Células NRK-EGFP-H2B
800,00 €*
Los productos se envían congelados en hielo seco en criotubos. Cada criotubo contiene normalmente 3 × 10 6 células para líneas adherentes o 5 × 106 células para líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).
Información general
| Descripción | La línea celular NRK-EGFP-H2B es una variante modificada genéticamente de las células normales de riñón de rata (NRK) que expresa de forma estable la proteína fluorescente verde mejorada (EGFP) fusionada a la histona H2B. Esta modificación permite la visualización en tiempo real de la cromatina y la dinámica nuclear, lo que convierte a esta línea celular en una herramienta inestimable para estudiar la progresión del ciclo celular, la mitosis y la organización de la cromatina. La expresión estable de EGFP-H2B proporciona una señal fluorescente brillante y consistente, facilitando la obtención de imágenes de alta resolución de células vivas y permitiendo a los investigadores monitorizar los eventos nucleares con gran precisión. Las células NRK, procedentes del tejido renal de una rata adulta, se utilizan ampliamente en biología celular debido a sus robustas características de crecimiento y a sus comportamientos fisiológicos bien documentados. La introducción de la proteína de fusión EGFP-H2B en estas células no altera significativamente su crecimiento o morfología, lo que permite condiciones experimentales fiables y reproducibles. Esta línea celular es especialmente útil en estudios de biología celular renal, respuestas celulares al estrés y mecanismos de carcinogénesis, dado el papel del riñón en el filtrado de la sangre y la excreción de residuos. Además, las capacidades de fluorescencia de las células NRK-EGFP-H2B pueden aprovecharse en aplicaciones de cribado de fármacos para observar en tiempo real los efectos de éstos sobre la proliferación celular y la morfología nuclear. |
|---|---|
| Organismo | Rata |
| Tejido | Riñón |
| Sinónimos | NRK EGFP-H2B |
Características
| Raza/Subespecie | OsborneMendel |
|---|---|
| Morfología | Células similares a fibroblastos con forma fusiforme |
| Propiedades de crecimiento | Monocapa, adherente |
Datos reglamentarios
| Cita | NRK-EGFP-H2B (número de catálogo de Cytion 500724) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| CellosaurusAccesión | CVCL_AV92 |
| Depositante | Laboratorio Ellenberg (EMBL) |
Datos biomoleculares
| Receptores expresados | Factor de crecimiento epidérmico (EGF), actividad estimulante de la multiplicación (MSA) |
|---|---|
| Expresión de proteínas | EGFP-H2B: Localización/Gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR |
| Productos | Factor de crecimiento epidérmico (EGF), actividad estimulante de la multiplicación (MSA), CMV Promotor Histona H2B, Neomicina, Fosfotransferasa |
Manejo de
| Medio de cultivo | DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Suplementar el medio con 10% FBS, 0,5 mg/mL G418 |
| Reactivo de disociación | Accutase |
| Subcultivo | Deseche el medio antiguo y lave las células con PBS. Añadir una solución de tripsina al 0,025%/0,02% EDTA recién preparada y calentada a 37 grados Celsius y esperar hasta que las células se desprendan, lo que suele tardar unos 5 minutos. Neutralizar la tripsina añadiendo medio fresco, luego transferir la mezcla celular a un tubo y centrifugar. Tras la centrifugación, eliminar el sobrenadante, resuspender el sedimento celular en medio de cultivo fresco y transferir la suspensión a nuevos matraces. Incorporar G418 al medio de cultivo para alcanzar una concentración final de 0,5 mg/ml |
| Ratio de división | Se recomienda una proporción de 1:3 a 1:4 |
| Densidad de siembra | De 2 a 4 x 104 células/cm2 |
| Renovación de fluidos | de 2 a 3 veces por semana |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido. |
| Descongelación y cultivo de células |
|
| Atmósfera de incubación | 37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada. |
| Recubrimiento de matraces | Para una fijación y viabilidad óptimas tras la descongelación, recomendamos utilizar matraces o placas recubiertos de colágeno. |
| Procedimiento de congelación | Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido. |
Control de calidad / Perfil genético / HLA
| Esterilidad | La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia. Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias. |
|---|
Acuerdo con terceros
Tenga en cuenta que esta línea celular no está disponible bajo un ATM estándar de Cytion, ya que requiere un acuerdo de terceros y/o está sujeta a negociación con el licenciante original.-
Productos necesarios
Productos necesarios
Medio de congelación CM-1 - 50 mlVariantes de medios de crioconservación: 50 mlEl medio de congelación CM-1 de Cytion es un medio de criopreservación de última generación diseñado para garantizar el máximo nivel de viabilidad y funcionalidad celular tras la descongelación. Este medio versátil es adecuado para un amplio espectro de tipos celulares, incluyendo células humanas y animales, lo que lo convierte en una herramienta esencial para diversas aplicaciones de investigación. Formulado con una combinación meticulosamente equilibrada de crioprotectores y nutrientes esenciales, Freeze Medium CM-1 minimiza la formación de cristales de hielo y el estrés celular durante el proceso de congelación, preservando así la integridad celular.
