CTX-rakud

CTX (tuntud ka kui CTX0E03) on tingimuslikult surematuks muudetud inimese närvirakkude tüvirakuliin, mis on saadud esimese trimestri inimese loote ajukoore neuroepiteelist. Liin loodi c-mycER^TAM-fusioonitransgeeni retroviirusliku integratsiooni teel, mis soodustab rakkude proliferatsiooni ainult 4-hüdroksütamoksifeeni (4-OHT) juuresolekul. 4-OHT puudumisel ja mitogeenivabas keskkonnas peatuvad CTX0E03 rakkude kasv ja need diferentseeruvad neuroniteks ja astrotsüütideks, säilitades samas multipotentse diferentseerumisvõime. Tüvi on klooniline, omab normaalset inimese kariotüüpi (46,XY) ning on välja töötatud GMP-nõuetele vastavates tingimustes võimaliku kliinilise rakenduse jaoks.

CTX0E03-d on hinnatud isheemilise insuldi prekliinilistes mudelites (MCAo rottide mudel), kus implanteeritud rakud soodustasid sensomotoorse funktsiooni märkimisväärset taastumist. Liin on jõudnud insuldi ravi kliinilistesse uuringutesse. Seda kasutatakse ka in vitro mudelina närvirakkude bioloogia, kortikaalsete neuronite diferentseerumise, Alzheimeri tõve uurimise (Abeta toksilisuse uuringud) ja neurofarmakoloogilise sõelumise jaoks. Tingimuslik immortaliseerimissüsteem muudab CTX0E03 eriti sobivaks ohutus- ja efektiivsusuuringuteks, kuna proliferatsiooni saab peatada, eemaldades 4-OHT enne siirdamist.

CTX0E03-i kasvatatakse DMEM/F12-s, millele on lisatud N2-lisandit, EGF-iga (20 ng/ml) ja FGF-2-ga (20 ng/ml) ning 4-OHT-ga (1 μM) laminiiniga kaetud pindadel 37 °C juures 5% CO₂ keskkonnas. Diferentseerimiseks eemaldatakse kasvufaktorid ja 4-OHT. Liin on klassifitseeritud bioloogilise ohutuse tasemele 1 (Saksamaal GMO-S1 integreeritud c-mycERTAM-transgeeni tõttu). Kasutajad peavad järgima oma jurisdiktsioonis kehtivaid GMO-eeskirju.