HT55-rakud
Üldine teave
| Kirjeldus | HT55 on inimese pärasoole adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud 54-aastase kaukaasia päritolu naise esmasest pärasoole kasvajast. Rakuliin kasvab adhesiivse monokihina, millel on epiteelilaadne morfoloogia. HT55-s esineb mitmeid heterosügootseid ja homosügootseid funktsiooni kaotust põhjustavaid mutatsioone APC (adenomatoosne polüpoos coli) kasvajavastases geenis, sealhulgas p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ja p.Lys241Ter (kõik heterosügootsed), samuti homosügootne p.Arg213Leu asendus. See mutatsiooniprofiil muudab HT55 bioloogiliselt asjakohaseks mudeliks APC-st tingitud kolorektaalse kartsinogeneesi uurimiseks, peegeldades kanonilise WNT-signaalitee düsregulatsiooni, mis on enamiku inimeste kolorektaalvähkide põhjuseks. HT55-t kasutatakse laialdaselt kolorektaalvähi uurimisel WNT/β-kateniini signaalimise, APC-i kasvajavastase funktsiooni, ravimite tundlikkuse ja resistentsuse uurimiseks ning WNT-signaalitee komponentidele suunatud ravimite prekliiniliseks hindamiseks. See liin sobib in vitro farmakoloogilisteks analüüsideks ja ksenotransplantaadi uuringuteks immuunpuudulikkusega hiiremudelites, pakkudes adhesiivset ja hõlpsasti käsitletavat in vitro platvormi kolorektaalvähi mehhanistlikuks ja translatsiooniliseks uurimiseks. Mitmete APC-trunkatsioonimutatsioonide olemasolu teeb HT55-st tüüpilise näite mikrosatelliitide poolest stabiilsest, kromosoomiliselt ebastabiilsest kolorektaalvähi alatüübist, mida tavaliselt põhjustab APC funktsiooni kadu. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Rektum |
| Haigus | Adenokartsinoom |
| Rakendused | Kolorektaalvähi uurimine; WNT/APC signaalitee uuringud; ravimite tundlikkuse ja resistentsuse testimine; prekliiniline onkoloogia; ksenotransplantaadi mudelid; sihtterapia hindamine |
| Sünonüümid | HT55 |
Omadused
| Vanus | 54 aastat |
|---|---|
| Sugu | Naised |
| Etniline kuuluvus | Kaukaasia |
| Morfoloogia | Epiteelilaadsed |
| Raku tüüp | Epiteelirakud |
| Kasvuomadused | Kinnipeetav |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | HT55 (Cytioni katalooginumber 305018) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1294 |
Biomolekulaarsed andmed
| Mutatsiooniprofiil | Mutatsioon: p.Gln1131Ter, heterosügootne; Mutatsioon: p.Gln1303Ter, heterosügootne; Mutatsioon: p.Arg1463Ser, heterosügootne; Mutatsioon: p.Asn581Tyr, heterosügootne; Mutatsioon: p.Lys241Ter, heterosügootne; Mutatsioon: p.Arg213Leu, homosügootne |
|---|
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS-ga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Aja kahekordistamine | 28 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Eemaldage kinnitunud rakkudelt vana kasvukeskkond ja peske neid kaltsiumi- ja magneesiumivaba PBS-ga. T25-kolvide puhul kasutage 3–5 ml PBS-i, T75-kolvide puhul 5–10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase’iga, kasutades T25 kolvide puhul 1–2 ml ja T75 kolvide puhul 2,5 ml. Laske rakkudel toatemperatuuril 8–10 minutit inkubeerida, et need lahti tuleksid. Pärast inkubeerimist segage rakke õrnalt 10 ml kasvukeskkonnaga, et need uuesti suspendeerida, ning tsentrifuugige seejärel 300×g juures 3 minutit. Viskage supernatant ära, suspendeerige rakud uuesti värskes kasvukeskkonnas ja kandke need üle uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket kasvukeskkonda. |
| Jagatud suhe | 1–5 |
| Külvi tihedus | 1 kuni 3 x 104 rakku/cm2 |
| Vedeliku uuendamine | Iga 2 kuni 3 päeva tagant |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll ja molekulaaranalüüs
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 305018-240426 | Analüüsitunnistus | 23. Jul. 2026 | 305018 |
Materjali üleandmise leping
Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimiskeskuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.
Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult teenuste eest tasu võtmise, kvaliteedikontrolli, toote turuleviimise, diagnostilise kasutamise või regulatiivsete uuringute puhul – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.
Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei kuulu MTA alla, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.