Las principales características de Freeze Medium CM-1 incluyen:
Amplia compatibilidad: Eficaz para una amplia gama de tipos celulares, incluyendo células primarias, células madre y líneas celulares establecidas.
Alta Viabilidad: Optimizado para maximizar la recuperación y viabilidad celular tras la descongelación, garantizando resultados experimentales fiables.
Listo para usar: Cómodamente preparadas y esterilizadas para su aplicación inmediata, reduciendo el tiempo de preparación y el riesgo de contaminación.
Estabilidad mejorada: Mantiene un rendimiento constante en condiciones de criopreservación estándar, garantizando resultados reproducibles.
Larga vida útil: CM-1 es un medio de criopreservación que contiene suero, listo para usar y que puede almacenarse en el frigorífico hasta un año.
Uso de CM-1 para congelar células
Para utilizar CM-1 para congelar células tanto adherentes como en suspensión, siga estos pasos
Para células adherentes, lavarlas y disociarlas del sustrato de cultivo. Para células en suspensión, proceder directamente al paso siguiente.
Contar las células para asegurarse de que tienen la concentración adecuada.
Centrifugar las células para granularlas y, a continuación, resuspenderlas en medio de congelación CM-1.
Transfiera las células resuspendidas a crioviales.
Utilizar un método de congelación lenta antes de transferir las células al almacenamiento a largo plazo
Método
Descripción
Pasos
❄️
Congelación manual
Un método paso a paso que implica la reducción gradual de la temperatura para garantizar la viabilidad celular
1️⃣ Colocar las células en medio de congelación en un congelador a 4°C durante 40 minutos.
2️⃣ Transferir a un congelador a -80°C durante 24 horas.
3️⃣ Almacenar las células en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo
❄️
Utilización de Mr. Frosty
Un práctico dispositivo que permite velocidades de congelación controladas sin energía eléctrica
1️⃣ Preparar las células en crioviales con medio de congelación.
2️⃣ Colocar los crioviales en el contenedor Mr. Frosty.
3️⃣ Almacenar a -80°C durante 24 horas antes de transferir al nitrógeno líquido
❄️
Congelador de velocidad controlada
Congelador de alta precisión de Thermo Fisher u otros fabricantes diseñado para la reducción controlada de la temperatura
1️⃣ Programar el aparato para que disminuya gradualmente la temperatura.
2️⃣ Colocar las células preparadas en el congelador.
3️⃣ Tras el ciclo de congelación, transfiera las células a nitrógeno líquido
Almacenar los crioviales a temperaturas inferiores a -130°C o en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo.
