MG-63 rakuliin: üksikasjalik juhend MG-63 rakkude kasutamise kohta osteosarkoomi uurimisel
MG-63 rakud on fibroblastilaadsed inimese osteosarkoomi rakud, millel on biomeditsiinivaldkonnas laialdased uurimisrakendused. See võib hõlmata luudega seotud protsesside, nagu luu areng ja diferentseerumine, uurimist. Lisaks on MG-63 rakuliin sobiv in vitro mudel luurakkude eluvõimelisuse, proliferatsiooni ja adhesiivsuse uurimiseks.
MG-63 rakuliini üldised omadused ja päritolu
Artikli selles osas käsitletakse MG-63 rakuliini päritolu ja üldisi omadusi. Saate teada: Mis on MG-63 rakuliin? Mis on MG-63 rakuliini päritolu? Milline on MG-63 rakkude morfoloogia? Milline on MG-63 rakkude suurus?
- MG-63 on osteoblastide rakuliin, mis pärineb 14-aastase meessoost osteosarkoomiga patsiendi (kaukaaslane) luust. A. Billiau ja tema kolleegid hoiustasid selle rakuliini 1977. aastal.
- MG-63 rakuliinil on fibroblastidele omane morfoloogia.
- Inimese osteosarkoomi rakud (MG-63) on hüpotriploidsed. Nende rakkude modaalne kromosoomide arv on 66, mis esineb ligikaudu 44% rakupopulatsioonist. Peaaegu 2% rakupopulatsioonist on täheldatud ka kõrgemaid ploidsusi. Lisaks on kõigis rakkudes arvukalt 18–19 markerkromosoomi.
Teave MG-63 rakuliini kasvatamise kohta
Oluline teave rakuliini kasvatamise nõuete kohta võib teie tööd oluliselt hõlbustada. Artikli selles osas on loetletud kõik MG-63 rakkude kasvatamiseks ja hooldamiseks olulised punktid. Siit saate teada: Milline on MG-63 rakkude kahekordistumisaeg? Millist kasvukeskkonda kasutatakse MG-63 rakkude jaoks? Milline on MG-63 rakkude külvitihedus?
MG-63 rakkude kasvatamise põhipunktid
Kahekordistumisaeg
MG-63 rakkude populatsiooni kahekordistumisaeg on 28–38 tundi, sõltuvalt kasvatustingimustest.
Kasvamisomadused
MG-63 on adhesiivne rakuliin.
Istutustihedus
MG-63 rakkude puhul soovitatakse rakutihedust 1 × 10⁴ rakku/cm². Adherentseid rakke pestakse 1× fosfaadipuhverlahusega (PBS), millest on eemaldatud magneesium ja kaltsium. Seejärel inkubeeritakse neid rakke dissotsiatsioonilahusega (Accutase), lisatakse värsket kasvatuskeskkonda ja tsentrifuugitakse. Kogutud rakupellet resuspendeeritakse värskes kasvukeskkonnas ja jaotatakse uude kolbi kasvatamiseks.
Kasvatuskeskkond
MG-63 rakkude kasvatamiseks kasutatakse DMEM- või Ham's F12-kasvatuskeskkonda. Nende kasvukeskkonna koostist võib optimaalse rakkude kasvu tagamiseks täiendada 5% loote veise seerumiga (FBS), 3,0 g/l glükoosiga, 2,5 mM L-glutamiiniga ja 1,2 g/l NaHCO3-ga. Kasvukeskkond tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
Kasvatustingimused
MG-63 rakkude kasvatamiseks on vaja niisutatud inkubaatorit temperatuuril 37 °C ja 5% CO₂ varustust.
Säilitamine
Nende osteoblastilaadsete rakkude eluvõimelisuse säilitamiseks võib neid hoida vedela lämmastiku aurufaasis või temperatuuril alla -150 °C.
