CHO-EGFR-rakud

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 900,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 305977

Ohutuskaart

Toote leht

Kirjeldus	Vastutusest loobumine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hind ligikaudu 6250 eurot. Kui esindate äriühingut või ei ole kindel, milline kategooria teie puhul kehtib, palun võtke meiega ühendust. CHO-EGFR-rakud on rekombinantsed hiina hamstri munasarja (CHO) rakud, mis on loodud stabiilselt ekspresseerima inimese epidermaalse kasvufaktori retseptorit (EGFR/ERBB1/HER1), mis on ErbB-perekonda kuuluv retseptor-türosiinkinaas. EGFR reguleerib olulisi rakulisi protsesse, sealhulgas proliferatsiooni, ellujäämist, migratsiooni ja diferentseerumist, aktiveerides allavoolu signaaliteid, nagu MAPK/ERK, PI3K/AKT ja JAK/STAT. EGFR-i ebanormaalne ekspressioon, amplifikatsioon või mutatsioon on sageli seotud mitmete tahkete kasvajatega, sealhulgas mitteväikerakk-kopsuvähiga, kolorektaalvähiga, glioblastoomiga ning pea- ja kaelapiirkonna lamerakk-kartsinoomiga. Stabiilsed CHO-EGFR-mudelid pakuvad kontrollitud platvormi retseptori bioloogia ja terapeutilise sihtmärgistamise uurimiseks. CHO-EGFR-rakke kasutatakse laialdaselt onkoloogilistes uuringutes ja bioloogiliste ravimite arendamisel anti-EGFR-monoklonaalsete antikehade, türosiinkinaasi inhibiitorite, bispetsiifiliste antikehade, antikeha-ravimkonjugaatide ja geneetiliselt muundatud immuunrakkude ravimeetodite iseloomustamiseks. Need rakud toetavad ligandi seondumise, retseptori aktiveerimise, internaliseerimise, fosforüleerimise staatuse, allavoolu signaalimise ja terapeutilise blokeerimise kvantitatiivset hindamist. Neid kasutatakse ka laialdaselt voolutsütomeetria analüüsides, retseptori hõivatuse uuringutes, suure läbilaskevõimega sõelumisel ja toime tugevuse testimise töövoogudes. Kuna CHO-rakud pakuvad tugevaid kasvukarakteristikuid ja suhteliselt madalat inimese retseptorisüsteemide endogeenset ekspressiooni, pakuvad nad reprodutseeritavat tausta rekombinantse EGFR-i ekspressiooniks ja standardiseeritud analüüside arendamiseks.
Organism	Hiina hamster
Kude	Munasarjad
Haigus	Hiina hamstri munasarja rakud, mitte-neoplastilised; geneetiliselt muundatud EGFR-i pinnalise ekspressiooni saavutamiseks
Rakendused	Antikehade sõelumine; EGFR-ile suunatud ravi arendamine; ADCC/CDC-analüüsid; kopsu- ja kolorektaalvähi uurimine; voolutsütomeetria

Vanus	Täiskasvanud
Sugu	Naised
Morfoloogia	Epiteelilaadsed
Raku tüüp	Munasarja epiteelirakk
Kasvuomadused	Kinni jääv/suspensioon

Tsitaat	CHO-EGFR (Cytioni katalooginumber 305977)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	10029
CellosaurusAccession	CVCL_A8W3
GMOde staatus	GMO-S1: See CHO-rakuliin sisaldab EGFR-i ekspressioonikassetti, mis võimaldab läbi viia retseptori funktsiooni analüüse. See klassifikatsioon kehtib ainult Saksamaal ja võib mujal erineda.

Pinna antigeenid	EGFR (HER1/ErbB1/CD340)

Kultuurikeskkond	Kinniste kultuuride puhul: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikli number 820400a) Suspensioonikultuuride puhul: CHO kasvukeskkond A (InSCREENeX; InSCREENeXi katalooginumber INS-ME-1039)
Täiendused	Kinniste kultuuride puhul: Täiendage keskkonda 5% FBS-ga. Lisage genetitsiini (G418-Sulfat), et saavutada lõppkontsentratsioon 0,5 mg/ml.
Dissotsiatsioonireaktiiv	Kinniste kultuuride puhul: Trypsin-EDTA
Aja kahekordistamine	u. 14–16 tundi
Subkultuuride kasvatamine	Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37°C 5-10 minutit või kuni rakud eralduvad. Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kultuuranumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%_CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant.
Jagatud suhe	1–5
Külvi tihedus	2 kuni 5 x 10⁴ ^rakku/cm²
Vedeliku uuendamine	2 kuni 3 korda nädalas
Taastumisjärgne taastumine	Pärast sulatamist jagage rakud 1:2 kuni 1:3 T25 kolvidesse ja laske rakkudel taastuda külmumisprotsessist ja adhereeruda (adhereeruvate kultuuride puhul) vähemalt 24 tundi.
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

CHO-EGFR-rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA