Caco-2 rakud
430,00 €*
Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 6 rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 106 rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).
Sissejuhatus Caco-2 rakkudesse
| Kirjeldus | Caco-2 rakud on inimese soolebarjääri täiustatud in vitro mudeliks, peamiselt tänu nende diferentseerumisele rakumonokihiks, mis sarnaneb väga täpselt peensoolt vooderdavate enterotsüütidega. Caco2 rakuliini kasvatamisel polükarbonaatfiltritega koekultuurifiltri sisestustel toimub Caco-2 rakkude spontaanne diferentseerumine. Caco2 rakkude diferentseerumise tulemuseks on spetsialiseerunud rakutüüpide ekspressioon koos mikrovillide, ensüümide ja transporteritega, mis on paralleelselt in vivo situatsioonis esinevate keeruliste omaduste ja mehhanismidega. Soolestiku imendumise uuringute mudelite kontekstis on Caco-2 rakud, mis on saadud inimese kolorektaalse adenokartsinoomi patsiendilt, olulised tänu nende võimele arendada kõrgeid TEER väärtusi, mis tähistab intaktseid tihedaid ühendusi ja epiteelibarjääri funktsiooni. Need omadused on olulised selliste analüüside jaoks nagu kolesterooli väljavooluproov ja rakutranspordi uuringud, sealhulgas lipiidide nanoosakeste liikumine ja valkude koostoimete tuvastamine. Caco-2 rakud on soolestiku imendumise uuringutes keskse tähtsusega, kuna nad pakuvad usaldusväärset in vitro lähenemist soolestiku epiteelile. Soolestiku enterotsüüte jäljendavad rakud hõlbustavad ravimite suukaudse imendumise analüüsi, simuleerides soolebarjääri. Teadlased kasutavad Caco-2 rakke, et ennustada, kuidas ained läbivad soole limaskesta, mis on oluline suukaudsete ravimite farmakokineetilise profiili koostamisel. Lisaks on need rakud peamine vahend kolesterooli soolestiku omastamise, homöostaasi ja transpordi uurimisel, mis on olulised protsessid lipiidide metabolismi ja sellega seotud haiguste mõistmiseks. Caco-2 rakud on jätkuvalt käärsoole kartsinoomi ja toksikoloogia uuringute nurgakivi, mitte ainult nende tähtsuse tõttu inimese seedetrakti uuringutes, vaid ka nende rolli tõttu üksikasjaliku ülevaate andmisel sapiteede, ksenobiootikumide metabolismi kohta käärsoolestikus, vähi ja toksikoloogia uuringutes. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Colon |
| Haigus | Adenokartsinoom |
| Rakendused | Seedetrakti (seedetrakti) mudel, trans-epiteliaalse/endoteliaalse elektrilise resistentsuse (TEER) mõõtmine. Caco-2 rakkudel tekivad kõrged TEER-väärtused kuni 2000 cm2 (mõõdetuna CLS-ga, kasutades CellZscope'i, nanoAnalytics, Münster, Saksamaa). |
| Sünonüümid | CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II |
Üksikasjad
| Vanus | 72 aastat |
|---|---|
| Sugu | Mees |
| Etniline kuuluvus | Kaukaasia |
| Morfoloogia | Epiteelilaadsed |
| Kasvuomadused | Kinnipeetav |
Dokumentatsioon
| Tsitaat | CaCo-2 (Cytioni katalooginumber 300137) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0025 |
Caco-2 rakuliini geneetiline koostis
| Väljendatud retseptorid | Kuumastabiilne enterotoksiin (Sta, E. coli), epidermise kasvufaktor (EGF), retiinhapet siduv valk I ja retinooli siduv valk II, keratiin positiivne. |
|---|---|
| Antigeeni ekspressioon | Veregrupp O, Rh+, HLA II klassi negatiivne |
| Isoensüümid | Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B. |
| Tumorigeeniline | Jah, alasti hiirtel. Moodustavad mõõdukalt diferentseerunud adenokartsinoome, mis vastavad koloniidi primaarsele (II aste) |
| Viirusresistentsus | Inimese immuunpuudulikkuse viirus (HIV, LAV) |
| Ploidsuse staatus | (P14), hüpertetraploidne |
| MSI staatus | Stabiilne (MSS) |
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Aja kahekordistamine | 60-70 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda. |
| Külvi tihedus | 1 x 104 rakku/cm2 annab umbes 4 päeva jooksul 90% konfluentse monokihi. |
| Taastumisjärgne taastumine | Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul. |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Kolvi katmine | Optimaalse kinnitumise ja elujõulisuse tagamiseks pärast sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud koldeid või plaate. |
| Külmutamise protseduur | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|---|
| HLA alleles |
A*: '02:01:01
B*: '15:01:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:04:01
DQA1*: '03:01:01
DQB1*: '03:02:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:03:02
|
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 300137-170625 | Analüüsitunnistus | 18. Aug. 2025 | 300137 |
| 300137-220424 | Analüüsitunnistus | 23. May. 2025 | 300137 |
Materjali üleandmise leping
Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.
Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.
Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.