Solución para el desprendimiento celular Accutase - 100 ml

Solución de desprendimiento celular Accutase con EDTA y rojo de fenol – 100 ml

Accutase es una solución de desprendimiento celular lista para usar y filtrada estérilmente, diseñada como una alternativa suave a la tripsina/EDTA para disociar células mamíferas adherentes de material plástico estándar para cultivo de tejidos y superficies recubiertas para la adhesión. Combina la actividad enzimática proteolítica y colagenolítica en una solución salina equilibrada para proporcionar una disociación eficaz pero controlada, preservando las proteínas de la superficie celular y favoreciendo una alta viabilidad tras el paso y una rápida readhesión.

La formulación de Accutase se basa en la solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (DPBS) con EDTA y rojo de fenol como indicador visual del pH. Las enzimas son de origen no mamífero y no bacteriano, lo que hace que Accutase sea especialmente adecuado para la investigación con células madre, los procesos de desarrollo de vacunas y cualquier aplicación en la que sea necesario minimizar los contaminantes de origen animal o microbiano. La solución se autoinhibe a 37 °C, por lo que no se requiere ningún reactivo neutralizante ni medio que contenga suero tras la desadhesión: las células pueden transferirse directamente a un medio fresco.

Características principales

• Líquido 1x filtrado estéril listo para usar: no requiere dilución ni reconstitución
• Actividad enzimática combinada proteolítica y colagenolítica para una disociación suave
• Cada lote está estandarizado con una actividad de disociación definida para garantizar la consistencia entre lotes
• Enzimas de origen no mamífero y no bacteriano
• Se autoinhibe a 37 °C: no se necesita solución neutralizante
• Formulado en PBS de Dulbecco con EDTA
• Incluye rojo de fenol como indicador visual de pH
• pH 6,8 – 7,8

Aplicaciones típicas

Accutase disocia suavemente una amplia variedad de tipos de células adherentes y sensibles, incluidas las células madre embrionarias humanas (hESC), las células madre pluripotentes inducidas humanas (iPSC), las células madre neurales, las neuronas primarias y las líneas adherentes cultivadas habitualmente, como HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 y A549. Entre los casos de uso típicos se incluyen:

• Subcultivo y pases rutinarios de células mamíferas adherentes
• Disociación suave de células individuales de hESC, iPSC y otras líneas sensibles
• Preparación de muestras para citometría de flujo y análisis FACS
• Análisis de marcadores de superficie celular en los que la integridad del epítopo es importante
• Ensayos de migración, proliferación y apoptosis celular
• Ensayos de quiescencia mediante privación de suero y estudios de transfección de oncogenes
• Ensayos de migración de células tumorales y de la cresta neural
• Ampliación de la producción en flujos de trabajo con biorreactores

Para el trabajo rutinario, aplique aproximadamente 10 ml de Accutase por cada 75 cm^² de superficie de cultivo e incube durante 5-10 minutos a temperatura ambiente. El tiempo de incubación óptimo debe determinarse para cada línea celular y no debe superar una hora. Antes de la adición, enjuague la capa celular con una solución salina libre ^de Ca^²⁺/Mg^²⁺, como DPBS sin calcio ni magnesio, para eliminar el suero residual y los cationes divalentes.

Manipulación y almacenamiento

Almacene el frasco sin abrir congelado a -15 °C o menos. Descongele a temperatura ambiente o durante la noche a una temperatura de entre +2 °C y +8 °C. No descongele Accutase en un baño de agua a 37 °C, ya que las temperaturas elevadas reducen la actividad enzimática. Tras la descongelación, la solución puede almacenarse hasta 2 meses a una temperatura de entre +2 °C y +8 °C; no la almacene a temperatura ambiente. No precaliente el reactivo a 37 °C antes de su aplicación; añádalo directamente a las células lavadas a temperatura ambiente. Para una vida útil prolongada, se recomienda el fraccionamiento en alícuotas de un solo uso para evitar ciclos de descongelación repetidos. Trabaje siempre en condiciones asépticas.

Calidad

Fabricado bajo estrictas normas de calidad. Cada lote de Accutase se filtra en condiciones estériles y se somete a pruebas de esterilidad, pH, aspecto y actividad de disociación para garantizar un rendimiento constante y reproducible de un lote a otro.

Especificaciones del producto

Formulación (composición por litro)

Accutase es una marca registrada de Innovative Cell Technologies, Inc.