Ingredientes
Contiene FBS, DMSO, glucosa, sales
Capacidad tampón: pH = 7,2 a 7,6
El Medio de Congelación CM-1 de Cytion ofrece una solución fiable para la criopreservación, asegurando una alta viabilidad celular y funcionalidad post-descongelación para una amplia gama de aplicaciones de investigación.59,00 €*DMEM, w: 4,5 g/L Glucosa, w: 4 mM L-Glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Piruvato sódicoDMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) es un medio basal muy versátil y ampliamente utilizado, diseñado para favorecer el crecimiento de una amplia gama de células de mamífero en la investigación biológica. Es un medio ideal para el cultivo de fibroblastos primarios, neuronas, células gliales, HUVEC, células musculares lisas, así como líneas celulares populares como HeLa, 293, Cos-7 y PC-12.
Lo que diferencia al DMEM de otros medios es su composición única. Contiene una concentración de aminoácidos y vitaminas cuatro veces superior a la del Medio Esencial Mínimo original de Eagle. Desarrollado inicialmente con glucosa baja (1 g/L) y piruvato sódico, el DMEM se emplea frecuentemente con niveles de glucosa más altos, con o sin piruvato sódico. En particular, el DMEM no contiene proteínas, lípidos ni factores de crecimiento, por lo que es necesario complementarlo. Para lograr un crecimiento óptimo, un enfoque común es complementar DMEM con 10% de suero fetal bovino (FBS). Además, el DMEM emplea un sistema tampón de bicarbonato sódico, que requiere un entorno con un 5-10% de CO2 para mantener un pH fisiológico.
El Medio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) está muy bien considerado entre los medios definidos para el cultivo de células y tejidos, ya que satisface las necesidades de crecimiento de diversos fenotipos celulares adherentes. Supera al Medio de Eagle original, desarrollado en la década de 1950 para el cultivo de células de pollo, mediante la formulación suplementaria mejorada conocida como modificación de Dulbecco. Esta modificación eleva significativamente el contenido de determinados aminoácidos y vitaminas hasta cuatro veces en comparación con el medio original.
En el campo del cultivo celular, el DMEM desempeña un papel vital como medio de crecimiento para diferentes tipos celulares, incluidas las células primarias, las células madre y las células transformadas. Los investigadores también emplean la versión modificada de DMEM para una amplia gama de aplicaciones de investigación, como el descubrimiento de fármacos, la ingeniería de tejidos y el estudio de las vías de señalización celular.
Control de calidad
Filtrado estéril
Almacenamiento y vida útil
Almacenar entre +2°C y +8°C, protegido de la luz.
Una vez abierto, conservar a 4°C y utilizar en un plazo de 6-8 semanas.
Condiciones de envío
Temperatura ambiente
Conservación
Mantener refrigerado a +2°C a +8°C en la oscuridad. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37°C, ya que reduce la calidad del producto.
No calentar el medio a más de 37°C ni utilizar fuentes de calor no controladas, como aparatos de microondas.
Si sólo se va a utilizar una parte del medio, retirar la cantidad necesaria y calentarla a temperatura ambiente antes de su uso.
Composición
Categoría
Componentes
Concentración (mg/L)
Aminoácidos
Glicina
30.00
L-Arginina HCl
84.00
L-Cistina 2 HCl
62.57
L-Glutamina
584.00
L-Histidina HCl H2O
42.00
L-Isoleucina
105.00
L-Leucina
105.00
L-Lisina HCl
146.00
L-metionina
30.00
L-Fenilalanina
66.00
L-Serina
42.00
L-Treonina
95.00
L-Triptófano
16.00
L-Tirosina 2 Na 2H2O
103.79
L-Valina
94.00
Vitaminas
Cloruro de colina
4.00
D-pantotenato cálcico
4.00
Ácido fólico
4.00
mio-Inositol
7.20
Nicotinamida
4.00
Piridoxal HCl
4.00
Riboflavina
0.40
Tiamina HCl
4.00
Sales inorgánicas
CaCl2 2 H2O
265.00
Fe(NO3)3 9 H2O
0.10
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
NaCl
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
Otros componentes
D-Glucosa
4500.00
Sal sódica de rojo de fenol
15.90
Piruvato sódico
110.0025,00 €*AccutaseVariantes: 100 mlReactivo de disociación celular Accutase
- Una alternativa suave a la tripsina
Accutase es una solución de disociación celular que está revolucionando la industria del cultivo celular. Es una mezcla de enzimas proteolíticas y colagenolíticas que imita la acción de la tripsina y la colagenasa. A diferencia de la tripsina, Accutase no contiene ningún componente mamífero o bacteriano y es mucho más suave con las células, por lo que es una solución ideal para el desprendimiento rutinario de células del material plástico estándar de cultivo de tejidos y del material plástico recubierto de adherencia. En esta entrada del blog, exploraremos los beneficios y usos de Accutase y cómo está cambiando las reglas del juego en el cultivo celular.
