imetajate rakuliinide kasvatamist, sealhulgas HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 ja paljusid esmaseid rakke. Tüüpilised rakendused hõlmavad:

Adherentse rakuliini rutiinne hooldus ja paljundamine
Viiruste paljundamine ja vaktsiinide tootmine
Tsütotoksilisuse ja biotestide rakendused
Transfektsiooni ja valkude ekspressiooni uuringud
Alusuuringud rakubioloogias ja molekulaarbioloogias

Optimaalse rakkude kasvu tagamiseks lisatakse EMEM-ile tavaliselt 5–10 % loote veise seerumit (FBS) ja, sõltuvalt rakuliinist, mitte-essentsiaalseid aminohappeid (NEAA) ning antibiootikume, nagu penitsilliin/streptomütsiin.

Käsitsemine ja ladustamine
Hoida avamata pudelit +2 °C kuni +8 °C juures, valguse eest kaitstult. Pärast avamist kasutada aseptilistes tingimustes. Lahuses olev L-glutamiin laguneb järk-järgult – parima tulemuse saavutamiseks soovitame kasutada keskkonda 4 nädala jooksul pärast avamist või lisada enne kasutamist värsket L-glutamiini, kui seda hoitakse kauem. Enne rakkudele lisamist lasta keskkonnal soojeneda 37 °C-ni.

Kvaliteet
Valmistatud rangete kvaliteedistandardite kohaselt. Iga partii steriilsust, pH-d, osmolalisust ja endotoksiinitaset kontrollitakse, et tagada ühtlane toimivus rakukultuuri rakendustes.

Toote spetsifikatsioonid



Spetsifikatsioon
Detail



Toote tüüpMEM
TootekategooriaRakukultuuri kasvukeskkonnad
VormVedelik
SteriilneJah
Suurus500 ml
L-glutamiinL-glutamiiniga (2 mM)
GlükoosGlükoosiga (1,0 g/l)
NaHCO3NaHCO3-ga (2,2 g/l)
HEPESIlma HEPES-ita
NaHCO3Ilma naatrium-püruvaadita
FenoolpunaneFenoolpunasega
SoolalahusEarle’i tasakaalustatud soolalahus (EBSS)
pH7,0 – 7,6
EndotoksiinisisaldusEi ole täpsustatud
Säilitamine+2 °C kuni +8 °C



Koostis (koostis ühe liitri kohta)



Komponent
Kontsentratsioon (mg/l)




Anorgaanilised soolad


Kaltsiumkloriid · 2H2O265,00
Magneesiumsulfaat97,72
Kaaliumkloriid400,00
Naatriumkloriid6 800,00
Na-divesinikfosfaat, veevaba122,00
Naatriumvesinikkarbonaat (NaHCO3)2 200,00


Aminohapped

L-arginiin · HCl126,00
L-tsüstiin · 2HCl31,30
L-glutamiin292,00
L-histidiin · HCl · H2O42,00
L-isoleutsiin52,00
L-leutsiin52,00
L-lüsiin · HCl72,50
L-metioniin15,00
L-fenüülalaniin32,00
L-treoniin48,00
L-trüptofaan10,00
L-türosiin · 2Na · 2H2O51,90
L-valiin46,00


Vitamiinid

D-kaltsiumpantotenaat1,00
Koliinkloriid1,00
Foolhape1,00
Müo-inositool2,00
Nikotiinamiid1,00
Püridoksaal · HCl1,00
Riboflaviin0,10
Tiamiin · HCl1,00


Muud koostisosad

D(+)-glükoos1 000,00
Fenoolpunane10,00

Accutase rakkude eralduslahus EDTA ja fenoolpunasega – 100 ml

Accutase on kasutusvalmis, steriilselt filtreeritud rakkude eralduslahus, mis on loodud kui õrn alternatiiv trüpsiinile/EDTA-le imetajate adhesiivsete rakkude eraldamiseks standardsetest kudekultuuri plastnõudest ja adhesiivkattega pindadelt. See ühendab proteolüütilise ja kollageenolüütilise ensüümi aktiivsuse tasakaalustatud soolalahuses, et tagada efektiivne, kuid kontrollitud eraldamine, säilitades rakupinna valgud ning toetades kõrget eluvõimet pärast passaaži ja kiiret uuesti kinnitumist.

