RBL-2H3 rakud – RBL-2H3 tähtsus allergilises reaktsioonis ja immunoloogilistes uuringutes
RBL-2H3 rakuliin on rottidelt pärinev basofiilne leukeemiarakuliin, mida kasutatakse immunoloogilistes uuringutes. See toimib mudelisüsteemina mastotsüütide füsioloogia, käitumise ja funktsioonide uurimiseks. Neid rakke kasutatakse ka allergiliste reaktsioonide, immunoloogiliste protsesside ning ravimite testimise ja arendamise uurimiseks.
- Kasvukeskkond
- RBL-2H3 rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEM-kasvatuskeskkonda, mis sisaldab 10% FBS-i, 2 mM L-glutamiini, 2,2 g/l NaHCO3 ja EBSS-soola. Kasvatuskeskkonda tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
- Kaksikustumisaeg
- RBL-2H3 nuumrakkude kahekordistumisaeg on umbes 50–60 tundi.
- Kasvutüüp
- RBL-2H3 on adhesiivne rakuliin.
- Bioloogilise ohutuse tase
- BSL-2
- Saadaval
- Cytion — Telli RBL-2H3
- RBL-2H3 rakud: päritolu ja üldised omadused
- RBL-2H3 rakud: kasvatamise juhised
- RBL-2H3 basofiilide rakuliini eelised ja piirangud
- RBL-2H3 rakuliin: immunoloogilise uurimistöö nurgakivi
- RBL-2H3 rakuliin: olulised KKK-d teadlastele
- Viited
- RBL-2H3 rakuliin edasijõudnud immunoloogilisteks uuringuteks
- RBL-2H3 rakud: teadusartiklid
- RBL-2H3 rakuliini ressursid: protokollid, videod ja muud materjalid
- Korduma kippuvad küsimused
RBL-2H3 rakud: päritolu ja üldised omadused
Enne basofiilide rakuliini kasutamist oma uuringutes peaksite teadma selle päritolu ja üldisi omadusi. Artikli selles osas tutvustatakse RBL-2H3 rakkude põhitõdesid. Näiteks: mis on RBL-2H3 nuumrakud? Miks kasutada RBL-2H3 rakke? Mis on RBL-2H3 rakud roti basofiilses leukeemias? Milline on RBL-2H3 morfoloogia? Kas RBL-2H3 rakud on surematud?
- RBL-2H3 on basofiilse leukeemia rakud, mis saadi 1978. aastal Wistari rottide basofiilrakkudest National Institute of Dental Researchi immunoloogia laboris.
- RBL-2H3-rakkudel on c-kit-retseptori türosiinkinaas ja mastotsüütide proteaasi II (RMCP-II) retseptorid, mis teeb neist potentsiaalse mastotsüütide mudeli. Seetõttu nimetatakse neid tavaliselt mastotsüütideks, hoolimata sellest, et need pärinevad roti basofiilidest [1].
- Aktiveerimisel vabastavad need histamiini ja teisi vahendajaid ning ekspresseerivad kõrge afiinsusega IgE-retseptoreid.
- RBL-2H3-rakkudel on fibroblastidele sarnane morfoloogia.
RBL-2H3 rakud: kasvatamisjuhised
Käesolev osa aitab teil tutvuda RBL-2H3 rakuliini kasvatamise mõningate oluliste aspektidega. Saate teada: Milline on RBL-2H3 rakkude kahekordistumisaeg? Milline on RBL-2H3 rakkude külvitihedus? Milline on RBL-2H3 rakukultuuri kasvatamise protokoll? Milline on RBL-2H3 rakuliini külmutuskeskkond?
RBL-2H3 rakkude kasvatamise põhipunktid
Populatsiooni kahekordistumisaeg:
RBL-2H3 nuumrakkude kahekordistumisaeg on umbes 50–60 tundi.
Adherentne või suspensioonis:
RBL-2H3 on adhesiivne rakuliin.
Subkultiveerimissuhe:
RBL-2H3 rakkude puhul hoitakse jagamissuhet vahemikus 1:2 kuni 1:4. Adherentseid rakke pestakse magneesiumi- ja kaltsiumivaba 1× PBS-lahusega. Subkultiveerimislahus Lisatakse Accutase’i ja rakke hoitakse 10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid kultuurinõu põhjast. Lisatakse värsket kasvukeskkonda ja rakke tsentrifuugitakse. Korjatud rakud suspendeeritakse ettevaatlikult värskes kasvukeskkonnas ja valatakse uutesse kasvukeskkonda sisaldavatesse kolbidesse.
Kasvukeskkond:
RBL-2H3 rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEM-kasvukeskkonda, mis sisaldab 10% FBS-i, 2 mM L-glutamiini, 2,2 g/l NaHCO₃ ja EBSS-soola. Kasvukeskkond tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
Kasvatustingimused:
RBL-2H3 rakke kasvatatakse niisutatud inkubaatoris, mille temperatuur on seatud 37 °C-le ja mis on ühendatud 5% CO₂ allikaga.
