SW-620 rakud – mõju käärsoolevähi uurimisele ja katsetamisele
SW-620 rakud moodustavad Dukesi staadiumi C inimese kolorektaalvähi rakuliini. Neil on kõrge tuumorigeenne ja metastaatiline potentsiaal. Seetõttu kasutatakse neid laialdaselt vähi- ja toksikoloogiauuringutes. Käesolevas artiklis uuritakse käärsoolevähi rakuliini SW-620 põhilisi aspekte.
- Kasvukeskkond
- SW-620 rakkude ideaalseks kasvatamiseks kasutatakse DMEM-kasvukeskkonda, millele on lisatud 10% loote veise seerumit, 4,5 g/l glükoosi, 4 mM L-glutamiini, 1,5 g/l NaHCO3 ja 1,0 mM naatriumpüruvaati. Kasvukeskkonda tuleks vahetada kaks korda nädalas.
- Kaksikustumisaeg
- SW-620 rakkude kahekordistumisaeg on vahemikus 20–26 tundi.
- Kasvutüüp
- SW-620 rakuliin on adhesiivne. Rakud moodustavad kultuurianuma pinnal monokihid.
- Bioloogiline ohutustase
- BSL-1
- Saadaval
- Cytion — Telli SW-620
SW-620 rakkude päritolu ja üldised omadused
Päritolu ja üldised omadused on rakuliini kohta kõige olulisem teave. Selle eelnev tundmine on hädavajalik teadlastele, kes kaaluvad selle kasutamist oma uurimistöös. Artikli selles osas selgitatakse SW-620 rakuliini peamisi omadusi ja päritolu. Peamiselt saate teada järgmist: Mis on SW620 rakuliin? Millised on SW-620 rakuliini omadused? Milline on SW-620 päritolu? Milline on SW-640 rakkude suurus? Ja milline on erinevus SW-620 ja SW-480 vahel?
- SW-620 on kolorektaalse kartsinoomi rakuliin, mis pärineb 51-aastase valgenahalise mehe, kellel oli käärsoole adenokartsinoom, mediatiivse lümfisõlme kahjustusest [1]. Selle rakuliini hoiustasid A. Leibovitz ja kolleegid.
- SW-620 rakkudel on epiteelne morfoloogia. Need koosnevad väikestest ümmargustest ja bipolaarsetest rakkudest, millel on mikrovillid.
- SW-620 rakkude läbimõõt on 14,4 ± 0,3 μm.
- Nendel käärsoolevähirakkudel on hüperdiploidset kariootüüpi. SW-620 rakkude modaalne kromosoomide arv on 50, mis võib varieeruda vahemikus 45–53.
SW-480 vs SW-620
SW-480 ja SW-620 on kolorektaalvähirakkude liinid. SW-480 saadi primaartuumorist, samas kui SW-620 loodi metastaasidega lümfisõlmest. Lisaks erinevad nendest rakuliinidest arendatud ksenotransplantaadid üksteisest. SW-620 ksenotransplantaadid moodustavad kasvajarakkude kihte, samas kui SW-480 ksenotransplantaadid moodustavad näärmekujulisi struktuure [2]. Mõlemal rakuliinil on identsed mutatsiooniprofiilid.
SW-620 rakud: kultiveerimise juhised
Rakuliini kasvatamise põhimõtete mõistmine on hädavajalik, kuna see aitab tagada rakkude õige käitlemise ja hooldamise. Käesolevas jaotises on toodud mõned SW-620 kasvatamise põhipunktid, mis aitavad teil teada saada: Mis on SW-620 kasvukeskkond? Milline on SW-620 rakkude kahekordistumisaeg? Kuidas kasvatada SW-620 rakke?
SW-620 rakkude kasvatamise põhipunktid
Kahekordistumisaeg:
SW-620 kahekordistumisaeg on vahemikus 20–26 tundi.
Adherentne või suspensioonis:
SW-620 rakuliin on adhesiivne. Rakud moodustavad kultiveerimisnõu pinnal monokihid.
Subkultiveerimissuhe:
SW-620 rakke subkultiveeritakse jagamissuhtega 1:3. Adherentseid rakke loputatakse fosfaadipuhvri (1X) lahusega, milles puuduvad magneesium ja kaltsium. Seejärel lisatakse passaažilahus Accutase ja rakke inkubeeritakse toatemperatuuril 8–10 minutit. Lisatakse värsket kasvukeskkonda ja rakud tsentrifuugitakse. Seejärel suspendeeritakse kogutud rakud hoolikalt kasvukeskkonnas ja jaotatakse uutesse kolvidesse kasvatamiseks.
Kasvukeskkond:
SW-620 rakkude ideaalseks kasvatamiseks kasutatakse DMEM-kasvukeskkonda, millele on lisatud 10% loote veise seerumit, 4,5 g/l glükoosi, 4 mM L-glutamiini, 1,5 g/l NaHCO₃ ja 1,0 mM naatriumpüruvaati. Kasvukeskkonda tuleks vahetada kaks korda nädalas.