Accutase koostis põhineb Dulbecco fosfaadipuhverdatud soolalahusel (DPBS), millele on lisatud EDTA ja fenoolpunane visuaalse pH indikaatorina. Ensüümid on mitte-imetajate ja mitte-bakteriaalset päritolu, mistõttu Accutase sobib eriti hästi tüvirakkude uurimiseks, vaktsiinide tootmiseks ja mis tahes rakendusteks, kus tuleb minimeerida loomsetest või mikroobidest pärinevaid saasteaineid. Lahus inhibeerib ennast automaatselt 37 °C juures, seega ei ole pärast eraldamist vaja neutraliseerivat reagenti ega seerumit sisaldavat keskkonda – rakud saab viia otse värskesse keskkonda.

Peamised omadused

Kasutusvalmis 1x steriilselt filtreeritud vedelik – lahjendamist ega taastamist ei ole vaja
Kombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline ensüümiaktiivsus õrnaks dissotsiatsiooniks
Iga partii on standardiseeritud kindlaksmääratud dissotsiatsioonitegevusele, et tagada partiidevaheline ühtlus
Enüümid ei pärine imetajatelt ega bakteritelt
Inhibeerib ennast 37 °C juures – neutraliseerivat lahust ei ole vaja
Valmistatud Dulbecco PBS-is koos EDTA-ga
Fenoolpunane on lisatud visuaalseks pH-indikaatoriks
pH 6,8–7,8


Tüüpilised rakendused
Accutase lahustab õrnalt mitmesuguseid adhesiivseid ja tundlikke rakutüüpe, sealhulgas inimese embrüonaalseid tüvirakke (hESCs), inimese indutseeritud pluripotentseid tüvirakke (iPSCs), närvi tüvirakke, primaarseid neuroneid ja tavapäraselt kultiveeritavaid adhesiivseid rakuliine, nagu HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ja A549. Tüüpilised kasutusjuhtumid hõlmavad:

Imetajate adhesiivsete rakkude rutiinne subkultiveerimine ja passaažimine
hESCs, iPSCs ja muude tundlike liinide õrn üherakuline dissotsiatsioon
Proovide ettevalmistamine voolutsütomeetria ja FACS-analüüsi jaoks
Rakupinna markerite analüüs, kus epitoobi terviklikkus on oluline
Rakkude rändamise, proliferatsiooni ja apoptoosi analüüsid
Puhkeoleku testid seerumi näljutamise ja onkogeeni transfektsiooni uuringute abil
Tuumorrakkude ja neuraalkreestrakkude rändetestid
Tootmise mastaabis laiendamine bioreaktori töövoogudes

Rutiinseks tööks kandke umbes 10 ml Accutase'i 75 cm2 kultuuripinnale ja inkubeerige 5–10 minutit toatemperatuuril. Optimaalne inkubatsiooniaeg tuleks määrata iga rakuliini jaoks eraldi ja see ei tohiks ületada ühte tundi. Enne lisamist loputage rakukihiga Ca2+/Mg2+-vaba soolalahusega, näiteks kaltsiumi ja magneesiumita DPBS-ga, et eemaldada jääkserum ja kahevalentsed katioonid.

Käsitsemine ja säilitamine
Hoidke avamata pudelit külmutatuna temperatuuril -15 °C või madalamal. Sulatage toatemperatuuril või öösel temperatuuril +2 °C kuni +8 °C. Ärge sulatage Accutase'i 37 °C veevannis, kuna kõrgem temperatuur vähendab ensüümi aktiivsust. Pärast sulatamist võib lahust hoida kuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C; ärge hoidke toatemperatuuril. Ärge soojendage reagenti enne kasutamist 37 °C-ni – lisage see otse pestud rakkudele toatemperatuuril. Pika säilivusaja tagamiseks soovitatakse kasutada ühekordseks kasutamiseks mõeldud alikvoote, et vältida korduvaid sulatamistsükleid. Töötage alati aseptilistes tingimustes.