Säilitamine:
Rakke säilitatakse vedela lämmastiku aurufaasis või elektrilises sügavkülmikus temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude eluvõime pikaajaliselt.
Külmutamisprotsess ja keskkond:
RBL-2H3 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda aeglase külmutamisprotsessi abil. Lühidalt öeldes võimaldab see meetod temperatuuri langust 1 °C minutis ja kaitseb rakke šoki eest.
Sulatusprotsess:
RBL-2H3 rakke sulatatakse eelnevalt seadistatud veevannis (37 °C) umbes 60 sekundit. Seejärel lisatakse rakud värskesse kasvukeskkonda ja tsentrifuugitakse. See etapp on oluline külmutuskeskkondade komponentide eemaldamiseks. Seejärel suspendeeritakse rakupellet uuesti kasvukeskkonnas ja rakud jaotatakse kultiveerimiseks kolbi.
Bioloogilise ohutuse tase:
RBL-2H3 rakke tuleb hoida 1. bioloogilise ohutuse taseme laborites.
Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026
RBL-2H3 basofiilide rakuliini eelised ja piirangud
RBL-2H3 rakke kasutatakse laialdaselt immunoloogilistes uuringutes. Käesolevas jaotises kirjeldatakse nende peamisi eeliseid ja piiranguid.
Eelised
- Lihtne kasvatada: RBL-2H3 rakke on laborikeskkonnas lihtne kasvatada ja hooldada. See võimaldab läbi viia kulutõhusaid ja korratavaid katseid, mistõttu on need populaarne valik immunoloogia alaste esialgsete uuringute jaoks.
Piirangud
- Mitteinimese päritolu: RBL-2H3 rakud pärinevad roti basofiilidest ja ei pruugi täpselt jäljendada inimese bioloogilisi protsesse, mis võib piirata nende rakendatavust inimese spetsiifilistes uuringutes. Seetõttu tuleb andmeid tõlgendada ettevaatlikult, kui tulemusi ekstrapoleeritakse inimese süsteemidele.
- Lihtsustatud nuumrakkude mudel: Kuigi need rakud pakuvad nuumrakkude funktsioonide uurimiseks põhimudelit, ei kajasta nad täielikult nuumrakkude vastastikmõjude keerukat olemust inimese immuunsüsteemis. Seetõttu ei pruugi need piisavalt modelleerida nuumrakkude mitmekülgseid rolle immuunvastustes või haigustingimustes in vivo.
RBL-2H3 rakuliin: immunoloogilise uurimistöö nurgakivi
Basofiilide ja mastotsüütide uurimine RBL-2H3 rakuliini abil
Rattus norvegicus’est pärinev RBL-2H3 rakuliin on basofiilide ja mastirakkude bioloogia uurimise võtmemudel. Need roti mastirakud annavad olulist teavet mastirakkude vahendajate vabanemise kohta, mis on kriitilise tähtsusega selliste allergiliste seisundite nagu allergiline riniit mõistmisel. Nende rakkude abil uurivad teadlased rakuretseptorite dünaamikat ja immunoloogiliste sünapside tekkimist, mis on kesksel kohal immuunsüsteemi reaktsioonis allergeenidele. 2019. aastal avaldatud huvitavas uuringus kasutati RBL-2H3 rakuliini ning uuriti Qingkailingi süstimise poolt esile kutsutud pseudoallergiliste reaktsioonide taga olevaid mehhanisme. Uuringus leiti, et PI3K-RAC1 signaalikaskad põhjustab osaliselt seda allergilist reaktsiooni rakkudes [2].
Immunoloogiliste sünapside dünaamika allergiauuringutes
Immunoloogilistes uuringutes laialdaselt kasutatavad RBL-2H3-rakud on eriti tõhusad immunoloogiliste sünapside dünaamika uurimisel. See aitab selgitada immuunsüsteemi kommunikatsiooniprotsesse ning seda rakendatakse nii perifeerse vere kui ka peritoneaalsete nuumrakkude uurimisel. Sellised uuringud on hädavajalikud immuunvastuse terviklikuks mõistmiseks nii süsteemses kui ka lokaalses kontekstis.
Ravimite sõelumine ja toksilisuse testimine
Ravimite sõelumisel ja katsetamisel kasutatakse ära RBL-rakkude reageerimisvõimet erinevatele ärritajatele, sealhulgas uuritakse, kuidas H₂O₂ pärsib IgE-vahendatud reaktsioone. Need rakud mängivad olulist rolli selliste haiguste nagu streptokokk-infektsioonide ravimeetodite väljatöötamisel, kus mitis-grupi streptokokid pärsivad mastotsüütide aktiveerumist. Lisaks sellele hindavad teadlased selle RBL 2H3 mc mudeli abil erinevate ainete, sealhulgas kemikaalide, ravimite ja nanokübemete toksilisi mõjusid. Näiteks ühes hiljutises uuringus (2022) hinnati polüstüreenist mikroplastide tsütotoksilisust RBL-2H3-rakkude suhtes. Leiti, et mikroplastid kahjustavad RBL-2H3-rakkude organelle ja soodustavad rakkude surma [3]. Teises, 2021. aasta uuringus hinnati RBL-2H3 mc-mudeli abil loodusliku ühendi neferiini antiallergilist ja põletikuvastast potentsiaali. Uuring näitas, et ühendil on head antiallergilised ja põletikuvastased omadused [4].