Kasvatustingimused:
SW-620 käärsoolekartsinoomi rakke kasvatatakse niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja 5% CO₂ sisaldusega.
Säilitamine:
Pärast külmutamist säilitatakse SW-620 rakke temperatuuril alla -150 °C ülikülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis.
Külmutamisprotsess ja keskkond:
CM-1 või CM-ACF on SW-620 rakkude jaoks ideaalne külmutuskeskkond. SW-620 rakkude külmutamiseks kasutatakse aeglast külmutamisprotsessi. See võimaldab temperatuuri langust vaid 1 °C minutis, kaitstes seeläbi rakkude eluvõimelisust.
Sulatusprotsess:
Külmutatud SW-620 rakke sulatatakse eelnevalt 37 °C-le seadistatud veevannis 40–60 sekundit. Sulatamise järel lisatakse kasvukeskkond ja rakud tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonda kuuluvad osakesed. Seejärel suspendeeritakse saadud rakupellet uuesti kasvukeskkonnas ja rakud valatakse kasvu jaoks uude kolbi.
Bioloogilise ohutuse tase:
SW-620 kultuuride käitlemiseks on vajalik 1. bioloogilise ohutuse taseme (BSL-1) labor.
SW-620 rakkude eelised
Eelised
- Pärasoolekartsinoomi modelleerimine: SW-620 rakud on pärasoolekartsinoomi oluline mudel, mis võimaldab põhjalikult uurida kasvaja ja metastaaside tekkemehhanisme, eriti ksenotransplantaadi mudelites.
- Vähktõve uurimine ja ravi: Need rakud hõlbustavad vähktõve bioloogia, kemoteraapia tõhususe ja rakkude surma mehhanismide, sealhulgas anoikise uurimist.
- CD133 ekspressioon: CD133 ekspressioon SW-620 rakkudes annab ülevaate vähirakkude bioloogiast ning selle mõjust kasvajate tekkele ja ravimresistentsusele.
- Voolutsütomeetria rakendused: Nende rakkude voolutsütomeetriline analüüs võimaldab hinnata rakupopulatsioone, apoptoosi taset ja proliferatsiooni.
SW-620 rakuliini rakendused teadustöös
Allpool on käsitletud uurimisvaldkondi, kus SW-620 rakud leiavad paljulubavat rakendust:
- Vähktõve uurimine: SW-620 on hindamatu väärtusega rakumudel kolorektaalvähi bioloogia uurimiseks. Teadlased kasutavad seda in vitro mudelit, et uurida molekulaarseid mehhanisme, mis ajendavad vähirakkude kasvu, invasiivsust ja rännet. Lisaks saab seda kasutada SW-620 rakuliini mutatsioonide, st p53, APC ja KRAS, uurimiseks. 2021. aastal läbi viidud uuringus uuriti SW-620 rakuliini KRAS-mutatsiooni mõju uue ravimi FL118 suhtes tundlikkusele. Nad täheldasid, et KRAS-i üliekspressioon suurendab FL118 poolt indutseeritud kolorektaalrakkude apoptoosi, samas kui selle vaigistamine seda vähendab. Need tulemused võivad aidata ennustada FL118 kasutamist KRAS-mutatsiooniga käärsoolevähiga patsientidel [3].
- Ravimite sõelumine ja arendamine: SW-620 rakuliini kasutatakse laialdaselt käärsoolevähi vastu suunatud potentsiaalsete ravimikandidaatide sõelumiseks ja testimiseks. Teadlased kasutavad neid rakke ravimite tsütotoksilisuse ja efektiivsuse hindamiseks, mis võib viia sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamiseni. Näiteks uuriti ühes uuringus kaneeli ja nelgi üksikute eeterlike õlide ühendite kolorektaalvähivastast toimet, kasutades SW-620 rakuliini [4].
- Metastaaside uuringud: Kuna SW-620 rakkudel on suur metastaaside tekkimise potentsiaal, saab neid kasutada vähirakkude metastaaside aluseks olevate molekulaarsete signaaliteede uurimiseks. Näiteks leidsid Zhou Yang ja tema kolleegid Grainy-head-like 2 (GRHL2) geeni rolli käärsoolevähi progresseerumisel ja metastaaside tekkel. Nad esitasid hüpoteesi, et GRHL2 geeni ekspressioon pärsib käärsoolevähi progresseerumist ja metastaaside teket, surudes maha epiteeli-mesenküümse ülemineku (EMT) [5].
Tagage oma SW620 rakuliini turvalisus
SW-620 rakud: Publikatsioonid
Selles osas tutvustatakse mõningaid huvitavaid ja enim tsiteeritud teadusartikleid SW-620 rakkude kohta.
Ajakirjas „Molecular Carcinogenesis“ (2017) avaldatud uuringus väideti, et polüfenool urolitiin A ravi indutseerib autofaagiat kolorektaalvähirakkude liinis SW620. Samuti pärssis see vähirakkude metastaase.
Ajakirjas „Oncology Letters“ (2018) ilmunud artiklis uuriti bis-bensüülisokinooliini alkaloidi tetrandriini metastaasivastast potentsiaali, kasutades SW-620 rakke.
