KATO-III rakud
Üldine teave
| Kirjeldus | KATO-III rakuliin on inimese maokartsinoomi mudel, mis on saadud halvasti diferentseerunud adenokartsinoomi metastaatilisest asukohast. Neid rakke kasutatakse laialdaselt maovähki käsitlevates teadusuuringutes, eelkõige kasvajate progresseerumist, ravimresistentsust ja metastaaside teket põhjustavate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. KATO-III rakkudel on aneuploidne karüotüüp, mida iseloomustavad mitmed kromosoomianomaaliad, mis aitab kaasa nende agressiivsele vähi fenotüübile. Nad on eelkõige p53 puudulikud, mis on sageli seotud suurenenud kasvajalisusega ja muutunud reaktsiooniga keemiaravile, mistõttu on nad väärtuslik vahend p53 rolli uurimiseks maovähi puhul. KATO-III rakud kasvavad suspensioonis ja neil on ümar morfoloogia. Neil on suur proliferatsioonivõime, mistõttu sobivad nad mitmesugusteks in vitro rakendusteks, sealhulgas ravimite skriininguks ja tsütotoksilisuse testideks. Neid rakke kasutatakse ka rakkude signaaliradade uuringutes, kuna nende hälbiv signaalimine on maovähi patogeneesi tunnusjoon. Teadlased kasutavad KATO-III rakke sageli selleks, et uurida uute ravimiravimite tõhusust, eriti nende, mis on suunatud HER2, EGFR ja muude asjakohaste onkogeensete radade vastu. See rakuliin on oluline maovähi bioloogia paremaks mõistmiseks ja patsientide tulemuste parandamiseks suunatud sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamiseks. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Maha |
| Haigus | Adenokartsinoom |
| Metastaatiline koht | Pleuraefusioon |
| Sünonüümid | Kato III, Kato-III, KATO III, KATOIII, KatoIII, KATO 3, JTC-28, Jaapani koekultuur-28 |
Omadused
| Vanus | 57 aastat |
|---|---|
| Sugu | Mees |
| Etniline kuuluvus | Aasia |
| Morfoloogia | Sfääriline |
| Kasvuomadused | Kinni jääv/suspensioon |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | KATO-III (Cytioni katalooginumber 300381) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0371 |
Biomolekulaarsed andmed
| Valgu ekspressioon | P53 negatiivne, CEA positiivne |
|---|---|
| Antigeeni ekspressioon | Veregrupp B, Rh+ |
| Isoensüümid | PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, fenotüübi sageduse toode: 0.0742 |
| Tumorigeeniline | Jah, tümotsüütide vastase seerumiga töödeldud hamstrite põsepõskedes, ei tekitanud alasti hiirtel kasvajaid |
| Karyotüüp | Tüveline kromosoomide arv on hüpotetraploidne, kusjuures 2S-komponent esineb 6,2% ulatuses. Üheksa markerit olid enamiku S-metafaaside puhul ühised, neli markerit olid harvemini esinevad. Üks (mõnikord 2 koopiat) homogeenne värvuspiirkond (HSR) (t(11,HSR) esines kõigis uuritud metafaasides, kuid topeltminute (DM) ei tuvastatud (Sekiguchi 1978). |
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS-ga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Aja kahekordistamine | 36 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel inkubeerida 37 °C juures 10 minutit. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet. |
| Jagatud suhe | A ratio of 1:2 to 1:8 is recommended |
| Külvi tihedus | 2 x 104 rakku/cm2 annab 2–3 päeva jooksul tulemuseks konfluentse monokihi. |
| Vedeliku uuendamine | Iga 3 kuni 5 päeva tagant |
| Taastumisjärgne taastumine | Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul. |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Kolvi katmine | Optimaalse kinnitumise ja elujõulisuse tagamiseks pärast sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud koldeid või plaate. |
| Külmutamise protseduur | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|---|
| STR-profiil |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 7,11
D13S317: 8,12
D16S539: 10,12
D5S818: 10,11
D7S820: 8,12
TH01: 7,9
TPOX: 11
vWA: 14,16
D3S1358: 15,16
D21S11: 30,31
D18S51: 12
Penta E: 13,18,19
Penta D: 13,14
D8S1179: 13,14
FGA: 23,24
|
| HLA alleles |
A*: '02:01:01, '02:07:01
B*: '15:01:01, '46:01:01
C*: '01:02:01, '03:03:01
DRB1*: '08:03:02, '15:01:01G
DQA1*: '01:02:01, '01:03:01
DQB1*: '06:01:01, '06:02:01
DPB1*: '02:01:02, '02:02:01
E: '01:03:02
|
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 300381-021225 | Analüüsitunnistus | 05. Jan. 2026 | 300381 |
| 300381-610 | Analüüsitunnistus | 05. Dec. 2025 | 300381 |
Materjali üleandmise leping
Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.
Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.
Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.