Ventajas de Accutase
Accutase tiene varias ventajas sobre las soluciones tradicionales de tripsina. En primer lugar, puede utilizarse siempre que se necesite un desprendimiento suave y eficaz de cualquier línea celular adherente, lo que la convierte en un sustituto directo de la tripsina. En segundo lugar, Accutase funciona extremadamente bien en células madre embrionarias y neuronales, y se ha demostrado que mantiene la viabilidad de estas células después del pasaje. En tercer lugar, Accutase conserva la mayoría de los epítopos para su posterior análisis por citometría de flujo, por lo que es ideal para el análisis de marcadores de superficie celular.
Además, no es necesario neutralizar Accutase al pasar células adherentes. La adición de más medio después de dividir las células diluye Accutase de modo que ya no es capaz de desprender células. Esto elimina la necesidad de un paso de inactivación y ahorra tiempo a los técnicos de cultivo celular. Por último, Accutase no necesita alícuotas y una botella es estable en el frigorífico durante 2 meses.
Aplicaciones de Accutase
Accutase es un sustituto directo de la solución de tripsina y puede utilizarse para el pasaje de líneas celulares. Además, Accutase funciona bien al separar células para el análisis de muchos marcadores de superficie celular mediante citometría de flujo y para la clasificación celular. Otras aplicaciones posteriores del tratamiento con Accutase incluyen el análisis de marcadores de la superficie celular, el ensayo de crecimiento de virus, la proliferación celular, los ensayos de migración de células tumorales, el pasaje celular rutinario, el escalado de la producción (biorreactor) y la citometría de flujo.
Composición de Accutase
Accutase no contiene componentes mamíferos ni bacterianos y es una mezcla enzimática natural con actividad enzimática proteolítica y colagenolítica. Está formulada a una concentración mucho menor que la tripsina y la colagenasa, lo que la hace menos tóxica y más suave, pero igual de eficaz.
Eficacia de Accutase
Accutase ha demostrado ser eficaz en el desprendimiento de células primarias y madre y en el mantenimiento de una alta viabilidad celular en comparación con enzimas de origen animal como la tripsina. el 100% de las células se recuperan al cabo de 10 minutos, y no hay ningún inconveniente en dejar las células en Accutase hasta 45 minutos, gracias a la autodigestión de Accutase.
En resumen
En conclusión, Accutase es una potente solución que está cambiando las reglas del juego en el cultivo celular. Por su naturaleza suave, eficacia y versatilidad, Accutase es la alternativa ideal a la tripsina. Si está buscando una solución fiable y eficaz para el desprendimiento celular, Accutase es la solución para usted.75,00 €*Solución antibiótica/antimicótica (100x)Descripción general del producto
Volumen: 100 ml Almacenamiento: ≤-15°C Esterilidad: Filtrado estéril
La Solución Antibiótica/Antimicótica (100x ) es un concentrado estéril, listo para usar, diseñado para reducir los riesgos de contaminación microbiana en cultivos celulares y aplicaciones de laboratorio relacionadas. Esta solución 100x contiene una combinación bien establecida de penicilina, estreptomicina y anfotericina B, que proporciona una actividad antimicrobiana de amplio espectro contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, levaduras y hongos filamentosos. La formulación es adecuada para su uso en cultivos de células eucariotas, medios bacterianos y otros sistemas sensibles a la contaminación, lo que favorece unas operaciones de laboratorio limpias y consistentes.