Kvaliteet
Valmistatud rangete kvaliteedistandardite kohaselt. Iga Accutase'i partii on steriilselt filtreeritud ja testitud steriilsuse, pH, välimuse ja dissotsiatsioonitegevuse suhtes, et tagada partii-partii ühtlane ja korratav tulemus.

Toote spetsifikatsioonid



Spetsifikatsioon
Detail



TootetüüpRakkude eraldamise / dissotsiatsiooni reagent
VormSteriilselt filtreeritud vedelik, kasutusvalmis
Maht100 ml
Töökontsentratsioon1x (kasutusvalmis)
Enüümi aktiivsusKombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline
Enüümi päritoluMitte-imetaja ja mitte-bakteriaalne
PuhversüsteemDulbecco PBS koos EDTA-ga
pH indikaatorFenoolpunane
pH vahemik6,8 – 7,8
VälimusLäbipaistev, heleroosa kuni oranž lahus
Säilitustemperatuur-15 °C või madalam
Stabiilsus pärast sulatamistKuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C
Soovitatav kasutamiskogus~10 ml 75 cm2 kultuuripinna kohta
Tüüpiline inkubatsiooniaeg5–10 minutit toatemperatuuril
TransporditingimusedKülmutatud kuivjääs
KasutuseesmärkAinult teadusuuringuteks ja edasiseks tootmiseks



Koostis (koostis ühe liitri kohta)



Komponent
Kontsentratsioon (mg/l)




Anorgaanilised soolad

Naatriumkloriid (NaCl)8000,00
Dinatriumvesinikfosfaat (Na2HPO4)1150,00
Kaaliumkloriid (KCl)200,00
Kaaliumdivesinikfosfaat (KH2PO4)200,00

Muud koostisosad

EDTA · 4Na (tetranatrium-EDTA)220,00
Fenoolpunane3,00
Patenteeritud ensüümisegu (proteolüütiline ja kollageenolüütiline toime)1x



Accutase on Innovative Cell Technologies, Inc. registreeritud kaubamärk.

Toote ülevaade
Maht: 100 ml Säilitamine: ≤-15°C Steriilsus: Steriilselt filtreeritud
Antibiootikum/antimükootiline lahus (100x) on steriilne, kasutusvalmis kontsentraat, mis on mõeldud mikroobse saastumise riski vähendamiseks rakukultuurides ja nendega seotud laboratoorsetes rakendustes. See 100x lahus sisaldab penitsilliini, streptomütsiini ja amfoteritsiin B hästi tõestatud kombinatsiooni, mis tagab laia spektriga antimikroobse toime grampositiivsete ja gramnegatiivsete bakterite, pärmseente ja filamentsete seente vastu. Preparaat sobib kasutamiseks eukarüootilistes rakukultuurides, bakteriaalsetes keskkondades ja muudes saastetundlikes süsteemides, toetades puhtaid ja järjepidevaid laboritoiminguid.
Kasutamine ja eelised Seda rutiinsete teadusprotokollide jaoks optimeeritud lahust kasutatakse laialdaselt aseptiliste tingimuste säilitamiseks rakukultuuride tööprotsessides. See pakub usaldusväärset toimimist saastetundlikes keskkondades, aidates teadlastel vähendada mikroobide ülekasvu ohtu, ilma et see kahjustaks rakkude tervist või katsete reprodutseeritavust. Steriilne filtreeritud koostis välistab vajaduse täiendavate solubiliseerimisetappide järele, toetades ühtlustatud söötme ettevalmistamist ja vähendades igapäevaste laboriprotseduuride varieeruvust.
Kasutamine ja ühilduvus Standardsete töökontsentratsioonide saavutamiseks lahjendage lahust 1:100 teie täielikule kultuurikeskkonnale. Toode ühildub paljude imetajate rakuliinide ja põhikeskkondadega. Tänu pidevale varude kättesaadavusele saavad teadlased kasu usaldusväärsest tarnekindlusest ja lihtsustatud logistika planeerimisest. Stabiilsuse säilitamiseks tuleb lahust hoida temperatuuril ≤ -15 °C ja kaitsta korduvate külmutamis
- ja sulatamistsüklite eest. Ainult teaduslikuks kasutamiseks. Mitte kasutamiseks diagnostilistes või terapeutilistes protseduurides. Mitte kasutamiseks inimestel või loomadel.

