DC2.4 Rakud

Cytion's Freeze Medium CM-1 on tipptasemel krüokonserveerimise keskkond, mis on loodud selleks, et tagada rakkude elujõulisuse ja funktsionaalsuse kõrgeim tase pärast sulatamist. See mitmekülgne keskkond sobib laiale spektrile rakutüüpe, sealhulgas nii inim
- kui ka loomsetele rakkudele, muutes selle oluliseks vahendiks mitmesuguste teadusrakenduste jaoks. Freeze Medium CM-1, mis on koostatud hoolikalt tasakaalustatud krüoprotektiivide ja oluliste toitainete kombinatsiooniga, minimeerib jääkristallide moodustumist ja rakkude stressi külmutamise ajal, säilitades seega rakkude terviklikkuse.
Freeze Medium CM-1 põhiomadused on järgmised:

Laiaulatuslik kokkusobivus: Tõhus paljude rakutüüpide, sealhulgas primaarsete rakkude, tüvirakkude ja väljakujunenud rakuliinide puhul.
Kõrge elujõulisus: Optimeeritud selleks, et maksimeerida rakkude taastumist ja elujõulisust pärast sulatamist, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Kasutusvalmis: Mugav valmistada ja steriliseerida koheseks kasutamiseks, vähendades ettevalmistusaega ja saastumisohtu.
Suurendatud stabiilsus: Säilitab järjepideva tulemuslikkuse standardsetes krüokonserveerimistingimustes, tagades reprodutseeritavad tulemused.
Pikk säilivusaeg: CM-1 on seerumit sisaldav, kasutusvalmis krüokonserveerimissöötme, mida võib säilitada külmkapis kuni üks aasta.


CM-1 kasutamine rakkude külmutamiseks

CM-1 kasutamiseks nii adherentsete kui ka suspensioonirakkude külmutamiseks järgige järgmisi samme

Adherentsete rakkude puhul peske ja eraldage need kultuurisubstraadist. Suspensioonirakkude puhul jätkake otse järgmise sammuga.
Arvutage rakke, et tagada nende õige kontsentratsioon.
Pelleteerimiseks tsentrifuugige rakud, seejärel resuspenseerige need CM-1 külmutuskeskkonnas.
Ülekandke resuspendeeritud rakud krüoklaasidesse.
Kasutage enne rakkude pikaajalisse säilitamisse viimist aeglast külmutamist





Meetod
Kirjeldus
Sammud





❄️
Käsitsi külmutamine

Järkjärguline meetod, mis hõlmab järk-järgulist temperatuuri vähendamist rakkude elujõulisuse tagamiseks

1️⃣ Asetage rakud külmutuskeskkonda 4 °C sügavkülmikusse 40 minutiks.
2️⃣ Viiakse 24 tunniks -80 °C sügavkülmikusse.
3️⃣ Säilitada rakke pikaajalise säilitamise eesmärgil vedelas lämmastikus



❄️
Mr. Frosty kasutamine

Mugav seade, mis võimaldab kontrollitud külmutamiskiirust ilma elektrienergiata

1️⃣ Valmistage rakud krüoviaalides külmutuskeskkonnaga ette.
2️⃣ Asetage krüoviaalid Mr. Frosty konteinerisse.
3️⃣ Säilitage 24 tundi temperatuuril -80 °C enne vedela lämmastiku sisse viimist



❄️
Reguleeritava kiirusega sügavkülmik

Thermo Fisheri või teiste tootjate kõrge täpsusega sügavkülmik, mis on ette nähtud temperatuuri kontrollitud langetamiseks

1️⃣ Programmeerige seade nii, et temperatuur langeb järk-järgult.
2️⃣ Asetage ettevalmistatud rakud sügavkülmikusse.
3️⃣ Pärast külmutamistsüklit viige rakud üle vedela lämmastikuga









Säilitage krüoviaalid temperatuuril alla -130 °C või pikaajalise säilitamise eesmärgil vedelas lämmastikus.


Koostisosad

Sisaldab FBS, DMSO, glükoosi, soolasid
Puhverdusvõime: pH = 7,2 kuni 7,6


Cytion's Freeze Medium CM-1 pakub usaldusväärset lahendust krüokonserveerimiseks, tagades rakkude kõrge elujõulisuse ja funktsionaalsuse pärast sulatamist mitmesuguste teadusrakenduste jaoks.

