HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP rakud
800,00 €*
Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 6 rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 106 rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).
Üldine teave
| Kirjeldus | HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP rakuliin on CRISPR-Cas9-tehnoloogia abil välja töötatud Hela Kyoto rakumudel. See rakuliin sisaldab mEGFP (monomeeriline tõhustatud roheliselt fluorestseeruv valk) CAP-H2 geenile, mis on osa kromosoomide segregatsioonis ja kondenseerumisel mitoosi ajal osalevast kondensiin II kompleksist. MEGFP-märgis võimaldab teadlastel visuaalselt jälgida kondensiin II dünaamikat raku jagunemise ajal. See rakuliin on kasulik mitootiliste protsesside, kromosoomi arhitektuuri ja geeniregulatsiooni uurimiseks. MEGFP-marker võimaldab CAP-H2 valgu funktsiooni jälgimist reaalajas ja kujutamist elusrakus. See mudel aitab uurida rakutsükli edenemise ja kromosoomi terviklikkuse molekulaarseid mehhanisme, aidates mõista geneetilisi häireid ja arendada ravistrateegiaid. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Endocervix |
| Haigus | Adenokartsinoom |
| Sünonüümid | HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP #67, HK CRISPR CAP-H2-mEGFP |
Omadused
| Vanus | 30 aastat |
|---|---|
| Sugu | Naised |
| Etniline kuuluvus | Afroameeriklane |
| Morfoloogia | Epiteelilaadsed rakud, millel on mosaiikne kivikuju |
| Kasvuomadused | Kinnipeetav |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP (Cytioni katalooginumber 301569) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_UR45 |
| Hoiustaja | Ellenbergi labor (EMBL) |
| GMOde staatus | GMO-S1: See HeLa Kyoto liin sisaldab CRISPR-integreeritud mEGFP-märgistust CAP-H2 lokaalis, mis toetab kromosoomi struktuuri analüüsi. See klassifikatsioon kehtib ainult Saksamaal ja võib mujal erineda. |
Biomolekulaarsed andmed
| Tooted | EGFP (tõhustatud roheline fluorestseeruv valk) |
|---|
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS-ga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Subkultuuride kasvatamine | Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda. |
| Vedeliku uuendamine | 2 kuni 3 korda nädalas |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Kolvi katmine | Puudub |
| Külmutamise protseduur | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|