Külmutamisprotsess ja kasvukeskkond
MG-63 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF kasvatuskeskkonda. Üldiselt soovitatakse aeglast külmutamisprotsessi, et vältida rakkude šokki ja kaitsta nende eluvõimelisust.
Sulatusprotsess
Külmutatud rakke inkubeeritakse 40–60 sekundit eelsoojendatud veevannis (37 kraadi Celsiuse järgi). Rakud suspendeeritakse uuesti värskes kasvukeskkonnas ja valatakse uude kolbi. 24-tunnise inkubeerimise järel vahetatakse kasvukeskkond välja, et eemaldada külmutamisel kasutatud keskkonnakomponendid.
Bioloogilise ohutuse tase
MG-63 kultuuride käitlemiseks ja hooldamiseks on vajalikud 1. bioloogilise ohutuse taseme laboritingimused.
- MG-63 rakuliin: eelised ja puudused
- MG-63 rakuliini kasvatamise juhised
- Tellige oma MG-63 rakud juba täna
- MG-63 rakkude rakendused
- MG-63 rakke käsitlevad teadusartiklid
- MG-63 rakuliini ressursid: protokollid, videod ja muud
- Korduma kippuvad küsimused MG-63 rakkude kohta
- Viited
- Korduma kippuvad küsimused
MG-63 rakuliin: eelised ja puudused
MG-63 on laialdaselt kasutatav osteoblastide rakuliin. Sellel on mitmeid eeliseid ja puudusi. Siinkohal toome välja mõned MG-63 rakuliini peamised eelised ja puudused.
Eelised
MG-63 rakkude eelised on järgmised:
-
Osteoblastidele omased omadused
MG-63 rakuliinil on osteoblastidele omased omadused, mistõttu sobib see luuga seotud protsesside ja haiguste uurimiseks. Seda saab kasutada ka rakkude adhesiiooni, proliferatsiooni ja eluvõimelisuse uurimiseks titaanipindadel [1].
-
Transfektsioonivõime
MG-63 rakke kasutatakse laialdaselt transfektsiooniuuringutes, mis võimaldab uurida geenide ekspressiooni, funktsiooni ja rakulisi protsesse.
-
Kõrge interferooni tootmine
MG-63 rakud on võimelised tootma suures koguses interferooni. Tsükloheksimiidi, polüinosiinhappe-polütsütidüülhappe ja aktinomütsiini toimel suudavad need anda 3,7 korda suurema interferooni saagise cm² kohta kui diploidsed fibroblastid [2].
Puudused
MG-63 B-rakkudega seotud puudused on järgmised:
-
Heterogeensus
MG-63 rakud on rakupopulatsiooni piires heterogeensed, mis võib mõjutada tulemuste korratavust.
-
Kasvajarakuliin
MG-63 on vähirakkude liin ja ei pruugi täielikult kajastada normaalrakkude käitumist ja füsioloogiat, mis piirab selle kasutamist teatud laborikatsetes.
Tellige oma MG-63 rakud juba täna
MG-63-rakkude rakendused
MG-63 rakud on suurepärane uurimisvahend. Need pakuvad teadusuuringute valdkonnas palju paljulubavaid rakendusi. Siin on loetletud mõned MG-63 rakkude peamised uurimisrakendused.
- Luudega seotud protsesside/haiguste uurimine: MG-63 rakud on osteoblastidele sarnased (luud moodustavad) rakud. Seetõttu kasutatakse neid laialdaselt luuhaiguste ja rakuliste protsesside, sealhulgas arengu, diferentseerumise ja mineraliseerumise uurimiseks. Lisaks kasutatakse neid laialdaselt luu paranemist soodustavate ravimite sõelumiseks. Uuringus kasutati MG-63 rakke, et uurida Scutellaria baicalensis'est rohelise sünteesi teel saadud tsinkoksiidi nanokübemete terapeutilist potentsiaali luurakkude proliferatsiooni, mineraliseerumise ja diferentseerumise suhtes [3].
- Vähktõve uurimine: MG-63 rakke kasutatakse laialdaselt vähktõve uurimisel. Mitmes uuringus on neid osteosarkoomi rakke kasutatud vähktõve signaaliteede mõistmiseks ning ravimite tsütotoksilise ja terapeutilise potentsiaali hindamiseks. 2019. aastal läbi viidud uuringus uuriti loodusliku ühendi tomentosini kasvajavastaseid omadusi, kasutades MG-63 rakke. Tulemused näitasid, et tomentosin avaldab vähivastast toimet, käivitades rakusisese reaktiivsete hapnikuühendite (ROS) tootmise [4].
MG-63 rakke käsitlevad teadusartiklid
Allpool on toodud mõned teaduspublikatsioonid, milles käsitletakse osteoblastilaadset rakuliini MG-63.
miR-192 suurendab metotreksaadi tundlikkust MG-63 osteosarkoomi vähirakkude suhtes
See artikkel avaldati 2020. aastal ajakirjas „Pathology – Research and Practice”. Selles uuringus kasutati MG-63 rakke, et uurida osteosarkoomi vähirakkude (MG-63) ravimresistentsusega seotud molekulaarseid mehhanisme. Tulemused näitasid, et miRNA-192 võib olla kasulik sihtmärk metotreksaadi ravimresistentsuse ületamisel osteosarkoomi puhul.
Käesolev uurimus on avaldatud ajakirjas „Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology“ (2020). Uuringus kirjeldati Rehmanniae Radix’ist rohelise sünteesi teel saadud tsinkoksiidi nanokübemete (ZnONPs) vähivastast potentsiaali luuvähirakkude (MG-63) suhtes.
See teadusartikkel avaldati 2021. aastal ajakirjas „Materials Science and Engineering“. Uuringus tutvustati Scutellaria baicalensis’est biosünteesitud tsinkoksiidi nanokübemete luu paranemist soodustavaid omadusi, kasutades MG-63 rakuliini.
See uuring avaldati 2021. aastal ajakirjas „Onco Targets and Therapy“. Uuringus tõestati kurkumiini ühendi kasvajavastaseid omadusi osteosarkoomi rakkude suhtes. Ühend avaldas neid terapeutilisi toimeid, inaktiveerides p-JAK2/p-STAT3 vähisignaalitee.
See uurimus avaldati 2018. aastal ajakirjas „International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science“. Uuringus leiti, et bioväljaga töödeldud D3-vitamiin mõjutab positiivselt luurakkude proliferatsiooni, küpsemist ja diferentseerumist ning parandab luu tervise näitajaid.
MG-63 rakuliini alased materjalid: protokollid, videod ja muud
MG-63 rakuliini kohta on saadaval mitmed materjalid, milles selgitatakse selle rakukultiveerimise ja transfektsiooni protokolle.
- MG-63 rakkude transfektsioon: selles videos selgitatakse põhjalikult MG-63 rakkude transfektsiooniprotokolli.
- Adherentrakkude passaažimine: See video juhendab adherentrakkude subkultiveerimist või passaažimist. See aitab teil õppida rakukultuuri põhiprotokolle.
Järgmine link pakub teile MG-63 rakkude kasvatamise protokolli.
- MG-63 rakkude kasvatamine: sellel veebilehel on esitatud lihtne ja üksikasjalik protokoll MG-63 rakuliini subkultiveerimiseks või jagamiseks.
Korduma kippuvad küsimused MG-63 rakkude kohta
MG-63 rakud on inimese osteosarkoomi rakuliin, mida kasutatakse tavaliselt teadusuuringutes luubioloogia, vähibioloogia ja ravimite testimise uurimiseks. Need on saadud 14-aastase mehe osteosarkoomist ja neil on osteoblastilistele rakkudele iseloomulikud omadused.
MG-63 rakud pärinevad inimese osteosarkoomist, mis on üks luuvähi tüüp. Täpsemalt on need saadud inimese patsiendi pahaloomulisest luukoes.
MG-63 rakkude kahekordistumisaeg jääb tavaliselt vahemikku 24-36 tundi, sõltuvalt kasvatustingimustest ja kasutatavast söötmest.
MG-63 rakkudel on mitmete kromosoomianomaaliatega ebanormaalne karüotüüp. See hõlmab nii numbrilisi kui ka struktuurilisi kõrvalekaldeid, mis on iseloomulikud vähirakkudele.
Kui MG-63 rakud on osteosarkoomirakud, siis inimese fibroblastid pärinevad sidekoes ja osalevad haavade paranemises ja rakuvälise maatriksi moodustamises. Mõlemat rakutüüpi kasutatakse rakkude koostoimete uuringutes, eriti luu- ja koetehnoloogia kontekstis.
MG-63 rakkudel on tugevad rakkude kinnitumisomadused, mistõttu sobivad nad uuringuteks, mis hõlmavad rakkude adhesiivsust, levikut ja koostoimet erinevate biomaterjalidega. Need omadused on olulised osteoblastide funktsioonide mõistmiseks ja luuimplantaatide optimeerimiseks.
MG-63 rakke kasutatakse teadusuuringutes, et uurida adenosiini rolli luu ainevahetuses. Nende rakkude adenosiiniretseptorid vahendavad erinevaid funktsioone, sealhulgas luu moodustumist ja resorptsiooni, mistõttu on need väärtuslikud luu ainevahetuse molekulaarmehhanismide uurimiseks.
Amelogeniini, hammaste emaili moodustumiseks olulist valku, saab uurida ka MG-63 rakkude abil, et uurida selle mõju luurakkudele ja selle võimalikku rolli luukoe konstrueerimisel ja regenereerimisel.
MG-63 rakud on olulised osseointegratsiooni optimeerimise uurimisel, mis on luukoe integreerumise protsess implantaadiga. Teadlased kasutavad neid rakke uute materjalide ja pinna modifikatsioonide katsetamiseks, mis võivad suurendada implantaatide integreerumist ja stabiilsust.
Fenotüübiline stabiilsus tähendab rakkude omaduste püsivust aja jooksul ja mitme läbimise ajal. MG-63 rakkude puhul on fenotüübi stabiilsuse säilitamine oluline, et tagada usaldusväärsed ja korratavad tulemused katsetes.
MG-63 rakud on mudeliks osteoblastide funktsioonide, sealhulgas luu moodustumise ja mineraliseerumise, ning osteosarkoomi patofüsioloogia uurimiseks, andes ülevaate vähi progresseerumisest ja võimalikest ravieesmärkidest.
Jah, MG-63 rakke saab kasutada inimese interferoonide mõju uurimiseks luuvähirakkudele, sealhulgas nende viirusevastaseid, antiproliferatiivseid ja immunomoduleerivaid omadusi, mis aitab kaasa vähi immunoteraapia mõistmisele.
Viited
- Wandiyanto, J.V. jt., Osteoblastilaadsete MG-63 rakkude saatus eelnevalt nakatatud bakteritsiidsetel nanostruktureeritud titaanipindadel. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A. jt., Inimese interferoon: masstootmine äsja loodud rakuliinis MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): lk 11–5.
- Tang, Y. jt., Scutellaria baicalensis’est saadud tsinkoksiidi nanokübemete osteogeenne diferentseerumine ja mineraliseerumispotentsiaal inimese osteoblastilaadsetel MG-63 rakkudel. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: lk 111656.
- Lee, C.M. jt., Tomentosiinil on inimese osteosarkoomi MG-63 rakkudes antikartsinogeenne toime rakusiseste reaktiivsete hapnikuühendite indutseerimise kaudu. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): lk 1508.