RPMI 1640 keskkond, tuntud ka kui RPMI keskkond, on väga mitmekülgne rakukultuurikeskkond, mida kasutatakse laialdaselt bioloogilistes uuringutes erinevate imetajarakkude kasvatamiseks. See keskkond, mille arendasid George E. Moore, Robert E. Gerner ja H. Addison Franklin 1966. aastal tuntud Roswell Park Comprehensive Cancer Center'is, on saanud oma nime Roswell Park Memorial Institute'i (RPMI) päritolu järgi.
Esialgu inimleukeemiarakkude kasvu toetamiseks nii suspensiooni
- kui ka monokihiliste kultuuride puhul loodud RPMI 1640 keskkond on teadlaste ja kaubanduslike tarnijate muudatuste kaudu muutunud sobivaks mitmesuguste imetajarakkude jaoks. See sobib erakordselt hästi selliste rakuliinidega nagu HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrotsüüdid ja kartsinoomid.
RPMI 1640 Medium eristub teistest rakukultuurikeskkondadest oma unikaalse koostise poolest. See sisaldab märkimisväärses koguses fosfaate, aminohappeid ja vitamiine. Eelkõige sisaldab see biotiini, B12-vitamiini ja PABA-d, mis puuduvad Eagle's Minimal Essential Medium'is või Dulbecco's Modified Eagle Medium'is. Lisaks sellele on RPMI 1640 Mediumis oluliselt kõrgemad inositooli ja koliini vitamiinide kontsentratsioonid. See ei sisalda aga valke, lipiide ega kasvufaktoreid. Sellest tulenevalt on rakkude optimaalsete kasvutingimuste tagamiseks tavaliselt vaja lisada 10% veiste loote seerumit (FBS).
RPMI 1640 keskkonda puhverdav süsteem põhineb naatriumbikarbonaadil ja vajab 5-10% CO2 keskkonda, et säilitada füsioloogiliselt sobiv pH. Redutseeriva aine glutatiooni lisamine eristab seda keskkonda teistest veelgi.
Kvaliteedikontroll

Steriilselt filtreeritud


Säilitamine ja säilivusaeg

Säilitada +2°C kuni +8°C juures, valguse eest kaitstult.
Pärast avamist säilitada 4°C ja kasutada 6-8 nädala jooksul.


Veotingimused

Keskkonnatemperatuur


Hooldus

Hoida külmkapis +2°C kuni +8°C juures pimedas. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist kuni +37°C, kuna see vähendab toote kvaliteeti.
Ärge kuumutage keskkonda üle 37°C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, näiteks mikrolaineahjusid.
Kui kasutatakse ainult osa söötmest, võtke vajalik kogus välja ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini.



Koostis




Kategooria
Komponendid
Kontsentratsioon (mg/l)


Aminohapped
Glütsiin
10.00



L-Alanüül-L-glutamiin
434.40



L-arginiin
200.00



L-asparagiinH2O
56.82



L-asparagiinhape
20.00



L-tsüstiin 2HCl
65.20



L-glutamiinhape
20.00



L-Histidiin HClH2O
20.27



L-Hüdroksü-L-proliin
20.00



L-isoleutsiin
50.00



L-leutsiin
50.00



L-Lüsiin HCl
40.00



L-metioniin
15.00



L-Fenüülalaniin
15.00



L-proliin
20.00



L-Seriin
30.00



L-treoniin
20.00



L-trüptofaan
5.00



L-Türosiin 2Na 2H2O
28.83



L-Valiin
20.00


Vitamiinid
p-Aminobensoehape
1.00



D-Biotiin
0.20



Koliinkloriid
3.00



D-kaltsium-pantotenaat
0.25



Foolhape
1.00



myo-Inositool
35.00



Nikotiinamiid
1.00



Püridoksiin HCl
1.00



Riboflaviin
0.20



Tiamiini HCl
1.00



B12-vitamiin
0.005


Anorgaanilised soolad
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Muud komponendid
D-glükoos
2000.00