See artikkel on avaldatud ajakirjas „Biochemical and Biophysical Research Communications“ (2018). Selles väidetakse, et CDCA3 (rakudivisjoni tsükliga seotud 3) geeni ekspressioon on kolorektaalvähirakkudes ülesreguleeritud ja see soodustab rakkude proliferatsiooni NF-κB signaalitee aktiveerimise kaudu.
Ajakirjas „International Journal of Molecular Sciences“ (2021) avaldatud uuringus uuriti bispetsiifilise antikeha (ABL001) ja kemoteraapiaravimite sünergilist mõju kasvaja progresseerumisele SW620 ksenotransplantaadis.
See artikkel on avaldatud ajakirjas „Cells“ (2018). Selles uuriti Bacopa monnieri Bacopaside II ekstrakti kasvajavastast toimet SW-620 ja teistes kolorektaalvähirakkudes.
SW-620 rakuliini ressursid: protokollid, videod ja muud
Allpool on toodud mõned veebivahendid, mis käsitlevad SW-620 käärsoolevähirakke.
- SW-620 transfektsioon: Käesolevas artiklis kirjeldatakse lühidalt SW-620 rakuliini stabiilse transfektsiooni protokolli.
Järgmine link sisaldab SW-620 rakukultuuri protokolli.
- SW-620 rakukultuuri protokoll: see link pakub põhiandmeid SW-620 rakuliini kohta. Samuti aitab see teil õppida SW-620 rakkude subkultiveerimise protokolli ning krüokonserveeritud ja paljunevate SW-620 kultuuride käitlemist.
- Rakukultuuri protokollid: See video on suurepärane allikas adhesiivsete rakkude subkultiveerimise, külmutamise ja sulatamise protokollide õppimiseks.
Korduma kippuvad küsimused SW620 rakkude kohta
SW620 rakud on inimese kolorektaalse adenokartsinoomi rakud, mis on saadud käärsoolevähki haigestunud patsiendi lümfisõlmede metastaasidest, mistõttu on need olulised vähiuuringute jaoks.
SW620 rakkude läbimõõt on tavaliselt 15 kuni 30 mikromeetrit, kuigi see võib sõltuvalt kasvatustingimustest varieeruda.
SW620 rakkudel on mitmeid mutatsioone, sealhulgas TP53 geenis. Need mutatsioonid võivad mõjutada rakkude morfoloogiat, mille tulemuseks on populatsioonis erinevad kujud ja suurused.
SW620 ja SW480 rakud on mõlemad saadud käärsoole adenokartsinoomidest, kuid SW620 rakud pärinevad metastaatilisest kohast, samas kui SW480 rakud pärinevad primaarsest kasvajast. See erinevus võib mõjutada nende geneetilist koostist, käitumist kultuuris ja ravivastust.
SW620 rakud on olulised kasvajate tekke uurimisel, eriti tänu nende võimele moodustada ksenotransplantaadi hiire mudelites kasvajaid ja nende vähi tüvirakkude markerite, nagu CD133, ekspressioonile.
Jah, SW620 rakke kasutatakse rakusurmaradade, sealhulgas apoptoosi ja anoikuse uurimiseks, kuna need reageerivad erinevatele vähiravimitele ja keskkonnatingimustele.
SW620 rakkude kõrge metastaatiline potentsiaal ja nende päritolu metastaatilisest lümfisõlmest teevad neist asjakohase mudeli jämesoolevähi leviku uurimiseks.
Voolutsütomeetria võimaldab teadlastel analüüsida SW620 rakkude omadusi, sealhulgas CD133 ekspressioonimustrit ja apoptoosi ulatust või tundlikkust anoikuse suhtes.
SW620 rakkudel on suur kasvajate tekkepotentsiaal, kui need viiakse immuunpuudulikku ksenotransplantaadiga hiire mudelisse, mis muudab need väärtuslikuks vähi progresseerumise in vivo uuringutes.
Viited
- Siekmann, W. jt., Lidokaiini ja ropivakaiini mõju primaarsetele (SW480) ja metastaatilistele (SW620) käärsoolevähi rakuliinidele. Oncol Lett, 2019. 18(1): lk 395–401.
- Hewitt, R.E. jt., Paksusuoli vähi progresseerumise mudeli valideerimine. J Pathol, 2000. 192(4): lk 446–54.
- Thangaiyan, R. jt., Kras-mutatsiooni alatüübid mõjutavad selgelt kolorektaalvähi rakkude tundlikkust FL118 suhtes, mis on uus survivini, Mcl-1, XIAP, cIAP2 ja MdmX inhibiitor. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): lk 7458.
- Petrocelli, G. jt., Taimede eeterlikes õlides leiduvad molekulid kolorektaalvähi (CRC) ennetamiseks ja raviks. Molecules, 2021. 26(4): lk 885.
- Yang, Z. jt., GRHL2 pärsib kolorektaalvähi progresseerumist ja metastaaside teket, takistades epiteel-mesenküümse üleminekut. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): lk 1195–1205.