Aplicación y ventajas Optimizada para protocolos de investigación rutinarios, esta solución se utiliza ampliamente para mantener condiciones asépticas en flujos de trabajo de cultivos celulares. Ofrece un rendimiento fiable en entornos sensibles a la contaminación, ayudando a los investigadores a reducir el riesgo de sobrecrecimiento microbiano sin comprometer la salud celular o la reproducibilidad experimental. La formulación filtrada estéril elimina la necesidad de pasos adicionales de solubilización, lo que permite una preparación racionalizada de los medios y reduce la variabilidad en los procedimientos diarios de laboratorio.
Uso y compatibilidad Para alcanzar concentraciones de trabajo estándar, diluya la solución 1:100 en su medio de cultivo completo. El producto es compatible con una amplia gama de líneas celulares de mamíferos y medios basales. Con una disponibilidad de stock constante, los investigadores se benefician de una continuidad de suministro fiable y una planificación logística simplificada. La solución debe almacenarse a ≤ -15 °C y protegerse de ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la estabilidad. Sólo para uso en investigación. No para uso en procedimientos diagnósticos o terapéuticos. No para uso en humanos o animales.45,00 €*PBSSolución salina tamponada con fosfato (PBS)
La solución salina tamponada con fosfato (PBS) es una solución tampón muy utilizada en la investigación biológica y química. Desempeña un papel crucial en el mantenimiento del equilibrio del pH y la osmolaridad durante diversos procedimientos experimentales, como el procesamiento de tejidos y el cultivo celular. Nuestra solución PBS está meticulosamente formulada con ingredientes de gran pureza para garantizar la estabilidad y fiabilidad en cada experimento. La osmolaridad y las concentraciones de iones de nuestra PBS imitan fielmente las del cuerpo humano, por lo que es isotónica y no tóxica para la mayoría de las células.
Composición de nuestra solución PBS
Nuestra solución PBS es una mezcla de soluciones salinas y tampones de fosfato de grado ultrapuro con pH ajustado. A una concentración de trabajo de 1X, contiene:
8000 mg/L de cloruro sódico (NaCl)
200 mg/L Cloruro potásico (KCl)
1150 mg/L Fosfato sódico dibásico anhidro (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfato potásico monobásico anhidro (KH2PO4)
Esta composición garantiza un pH y un equilibrio iónico óptimos, adecuados para una amplia gama de aplicaciones biológicas.
Aplicaciones de nuestra solución PBS
Nuestra solución PBS es ideal para diversas aplicaciones en investigación biológica. Sus propiedades isotónicas y no tóxicas la hacen adecuada para la dilución de sustancias y el enjuague de contenedores celulares. Las soluciones de PBS que contienen EDTA son eficaces para desprender células adheridas y aglomeradas. Sin embargo, los metales divalentes como el zinc no deben añadirse al PBS, ya que pueden provocar precipitación. En tales casos, se recomiendan los tampones de Good. Además, nuestra solución de PBS es una alternativa aceptable al medio de transporte viral para el transporte y almacenamiento de virus de ARN, incluido el SARS-CoV-2.
Control de calidad
Filtrado estéril
Almacenamiento y vida útil
Almacenar a +2°C a +25°C, protegido de la luz.
Una vez abierto, conservar entre 2°C y 25°C y utilizar antes de 24 meses.
Condiciones de envío
Temperatura ambiente
Conservación
Conservar refrigerado a +2°C a +8°C en la oscuridad. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37°C, ya que reduce la calidad del producto.
No calentar el medio a más de 37°C ni utilizar fuentes de calor no controladas, como aparatos de microondas.
Si sólo se va a utilizar una parte del medio, retirar la cantidad necesaria y calentarla a temperatura ambiente antes de su uso.
Composición
Categoría
Componentes
Concentración (mg/L)
Sales
Cloruro de potasio
200
Fosfato potásico monobásico anhidro
200
Cloruro sódico
8000
Fosfato sódico dibásico anhidro
115020,00 €*