L-glutatioon redutseeritud
1.00



Fenoolpunane naatriumsool
5.30

Accutase rakkude dissotsiatsioonireaktiiv
- õrn alternatiiv trüpsiinile
Accutase on rakkude eralduslahus, mis on revolutsiooniliselt muutmas rakukultuuritööstust. See on proteolüütiliste ja kollagenolüütiliste ensüümide segu, mis jäljendab trüpsiini ja kollügenaasi toimet. Erinevalt trüpsiinist ei sisalda Accutase imetajate või bakterite komponente ja on rakkude suhtes palju leebem, mistõttu on see ideaalne lahendus rakkude rutiinseks eraldamiseks standardsetest koekultuuride plastmassidest ja adhesiooniga kaetud plastmassidest. Selles blogipostituses uurime Accutase'i eeliseid ja kasutusvõimalusi ning seda, kuidas see muudab rakukultuuride mängu.
Accutase'i eelised
Accutase'il on traditsiooniliste trüpsiinilahuste ees mitmeid eeliseid. Esiteks saab seda kasutada alati, kui on vaja õrnalt ja tõhusalt eraldada mis tahes kleepuvat rakuliini, mistõttu on see otsene asendaja trüpsiinile. Teiseks toimib Accutase väga hästi embrüonaalsete ja neuronaalsete tüvirakkude puhul ning on tõestatud, et see säilitab nende rakkude elujõulisuse pärast passageerimist. Kolmandaks säilitab Accutase enamiku epitoope hilisemaks voolutsütomeetriliseks analüüsiks, mistõttu on see ideaalne rakupinna markerite analüüsiks.
Lisaks ei ole Accutase'i vaja neutraliseerida adherentsete rakkude passageerimisel. Kui pärast rakkude jagamist lisatakse rohkem keskkonda, lahjendatakse Accutase, nii et see ei ole enam võimeline rakke eraldama. See välistab vajaduse inaktiveerimise etapi järele ja säästab rakukultuuritehnikute aega. Lõpuks ei ole vaja Accutase'i aliquotida ja pudel püsib külmkapis 2 kuud.
Accutase'i rakendused
Accutase on otsene trüpsiinilahuse asendaja ja seda saab kasutada rakuliinide passageerimiseks. Lisaks toimib Accutase hästi rakkude eraldamisel paljude rakupinna markerite analüüsiks voolutsütomeetria abil ja rakkude sorteerimiseks. Muud Accutase töötlemise rakendused hõlmavad rakupinna markerite analüüsi, viiruste kasvu analüüsi, rakkude proliferatsiooni, kasvajarakkude migratsiooni teste, rutiinset rakupassaaži, tootmise suurendamist (bioreaktor) ja voolutsütomeetriat.
Accutase koostis
Accutase ei sisalda imetajate või bakterite komponente ja on looduslik ensüümsegu, millel on proteolüütiline ja kollagenolüütiline ensüümiaktiivsus. See on formuleeritud palju madalamas kontsentratsioonis kui trüpsiin ja kollügenaas, mis muudab selle vähem toksiliseks ja õrnemaks, kuid sama tõhusaks.
Accutase tõhusus
Accutase on osutunud tõhusaks primaar
- ja tüvirakkude eraldamisel ja rakkude kõrge elujõulisuse säilitamisel võrreldes loomset päritolu ensüümidega, nagu trüpsiin. pärast 10 minutit on 100% rakkudest tagasi saadud ning tänu Accutase'i autodigestioonile ei ole kahjulik jätta rakke Accutase'ile kuni 45 minutiks.
Kokkuvõttes
Kokkuvõttes on Accutase võimas lahendus, mis muudab rakukultuuride mängu. Tänu oma õrnale olemusele, tõhususele ja mitmekülgsusele on Accutase ideaalne alternatiiv trüpsiinile. Kui otsite usaldusväärset ja tõhusat lahendust rakkude eraldamiseks, on Accutase teie jaoks õige lahendus.

