CHO-EPCAM-rakud
1 900,00 €*
Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 6 rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 106 rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).
Üldine teave
| Kirjeldus | Vastutuse välistamine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hind ligikaudu 6250 eurot. CHO-EPCAM-rakud on rekombinantsed hiina hamstri munasarja (CHO) rakud, mis on loodud stabiilselt ekspresseerima inimese epiteelirakkude adhesiivmolekuli (EpCAM; CD326/TACSTD1) – transmembraanset glükoproteiini, mida ekspresseeritakse laialdaselt epiteelikudedes ja mille ekspressioon on paljudes epiteelist pärinevates vähivormides tugevalt ülesreguleeritud. EpCAM osaleb rakkudevahelises adhesiivis, proliferatsioonis, diferentseerumises ning signaaliteedes, mis on seotud tuumori progresseerumise ja metastaasidega. Stabiilseid CHO-EPCAM-mudeleid luuakse tavaliselt selleks, et tagada kontrollitud ja reprodutseeritav EpCAM-i pinnal ekspressioon, mida kasutatakse seondumise, sihtmärgistamise ja funktsionaalsete analüüside läbiviimisel, mis hõlmavad terapeutilisi antikehi ja geneetiliselt muundatud immuunrakkude ravi. CHO-EPCAM-rakke kasutatakse laialdaselt onkoloogias ja translatsioonilises uurimistöös anti-EpCAM-monoklonaalsete antikehade, antikeha-ravimkonjugaatide, bispetsiifiliste T-rakkude sidujate ning CAR-T- või CAR-NK-rakkude ravimeetodite arendamiseks ja iseloomustamiseks. Mudel on eriti kasulik antigeenispetsiifilise seondumisafiinsuse, retseptori hõivatuse, internaliseerumise kineetika, tsütotoksilisuse ja immuunsünapsi moodustumise hindamiseks. Lisaks toetavad need rakud voolutsütomeetria analüüside arendamist, suure läbilaskevõimega sõelumist ning EpCAM-ile suunatud kujutamisainete või diagnostiliste platvormide valideerimist. Kuna CHO-rakud näitavad stabiilseid kasvutunnuseid ja paljude inimese epiteelmarkerite minimaalse endogeense ekspressiooni, pakuvad nad ühtlast tausta rekombinantse antigeeni ekspressiooni uuringuteks. |
|---|---|
| Organism | Hiina hamster |
| Kude | Munasarjad |
| Haigus | Hiina hamstri munasarja rakud, mitte-neoplastilised; geneetiliselt muundatud EpCAM (CD326) pinnalise ekspressiooni saavutamiseks |
| Rakendused | Antikehade sõelumine; EpCAM-ile suunatud ravi väljatöötamine; ADCC/CDC-analüüsid; epiteelkasvajate uurimine; voolutsütomeetria |
Omadused
| Vanus | Täiskasvanud |
|---|---|
| Sugu | Naised |
| Morfoloogia | Epiteelilaadsed |
| Raku tüüp | Munasarja epiteelirakk |
| Kasvuomadused | Kinni jääv/suspensioon |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | CHO-EPCAM (Cytioni katalooginumber 305974) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_D2TL |
| GMOde staatus | GMO-S1: See CHO-rakuliin sisaldab EpCAM-i ekspressioonikassetti, mis võimaldab läbi viia retseptori funktsiooni analüüse. See klassifikatsioon kehtib ainult Saksamaal ja võib mujal erineda. |
Biomolekulaarsed andmed
| Väljendatud retseptorid | EpCAM (CD326) |
|---|
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | Kinniste kultuuride puhul: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikli number 820400a) Suspensioonikultuuride puhul: CHO kasvukeskkond A (InSCREENeX; InSCREENeXi katalooginumber INS-ME-1039) |
|---|---|
| Täiendused | Kinniste kultuuride puhul: Täiendage keskkonda 5% FBS-ga. Lisage genetitsiini (G418-Sulfat), et saavutada lõppkontsentratsioon 0,5 mg/ml. |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Kinniste kultuuride puhul: Trypsin-EDTA |
| Aja kahekordistamine | u. 14–16 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37°C 5-10 minutit või kuni rakud eralduvad. Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kultuuranumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant. |
| Jagatud suhe | 1–5 |
| Külvi tihedus | 2 kuni 5 x 104 rakku/cm2 |
| Vedeliku uuendamine | 2 kuni 3 korda nädalas |
| Taastumisjärgne taastumine | Pärast sulatamist jagage rakud 1:2 kuni 1:3 T25 kolvidesse ja laske rakkudel taastuda külmumisprotsessist ja adhereeruda (adhereeruvate kultuuride puhul) vähemalt 24 tundi. |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll ja molekulaaranalüüs
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|
Materjali üleandmise leping
Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.
Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.
Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.