Fosfaadiga puhverdatud soolalahus (PBS) Lahus
Fosfaadiga puhverdatud soolalahus (PBS) on bioloogilistes ja keemilistes uuringutes laialdaselt kasutatav puhverlahus. See mängib olulist rolli pH-tasakaalu ja osmolaarsuse säilitamisel erinevate katsete, sealhulgas kudede töötlemise ja rakukultuuride käigus. Meie PBS-lahus on hoolikalt formuleeritud kõrge puhtusastmega koostisosadest, et tagada stabiilsus ja usaldusväärsus igas eksperimendis. Meie PBS-i osmolaarsus ja ioonide kontsentratsioonid jäljendavad täpselt inimkeha omast, mistõttu on see isotooniline ja enamikule rakkudele mittetoksiline.

Meie PBS-lahuse koostis
Meie PBS-lahus on ülipuhaste fosfaatpuhvrite ja soolalahuste pH-ga kohandatud segu. 1X töökontsentratsioonis sisaldab see järgmist:

8000 mg/l naatriumkloriidi (NaCl)
200 mg/l kaaliumkloriidi (KCl)
1150 mg/L naatriumfosfaat kahealuseline veevaba (Na2HPO4)
200 mg/L Kaaliumfosfaat monobaasiline veevaba (KH2PO4)

See koostis tagab optimaalse pH ja ioonitasakaalu, mis sobib mitmesuguste bioloogiliste rakenduste jaoks.

Meie PBS-lahuse rakendused
Meie PBS-lahus sobib ideaalselt mitmesugusteks rakendusteks bioloogilistes uuringutes. Selle isotoonilised ja mittetoksilised omadused muudavad selle sobivaks ainete lahjendamiseks ja rakukonteinerite loputamiseks. EDTA-d sisaldavad PBS-lahused on tõhusad kinnitunud ja klompunud rakkude eraldamiseks. PBS-i ei tohiks siiski lisada kahevalentseid metalle, nagu tsink, kuna see võib põhjustada sadestumist. Sellistel juhtudel soovitatakse kasutada Good's puhvreid. Lisaks on meie PBS-lahus vastuvõetav alternatiiv viiruste transpordikeskkonnale RNA-viiruste, sealhulgas SARS-CoV-2 transportimiseks ja säilitamiseks.

Kvaliteedikontroll

Steriilselt filtreeritud


Säilitamine ja säilivusaeg

Säilitada +2°C kuni +25°C juures, valguse eest kaitstult.
Pärast avamist säilitada temperatuuril 2°C kuni 25°C ja kasutada 24 kuu jooksul.


Veotingimused

Keskkonnatemperatuur


Hooldus

Hoida külmkapis +2°C kuni +8°C juures pimedas. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist kuni +37°C, kuna see vähendab toote kvaliteeti.
Ärge kuumutage keskkonda üle 37°C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, näiteks mikrolaineahjusid.
Kui kasutatakse ainult osa söötmest, võtke vajalik kogus välja ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini.

Koostis



Kategooria
Komponendid
Kontsentratsioon (mg/l)


Soolad
Kaaliumkloriid
200



Kaaliumfosfaat monobaasiline veevaba
200



Naatriumkloriid
8000



Naatriumfosfaat kahealuseline veevaba
1150

Organism	Inimene
Kude	Kopsud