SK-N-LO rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300400

Ohutuskaart

Toote leht

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	SK-N-LO rakuliin on inimese neuroblastoomi rakuliin, mida kasutatakse neuroblastoomi ning apoptoosi ja vähi signaaliradade mehhanismide uurimiseks. See liigitatakse ka primitiivse neuroektodermise kasvaja (PNET) rakuliiniks ja kannab EWS-FLI1 fusioonigeeni, mida tavaliselt leidub Ewingi sarkoomi perekonna kasvajates (ESFT). See fusioonigeen tuleneb kromosomaalsest translokatsioonist ja mängib võtmerolli nende kasvajarakkude onkogeenses käitumises. SK-N-LO rakud on eriti tundlikud teatavate onkogeensetele signaaliradadele suunatud inhibiitorite suhtes. Näiteks on näidatud, et GLI inhibiitor GANT61 kutsub SK-N-LO rakkudes esile kaspaasist sõltumatu apoptoosi. GANT61 häirib GLI1 ja GLI2 vahendatud transkriptsiooni Hedgehogi (Hh) signaaliteel, mis on selles rakuliinis rakkude ellujäämise ja proliferatsiooni jaoks kriitilise tähtsusega. GANT61-ga ravimisel ilmnevad SK-N-LO rakkudel apoptoosiga seotud morfoloogilised muutused, nagu kromatiini kondenseerumine ja tuuma fragmenteerumine. Lisaks vähendab GANT61 selliste valkude nagu GLI2 ja survivin, mis on olulised rakutsükli progresseerumise ja ellujäämise seisukohalt, ekspressiooni, suurendades samal ajal tsükliinist sõltuva kinaasi inhibiitori p21 ekspressiooni. Lisaks on SK-N-LO rakke kasutatud opioidiretseptorite signalisatsiooni uurimiseks. Need rakud on loodud ekspresseerima μ-opioidiretseptorit, mis muudab need väärtuslikuks mudeliks opioididest põhjustatud analgeesia ja rakusiseste signaaliradade vahelise koostoime uurimiseks. Näiteks on uuringud näidanud, et morfiin stimuleerib SK-N-LO rakkudes Akt fosforüülimist PI3Kγ raja kaudu, mida saab moduleerida cAMP-signalisatsiooniga. See rõhutab SK-N-LO rakkude mitmekülgsust nii vähibioloogia kui ka neurofarmakoloogia uurimisel.
Organism	Inimene
Kude	Aju
Haigus	Primitiivne neuroektodermiline kasvaja
Metastaatiline koht	Luuüdi
Sünonüümid	SK-N-L0, SKN-LO, SKNLO, SKNLO

Vanus	10 aastat
Sugu	Mees
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Morfoloogia	Epiteelilaadsed
Kasvuomadused	Kollageeniga kaetud kolvidesse kinnituvad

Tsitaat	SK-N-LO (Cytioni katalooginumber 300400)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_4569

Karyotüüp	Fenotüübi sageduse toode: 0.00005

Kultuurikeskkond	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Täiendused	Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvi tihedus	3 kuni 4 x 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku uuendamine	2 kuni 3 korda nädalas
Külmutage keskkond	Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Optimaalse kinnitumise ja elujõulisuse tagamiseks pärast sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud koldeid või plaate.
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
HLA alleles	A: '24:02:01, '29:02:01 B: '18:01:01, '58:01:01 C: '05:01:01, '07:18:01 DRB1: '03:01:01, '08:04:01 DQA1: '04:01:02, '05:01:01 DQB1: '02:01:01, '04:02:01 DPB1*: '02:01:02, '13:01:01 E: '01:01, '01:03

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

SK-N-LO rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Materjali üleandmise leping