Toote ülevaade
Maht: 100 ml Säilitamine: ≤-15°C Steriilsus: Steriilselt filtreeritud
Antibiootikum/antimükootiline lahus (100x) on steriilne, kasutusvalmis kontsentraat, mis on mõeldud mikroobse saastumise riski vähendamiseks rakukultuurides ja nendega seotud laboratoorsetes rakendustes. See 100x lahus sisaldab penitsilliini, streptomütsiini ja amfoteritsiin B hästi tõestatud kombinatsiooni, mis tagab laia spektriga antimikroobse toime grampositiivsete ja gramnegatiivsete bakterite, pärmseente ja filamentsete seente vastu. Preparaat sobib kasutamiseks eukarüootilistes rakukultuurides, bakteriaalsetes keskkondades ja muudes saastetundlikes süsteemides, toetades puhtaid ja järjepidevaid laboritoiminguid.
Kasutamine ja eelised Seda rutiinsete teadusprotokollide jaoks optimeeritud lahust kasutatakse laialdaselt aseptiliste tingimuste säilitamiseks rakukultuuride tööprotsessides. See pakub usaldusväärset toimimist saastetundlikes keskkondades, aidates teadlastel vähendada mikroobide ülekasvu ohtu, ilma et see kahjustaks rakkude tervist või katsete reprodutseeritavust. Steriilne filtreeritud koostis välistab vajaduse täiendavate solubiliseerimisetappide järele, toetades ühtlustatud söötme ettevalmistamist ja vähendades igapäevaste laboriprotseduuride varieeruvust.
Kasutamine ja ühilduvus Standardsete töökontsentratsioonide saavutamiseks lahjendage lahust 1:100 teie täielikule kultuurikeskkonnale. Toode ühildub paljude imetajate rakuliinide ja põhikeskkondadega. Tänu pidevale varude kättesaadavusele saavad teadlased kasu usaldusväärsest tarnekindlusest ja lihtsustatud logistika planeerimisest. Stabiilsuse säilitamiseks tuleb lahust hoida temperatuuril ≤ -15 °C ja kaitsta korduvate külmutamis
- ja sulatamistsüklite eest. Ainult teaduslikuks kasutamiseks. Mitte kasutamiseks diagnostilistes või terapeutilistes protseduurides. Mitte kasutamiseks inimestel või loomadel.

Fosfaadiga puhverdatud soolalahus (PBS) Lahus
Fosfaadiga puhverdatud soolalahus (PBS) on bioloogilistes ja keemilistes uuringutes laialdaselt kasutatav puhverlahus. See mängib olulist rolli pH-tasakaalu ja osmolaarsuse säilitamisel erinevate katsete, sealhulgas kudede töötlemise ja rakukultuuride käigus. Meie PBS-lahus on hoolikalt formuleeritud kõrge puhtusastmega koostisosadest, et tagada stabiilsus ja usaldusväärsus igas eksperimendis. Meie PBS-i osmolaarsus ja ioonide kontsentratsioonid jäljendavad täpselt inimkeha omast, mistõttu on see isotooniline ja enamikule rakkudele mittetoksiline.

Meie PBS-lahuse koostis
Meie PBS-lahus on ülipuhaste fosfaatpuhvrite ja soolalahuste pH-ga kohandatud segu. 1X töökontsentratsioonis sisaldab see järgmist:

8000 mg/l naatriumkloriidi (NaCl)
200 mg/l kaaliumkloriidi (KCl)
1150 mg/L naatriumfosfaat kahealuseline veevaba (Na2HPO4)
200 mg/L Kaaliumfosfaat monobaasiline veevaba (KH2PO4)

See koostis tagab optimaalse pH ja ioonitasakaalu, mis sobib mitmesuguste bioloogiliste rakenduste jaoks.

Meie PBS-lahuse rakendused
Meie PBS-lahus sobib ideaalselt mitmesugusteks rakendusteks bioloogilistes uuringutes. Selle isotoonilised ja mittetoksilised omadused muudavad selle sobivaks ainete lahjendamiseks ja rakukonteinerite loputamiseks. EDTA-d sisaldavad PBS-lahused on tõhusad kinnitunud ja klompunud rakkude eraldamiseks. PBS-i ei tohiks siiski lisada kahevalentseid metalle, nagu tsink, kuna see võib põhjustada sadestumist. Sellistel juhtudel soovitatakse kasutada Good's puhvreid. Lisaks on meie PBS-lahus vastuvõetav alternatiiv viiruste transpordikeskkonnale RNA-viiruste, sealhulgas SARS-CoV-2 transportimiseks ja säilitamiseks.

Kvaliteedikontroll

Steriilselt filtreeritud


Säilitamine ja säilivusaeg

Säilitada +2°C kuni +25°C juures, valguse eest kaitstult.
Pärast avamist säilitada temperatuuril 2°C kuni 25°C ja kasutada 24 kuu jooksul.


Veotingimused

Keskkonnatemperatuur


Hooldus

Hoida külmkapis +2°C kuni +8°C juures pimedas. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist kuni +37°C, kuna see vähendab toote kvaliteeti.
Ärge kuumutage keskkonda üle 37°C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, näiteks mikrolaineahjusid.
Kui kasutatakse ainult osa söötmest, võtke vajalik kogus välja ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini.

Koostis



Kategooria
Komponendid
Kontsentratsioon (mg/l)


Soolad
Kaaliumkloriid
200



Kaaliumfosfaat monobaasiline veevaba
200



Naatriumkloriid
8000



Naatriumfosfaat kahealuseline veevaba
1150