Hep-56.1D rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 400204

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	Hep-56.1D hepatoomi rakuliin on saadud hiirte maksakasvajast, täpsemalt C57BL/6J hiirtüvest. Seda rakuliini iseloomustab märkimisväärne mutatsioon p53 geenis, mis on tuvastatud erinevates etappides in vitro paljundamise käigus. Konkreetselt on Hep-56.1D-l ekson 5 koodonis 132 C:G-G:C transversioon, mille tulemuseks on aminohappe muutus tsüsteiinist trüptofaaniks. See mutatsioon avastati 17. läbipääsul, mis viitab mutatsioonist tulenevale selektiivsele kasvueelisele, mis põhjustab selle ülekaalu rakupopulatsioonis. Hep-56.1D rakuliinil on valdavalt epiteliaalne morfoloogia, mis peegeldab selle hepatotsüütilist päritolu. See on kooskõlas selle vahepealsete filamentide valkude profiiliga, mis sisaldab lihtsaid keratiini K8 ja K18, samuti vimentiini ja keratiini K19 erineval määral. Nende valkude olemasolu kinnitab rakuliini hepatotsüütilist olemust ja selle liigitamist hepatoomi liiniks. Hep-56.1D edasine analüüs DNA-sõrmejälgede abil ei näidanud mingeid olulisi struktuurilisi kõrvalekaldeid, kuigi teatud muutused spetsiifiliste ribade suhtelises intensiivsuses täheldati läbimise arvu suurenemisel. See viitab genoomi stabiilsusele koos mõningase varieeruvusega pikema kasvatusperioodi jooksul. P53-mutatsioonide analüüs ja vahepealsete filamentide valkude ekspressioonimustrid kinnitavad, et Hep-56.1D on väärtuslik mudel hepatotsellulaarse kartsinoomi ja p53-mutatsioonide rolli uurimiseks maksakasvajate tekkimisel.
Organism	Hiir
Kude	Maksa
Haigus	Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid	HEP-56.1D, 56.1D, 56.1d

Tõug/allliik	C57BL/6J
Vanus	Täiskasvanud
Sugu	Naised
Morfoloogia	Epiteelilaadsed
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	Hep-56.1D (Cytioni katalooginumber 400204)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_5769

Valgu ekspressioon	Keratiin 8, keratiin 18, vimentiin.
Tumorigeeniline	Jah, C57BL/6J hiirtel. Kolmandal nädalal tekivad umbes 5-6 mm läbimõõduga kasvajad.
Ploidsuse staatus	Aneuploidne
Mutatsiooniprofiil	P53mut, C:G -+ G:C transversioon hiire p53 5. eksoni 132 koodonis, mis vastab aminohappe muutusele tsüsteiinist trüptofaaniks.

Kultuurikeskkond	DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Täiendused	Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Aja kahekordistamine	25-30 tundi
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvi tihedus	1 kuni 2 x 10⁴ rakku/cm² tavapärase kultuuri ajal
Vedeliku uuendamine	Iga 3 kuni 4 päeva tagant
Taastumisjärgne taastumine	>90% rakkudest taastub külmutamisest 24-48 tunni jooksul
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
400204-821	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	400204

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

Hep-56.1D rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping