CHO-FCGR2B rakud
1 900,00 €*
Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 6 rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 106 rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).
Üldine teave
| Kirjeldus | Vastutusest loobumine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hind ligikaudu 6250 eurot. CHO-FCGR2B rakud on rekombinantseid hiina hamstri munasarja (CHO) rakke, mis on konstrueeritud stabiilselt ekspresseerima inimese Fc-gamma retseptorit IIB (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B), madala afiinsusega inhibeerivat retseptorit immunoglobuliini G (IgG) Fc-piirkonna jaoks. FcγRIIB ekspresseerub laialdaselt B-rakkudel, dendriitrakkudel, monotsüütidel, makrofaagidel ja muudel immuunrakkude populatsioonidel, kus see toimib immuunaktiveerimise kriitilise negatiivse regulaatorina. Koos aktiveerivate retseptoritega seondudes värbab FcγRIIB fosfataase oma immunoretseptori türosiinipõhise inhibeeriva motiivi (ITIM) kaudu, pärssides seeläbi antikehade vahendatud immuunvastustes osalevaid allavoolu signaaliteid. FcγRIIB signaalimise häireid on seostatud autoimmuunhaiguste, kroonilise põletiku ja muutunud reaktsioonidega antikehade ravimitele. CHO-FCGR2B rakke kasutatakse laialdaselt terapeutiliste antikehade arendamisel ja immunoloogia uurimisel, et hinnata Fc-vahendatud interaktsioone, retseptori selektiivsust ja inhibeerivaid signaalimismehhanisme. Need rakud toetavad IgG-alagruppide seondumise kvantitatiivset hindamist, Fc-molekuli modifitseerimise strateegiaid, immuunkomplekside interaktsioone ja Fcγ-retseptori signaaliteede antikehast sõltuvat modulatsiooni. Need on eriti väärtuslikud monoklonaalsete antikehade, bispetsiifiliste antikehade, Fc-fusioonvalkude ja glükotehnoloogiliselt muundatud bioloogiliste ravimite sõelumisel, mis on loodud FcγRIIB seondumise muutmiseks. CHO-FCGR2B mudeleid kasutatakse sageli ka voolutsütomeetria analüüsides, retseptori hõivatuse uuringutes, reporteranalüüsides ja suure läbilaskevõimega sõelumisplatvormidel, mille eesmärk on iseloomustada Fc-retseptori spetsiifilisust ja funktsionaalset aktiivsust. |
|---|---|
| Organism | Hiina hamster |
| Kude | Munasarjad |
| Haigus | Hiina hamstri munasarja rakud, mitte-neoplastilised; geneetiliselt muundatud FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) pinnalise ekspressiooni saavutamiseks |
| Rakendused | Antikeha Fc-osa modifitseerimine; inhibeerivate Fc-retseptorite uuringud; ADCP-uuringud; immunoteraapia arendamine; voolutsütomeetria |
Omadused
| Vanus | Täiskasvanud |
|---|---|
| Sugu | Naised |
| Morfoloogia | Epiteelilaadsed |
| Raku tüüp | Munasarja epiteelirakk |
| Kasvuomadused | Kinni jääv/suspensioon |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | CHO-FCGR2B (Cytioni katalooginumber 305982) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A8W4 |
| GMOde staatus | GMO-S1: See CHO-rakuliin sisaldab FCGR2B ekspressioonikassetti, mis võimaldab läbi viia retseptori funktsiooni analüüse. See klassifikatsioon kehtib ainult Saksamaal ja võib mujal erineda. |
Biomolekulaarsed andmed
| Väljendatud retseptorid | FCGR2B/CD32B |
|---|
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | Kinniste kultuuride puhul: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikli number 820400a) Suspensioonikultuuride puhul: CHO kasvukeskkond A (InSCREENeX; InSCREENeXi katalooginumber INS-ME-1039) |
|---|---|
| Täiendused | Kinniste kultuuride puhul: Täiendage keskkonda 5% FBS-ga. Lisage genetitsiini (G418-Sulfat), et saavutada lõppkontsentratsioon 0,5 mg/ml. |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Kinniste kultuuride puhul: Trypsin-EDTA |
| Aja kahekordistamine | u. 14–16 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37°C 5-10 minutit või kuni rakud eralduvad. Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kultuuranumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant. |
| Jagatud suhe | 1–5 |
| Külvi tihedus | 2 kuni 5 x 104 rakku/cm2 |
| Vedeliku uuendamine | 2 kuni 3 korda nädalas |
| Taastumisjärgne taastumine | Pärast sulatamist jagage rakud 1:2 kuni 1:3 T25 kolvidesse ja laske rakkudel taastuda külmumisprotsessist ja adhereeruda (adhereeruvate kultuuride puhul) vähemalt 24 tundi. |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|