PIEC rakud
Üldine teave
| Kirjeldus | PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) on spontaanselt immortaliseeritud endoteelirakkude liin, mis on saadud noore sea niudearteri endoteelist. Rakuliinil on tüüpiline munakivimorfoloogia, kui see kasvab konfluentsini, ja moodustab standardse kultiveerimise tingimustes adhesiivseid monokihte. PIEC-rakud säilitavad peamised endoteeli omadused, sealhulgas kontakti inhibeerimise, endoteeli markerite (nt von Willebrandi faktor (vWF)) ekspressiooni ja võime moodustada kapillaaritaolisi struktuure sobivates in vitro testides. Oma vaskulaarse päritolu tõttu kasutatakse PIEC-rakke laialdaselt mudelina sigade endoteeli bioloogia ja peremees-patogeeni interaktsioonide uurimiseks. Funktsionaalselt näitavad PIEC-id makrovaskulaarsete endoteelirakkudega sarnaseid omadusi, sealhulgas reageerivust põletikulistele stiimulitele ja võimet ekspresseerida leukotsüütide värbamisega seotud adhesiivmolekule. Neid on laialdaselt kasutatud viroloogilistes uuringutes, eriti sigade viiruste, nagu klassikalise sigade katku viiruse (CSFV), Aafrika sigade katku viiruse (ASFV) ja sigade reproduktiivse ja respiratoorse sündroomi viiruse (PRRSV) paljundamiseks ja uurimiseks. Nende kõrge vastuvõtlikkus teatud viirusnakkustele ja stabiilsed kasvutunnused muudavad need väärtuslikuks in vitro süsteemiks viirusreplikatsiooni uuringutes, viirusevastase skriiningu ja vaktsiiniuuringutes. Lisaks nakkushaiguste rakendustele on PIEC-rakud asjakohane suurloomade endoteelirakkude mudel veresoonte barjäärifunktsiooni, endoteeli aktiveerumise, angiogeneesi ja põletikuliste signaalide edastamise uurimiseks. Seakasvatusest saadud endoteelirakkude liinina on PIEC-rakud asjakohased võrdlevate kardiovaskulaarsete uuringute ja prekliiniliste uuringute jaoks, kus tavaliselt kasutatakse seakasvatusmudeleid. |
|---|---|
| Organism | Siga |
| Kude | Vaskulaarne endoteel |
Omadused
| Morfoloogia | Epiteel |
|---|---|
| Kasvuomadused | Kinnipeetav |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | PIEC (Cytioni katalooginumber 305213) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosaurusAccession | CVCL_C0W5 |
Biomolekulaarsed andmed
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendatakse keskkonda kuumuseliselt inaktiveeritud 10% FBS-iga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Subkultuuride kasvatamine | Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda. |
| Jagatud suhe | 1:2 kuni 1:4 |
| Vedeliku uuendamine | 2 kuni 3 korda nädalas |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikuna kasutage täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Kolvi katmine | Optimaalse kinnitumise ja elujõulisuse tagamiseks pärast sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud koldeid või plaate. |
| Külmutamise protseduur | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 305213-070524 | Analüüsitunnistus | 23. May. 2025 | 305213 |
Materjali üleandmise leping
Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.
Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.
Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.