ImWilms10T rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300419

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	ImWilms10T rakuliin on Wilms10T primaarse tuumori rakuliini immortaliseeritud variant, mis on saadud Wilmsi kasvaja (nefroblastoomi) proovist lastel. Seda rakuliini eristab WT1 geeni homosügootne deletsioon, mille tulemuseks on WT1 valgu funktsiooni täielik kadumine. WT1 on neerude arengu jaoks oluline geen ja selle deletsioon imWilms10T-s peegeldab tõsist geneetilist häiret, mis on seotud Wilmsi kasvaja patogeneesiga. Lisaks WT1 deletsioonile esineb imWilms10T rakkudes heterosügootsuse kadu (LOH) kromosoomi 11p15 piirkonnas, mis hõlmab selliseid olulisi geene nagu IGF2, mis aitavad kaasa kasvaja agressiivsele käitumisele. Wilms10T rakkude piiratud eluea ületamiseks loodi imWilms10T rakuliin, viies algsetesse kasvajarakkudesse sisse kolmekordse mutandi SV40 suure T antigeeni (U19dl89-97tsA58). See immortaliseerimisprotsess võimaldab imWilms10T rakkudel lõputult paljuneda, säilitades samal ajal kromosoomide stabiilsuse, pakkudes seega usaldusväärset mudelit pikaajalisteks uuringuteks. ImWilms10T rakud säilitavad vanemliku Wilms10T liini kriitilised omadused, sealhulgas WT1 täieliku kadumise ja LOH esinemise 11p15 juures, mis teeb neist hindamatu ressursi WT1 deletsiooni molekulaarsete tagajärgede ja sellega seotud kasvajaliste protsesside uurimiseks. imWilms10T rakke on põhjalikult uuritud nende osalemise suhtes peamistes signaaliradades, mis juhivad kasvaja progresseerumist. Proteoomilised analüüsid on näidanud, et neis rakkudes on fosforüleeritud ja aktiveeritud mitmed retseptori türosiini kinaasid (RTK), nagu IGF1R, PDGFRβ ja AXL. Need aktiveeritud retseptorid annavad signaali allavoolu radade kaudu, sealhulgas MAPK ja PI3K/AKT radade kaudu, mis on rakkude pahaloomulise fenotüübi säilitamiseks üliolulised. ImWilms10T rakuliin on oluline vahend, et uurida WT1 täieliku kadumise mõju rakkude signaalimisele, kasvaja kasvule ja potentsiaalsetele terapeutilistele sihtmärkidele Wilmsi kasvaja puhul, eriti agressiivsemate kasvajate alatüüpide puhul.
Organism	Inimene
Kude	Neerud
Haigus	Wilmsi kasvaja
Sünonüümid	ImWilms10 T, IM-WT-10

Vanus	2 aastat
Sugu	Naised
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Morfoloogia	Spindlikujuline
Raku tüüp	Wilmsi rakud
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	ImWilms10T (Cytioni katalooginumber 300419)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_DF34
GMOde staatus	GMO-S1: See imWilms10T derivaat sisaldab sama kolmekordset mutantset SV40 T-antigeeni, mis võimaldab tingimuslikku immortaliseerimist pediaatrilise neerukasvaja bioloogias. See klassifikatsioon kehtib ainult Saksamaal ja võib mujal erineda.

Mutatsiooniprofiil	WT1 mutatsiooni staatus: homosügootne del WT1 del11p13 piires, LOH: ei ole 11p13, kuid UPD 11p15, CTNNB1 mutatsiooni staatus: homosügootne del TCT, p.DS45, UPD 3p

Kultuurikeskkond	MSCGM komplekt (Lonza)
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku uuendamine	1 kuni 2 korda nädalas
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
HLA alleles	A: '01:01:01, '11:01:01 B: '18:01:01, '27:05:02 C: '01:02:01, '12:03:01 DRB1: '01:01:01, '11:04:01 DQA1: '01:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '05:01:01 DPB1*: '04:01:01G, '04:02:01G E: '01:01:01

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
300419-221	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300419

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

ImWilms10T rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping