E11 rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

Ei ole enam saadaval

Toote number: 400494

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Kolmanda osapoole leping

Kirjeldus	E11 rakuliin on kõrgelt spetsialiseerunud hiirte rakuliin, mis on välja töötatud podotsüütide funktsiooni ja neeruhaiguste mehhanismide täiustatud uuringuteks. E11 rakud on saadud transgeensete hiirte glomerulidest, mis on konstrueeritud ekspresseerima SV40 suure T antigeeni temperatuuritundlikku varianti, ja nad töötavad IFN-g-indutseeritava H-2kb promootori reguleerimisel. See ainulaadne geneetiline raamistik hõlbustab rakkude tingimuslikku proliferatsiooni, mis sõltub keskkonna temperatuurist, mis on kooskõlas T-antigeeni kontrollitud ekspressiooniga. Üks E11 rakuliini iseloomulikke omadusi on selle fenotüüpne stabiilsus ulatusliku passageerimise ajal. E11 rakud säilitavad järjepideva ekspressiooni ja rakkude omadusi rohkem kui 40 passage'i kaudu, mistõttu on nad osutunud hindamatuks pikaajaliste uuringute jaoks ilma fenotüüpide triivimise probleemita, mida on täheldatud paljude kultiveeritud rakuliinide puhul. Selline stabiilsus parandab nende kasutamist korduvates ja pikaajalistes bioloogilistes katsetes, mis nõuavad rakkude järjepidevat käitumist. E11 rakuliinil on valkude ekspressiooni osas tugev profiil, mis on podotsüütide-spetsiifiliste uuringute jaoks hädavajalik. Need rakud ekspresseerivad järjekindlalt nefriini, mis on podotsüütide lõhede diafragmastruktuuri oluline komponent, koos mitmete teiste podotsüütidele omaste valkude, nagu podotsiin, CD2AP ja sünaptopodiin, kõrval. Selline ulatuslik valkude ekspressioon hõlbustab podotsüütide bioloogia uurimist kontrollitud in vitro keskkonnas, mis simuleerib lähedalt in vivo tingimusi. E11 rakkude võime moodustada ulatuslikke raku-rakukontakte rõhutab veelgi nende sobivust neerufiltratsiooni barjääri funktsioonide modelleerimiseks.
Organism	Hiir
Kude	Neerud

Tõug/allliik	(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
Vanus	Täiskasvanud
Sugu	Täpsustamata
Raku tüüp	Podotsüüdid
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	E11 (Cytioni katalooginumber 400494)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_5737
GMOde staatus	GMO-S1: See Immorto hiire podotsüütide liin sisaldab temperatuuritundlikku SV40 T-antigeeni konstruktsiooni, mis võimaldab tingimuslikku immortaliseerimist. See klassifikatsioon kehtib ainult Saksamaal ja võib mujal erineda.

Valgu ekspressioon	WT1, Lmx1b, nefriin, NEPHI, FAT, P-kadheriin, CD2AP, ZO-I, podokalüksin, podoplaniin, sünpo, podokiin, TRPC6 ja GAPDH.

Kultuurikeskkond	RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Täiendused	Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvi tihedus	Inokuleerige T75 rakukultuuri kolvid 1x 10⁴ rakuga/cm² proliferatsiooni protsessi jaoks. Hoidke rakke 33 °C juures / 5% CO₂, kuni kolv on umbes 75% konfluentne.
Vedeliku uuendamine	2 kuni 3 korda nädalas
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	33°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
400494-1014SF	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	400494

Pange tähele, et see rakuliin ei ole saadaval Cytioni standardse MTA raames, kuna selleks on vaja kolmanda osapoole lepingut ja/või selle üle tuleb pidada läbirääkimisi algse litsentsiandjaga.

E11 rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Kolmanda osapoole leping