Immunoloogilise mõõtmise arenenud meetodid
RBL-2H3-rakkudest toimuv järjepidev ja mõõdetav vahendajate vabanemine muudab need ideaalseks mugavaks fluorimeetriaks, hõlbustades täpseid ja täpsed mõõtmisi, mis on haiguste uurimisel ja ravimite hindamisel otsustava tähtsusega.
RBL-2H3 rakuliin, mis pärineb Rattus norvegicus’est, on hindamatu väärtusega nii immunoloogia alus- kui ka rakendusuuringutes. See pakub laialdasi võimalusi meie teadmiste edendamiseks ja immunoloogiliste haiguste raviks.
RBL-2H3 rakuliin edasijõudnud immunoloogilisteks uuringuteks
RBL-2H3 rakud: teadusartiklid
Allpool on toodud mõned huvitavad teadusartiklid, milles käsitletakse RBL-2H3-mastotsüüte:
Narirutiini pärssiv toime RBL-2H3-rakkude degranulatsioonile
See teadustöö avaldati ajakirjas „Immunopharmacology and Immunotoxicology“ (2021). Uuringus väideti, et looduslik ühend narirutiin avaldab RBL-2H3-rakkude degranulatsioonile pärssivat mõju, reguleerides NF-κB, MAPK ja türosiinkinaasi signaaliteed.
Ajakirjas „International Journal of Molecular Sciences“ (2020) avaldatud uuringus väideti, et apigeniini ühend pärsib märkimisväärselt RBL-2H3 ja RAW264.7 rakkude allergilisi ja põletikulisi reaktsioone. Seetõttu võib see olla potentsiaalne aine immuunsüsteemiga seotud haiguste vastu võitlemiseks.
Ajakirjas „International Journal of Molecular Sciences“ (2021) avaldatud uurimistöös hinnati loodusliku toote saponariini allergiavastast ja põletikuvastast toimet, kasutades erinevaid rakuliine, sealhulgas RBL-2H3.
Ajakirjas „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2014) avaldatud uuringus leiti, et Benchalokawichiani ekstraktidel ja mõnel selle aktiivsel koostisosal on potentsiaalne pärssiv toime RBL-2H3 rakkudest β-heksosaminidaasi vabanemisele.
See artikkel avaldati 2018. aastal ajakirjas „International Journal of Biological Macromolecules“. Uuringus märgiti, et looduslik toode Spirulina maxima pärsib RBL 2H3 degranulatsiooni, takistades MAPK-de ja AKT fosforüleerimist.
RBL-2H3 rakuliini alased materjalid: protokollid, videod ja muud
RBL-2H3 on laialdaselt kasutatav nuumrakkude liin. Siin on loetletud kättesaadavad materjalid, mis hõlmavad RBL-2H3 kultiveerimise ja transfektsiooni protokolle:
- RBL-2H3 mastotsüütide mudel: See teadusartikkel sisaldab protokolle RBL-2H3 kultuuride hooldamiseks ja RBL-2H3 transfektsiooniks.
Siin on mõned allikad, mis selgitavad RBL-2H3 rakukultuuri protokolli:
- RBL-2H3 rakud: See veebisait on kasulik RBL-2H3 rakuliini rakukultuuri protokollide õppimiseks. Lisaks sisaldab see teavet RBL-2H3 rakukultuuri kasvukeskkonna ja kasvatamistingimuste kohta.
RBL-2H3 rakuliin: olulised KKK-d teadlastele
Viited
- Passante, E. ja N. Frankish, RBL-2H3 rakuliin: selle päritolu ja sobivus mastotsüütide mudelina. Inflamm Res, 2009. 58(11): lk 737–45.
- Li, Q. jt., Qingkailingi süsti põhjustatud pseudoallergiline reaktsioon osaliselt PI3K-Rac1 signaalitee kaudu RBL-2H3 rakkudes. Toxicology Research, 2019. 8(3): lk 353–360.
- Liu, L. jt., Polüstüreenist mikro- (nano-)plastikud kahjustavad RBL-2H3-rakkude organelle ja soodustavad MOAP-1-i poolt indutseeritud apoptoosi. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: lk 129550.
- Chiu, K.-M. jt., Neferiini antiallergiline ja põletikuvastane toime RBL-2H3 rakkudel. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): lk 10994.