SVI rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

Ei ole enam saadaval

Toote number: 400495

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Kolmanda osapoole leping

Kirjeldus	SVI rakuliin on kloonitud H-2kb-tsA58 transgeensetest hiirtest isoleeritud glomerulide kasvust. Need hiired kannavad SV40 suure T antigeeni temperatuuritundlikku varianti IFN-g-indutseeritava H-2kb promootori kontrolli all. Rakud paljunevad 33 °C juures ja diferentseeruvad 37 °C juures. Praegu on rakke edukalt kasvatatud rohkem kui 40 läbimise ajal, ilma et oleks täheldatud fenotüüpseid muutusi. SVI on morfoloogia ja mitmete markerite ekspressiooni poolest väga sarnased E11-ga. Näiteks podocin ja WT1 on E11-ga võrreldes vähem ekspresseeritud. Diferentseerumine: Alustage diferentseerimisprotsessi, asetades mitte-confluentsed kolvid inkubaatorisse 38 kraadi Celsiuse järgi / 5% CO2 vähemalt 14 päevaks, et diferentseerumine oleks lõpule viidud. Interferoon-gamma (INF-gamma) lisamine ei ole vajalik.
Organism	Hiir
Kude	Neerud

Tõug/allliik	(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Immort
Vanus	Täiskasvanud
Sugu	Täpsustamata
Raku tüüp	Podotsüüdid
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	SVI (Cytioni katalooginumber 400495)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_5943
GMOde staatus	GMO-S1: See hiirte podotsüütide rakuliin (SVI) sisaldab tingimuslikult aktiivset SV40 Large T-Antigeeni transgeeni kui osa ImmortoMouse mudelist, mis toetab temperatuuritundlikku immortaliseerimist. Konstruktsioon on stabiilselt olemas podotsüütidest saadud rakkudes. See klassifikatsioon kehtib ainult Saksamaal ja võib mujal erineda.

Valgu ekspressioon	WT1, Lmx1b, nefriin, NEPHI, FAT, P-kadheriin, CD2AP, ZO-I, podokalüksin, podoplaniin, sünpo, podokiin, TRPC6 ja GAPDH.

Kultuurikeskkond	RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Täiendused	Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagatud suhe	Soovitatav on suhe 1:3 kuni 1:5. Diferentseerumistingimustes, st kui inkubeeritakse hõredaid kuni tihedaid kultuure 38 °C juures, peatub rakkude paljunemine esimese kahe nädala jooksul ja lõpeb umbes nelja nädala pärast
Külvi tihedus	Inokuleerige T75 rakukultuuri kolvid 1x 10⁴ rakuga/cm² (umbes 60 000 rakku/ml, 12 ml keskkonda ühes T75-s) proliferatsiooni protsessi jaoks. Hoidke rakke 33 °C juures / 5% CO₂-s, kuni kolv on umbes 75% konfluentne.
Vedeliku uuendamine	3 korda nädalas
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	33°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
STR-profiil	Amelogenin: x,x

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
400495-1221	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	400495

Pange tähele, et see rakuliin ei ole saadaval Cytioni standardse MTA raames, kuna selleks on vaja kolmanda osapoole lepingut ja/või selle üle tuleb pidada läbirääkimisi algse litsentsiandjaga.

SVI rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Kolmanda osapoole leping