CTX-rakud
Üldine teave
| Kirjeldus | CTX (tuntud ka kui CTX0E03) on tingimuslikult surematuks muudetud inimese närvirakkude tüvirakuliin, mis on saadud esimese trimestri inimese loote ajukoore neuroepiteelist. Liin loodi c-mycERTAM-fusioonitransgeeni retroviirusliku integratsiooni teel, mis soodustab rakkude proliferatsiooni ainult 4-hüdroksütamoksifeeni (4-OHT) juuresolekul. 4-OHT puudumisel ja mitogeenivabas keskkonnas peatuvad CTX0E03 rakkude kasv ja need diferentseeruvad neuroniteks ja astrotsüütideks, säilitades samas multipotentse diferentseerumisvõime. Tüvi on klooniline, omab normaalset inimese kariotüüpi (46,XY) ning on välja töötatud GMP-nõuetele vastavates tingimustes võimaliku kliinilise rakenduse jaoks. CTX0E03-d on hinnatud isheemilise insuldi prekliinilistes mudelites (MCAo rottide mudel), kus implanteeritud rakud soodustasid sensomotoorse funktsiooni märkimisväärset taastumist. Liin on jõudnud insuldi ravi kliinilistesse uuringutesse. Seda kasutatakse ka in vitro mudelina närvirakkude bioloogia, kortikaalsete neuronite diferentseerumise, Alzheimeri tõve uurimise (Abeta toksilisuse uuringud) ja neurofarmakoloogilise sõelumise jaoks. Tingimuslik immortaliseerimissüsteem muudab CTX0E03 eriti sobivaks ohutuse ja efektiivsuse uuringuteks, kuna proliferatsiooni saab peatada, eemaldades 4-OHT enne siirdamist. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Aju (ajukoor) |
| Haigus | Normaalne loote ajukoore neuroepiteel; tingimuslikult surematuks muudetud närvirakkude tüvirakuliin |
| Rakendused | Närvirakkude bioloogia; ajukoore neuronite diferentseerumine; insuldiuuringud; neurodegeneratiivsete haiguste modelleerimine; Alzheimeri tõve uuringud; neurofarmakoloogiline sõelumine; rakuteraapia uuringud |
Omadused
| Morfoloogia | Närvirakkudele sarnased tüvirakud (bipolaarsed, piklikud) |
|---|---|
| Raku tüüp | Närvirakkude tüvirakud |
| Kasvuomadused | Kinnituv (laminiiniga kaetud pindadele) |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | CTX (Cytioni katalooginumber 305358) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_C2BI |
| GMOde staatus | GMO-S1: Sisaldab ühekoopia retroviiruslikku c-mycERTAM tingimuslikku immortaliseerimistransgeeni. Proliferatsioon sõltub 4-OHT-st. Ei põhjusta in vivo kasvajate teket. See klassifikatsioon kehtib Saksamaal; teistes riikides võivad eeskirjad erineda. |
Biomolekulaarsed andmed
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS-ga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase, 5 min, 37 °C |
| Aja kahekordistamine | 50-60 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Kui rakud on 70–80% ulatuses konfluentseks kasvanud, eemaldage kasvukeskkond, peske PBS-ga (Ca²⁺/Mg²⁺-vaba), lisage Accutase ja inkubeerige 5–10 minutit 37 °C juures. Neutraliseerige täis keskkonnaga, tsentrifuugige 300 × g juures 5 minutit, suspendeerige uuesti värskes keskkonnas, millele on lisatud 4-OHT, ja külvake uuesti eelnevalt katetud kolbidesse. Enne rakkude külvamist katke kolvid laminiiniga (10 μg/ml PBS-is) 1 tunni jooksul 37 °C juures. |
| Jagatud suhe | 1–3 |
| Külvi tihedus | 1–3 × 10⁴ rakku/cm² |
| Vedeliku uuendamine | Iga 3–5 päeva tagant (sõltuvalt rakkude tihedusest) |
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
Kvaliteedikontroll ja molekulaaranalüüs
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 305358-180526 | Analüüsitunnistus | 03. Jul. 2026 | 305358 |