Células LLC-MK2 (Original)

El medio de congelación CM-1 de Cytion es un medio de criopreservación de última generación diseñado para garantizar el máximo nivel de viabilidad y funcionalidad celular tras la descongelación. Este medio versátil es adecuado para un amplio espectro de tipos celulares, incluyendo células humanas y animales, lo que lo convierte en una herramienta esencial para diversas aplicaciones de investigación. Formulado con una combinación meticulosamente equilibrada de crioprotectores y nutrientes esenciales, Freeze Medium CM-1 minimiza la formación de cristales de hielo y el estrés celular durante el proceso de congelación, preservando así la integridad celular.
Las principales características de Freeze Medium CM-1 incluyen:

Amplia compatibilidad: Eficaz para una amplia gama de tipos celulares, incluyendo células primarias, células madre y líneas celulares establecidas.
Alta Viabilidad: Optimizado para maximizar la recuperación y viabilidad celular tras la descongelación, garantizando resultados experimentales fiables.
Listo para usar: Cómodamente preparadas y esterilizadas para su aplicación inmediata, reduciendo el tiempo de preparación y el riesgo de contaminación.
Estabilidad mejorada: Mantiene un rendimiento constante en condiciones de criopreservación estándar, garantizando resultados reproducibles.
Larga vida útil: CM-1 es un medio de criopreservación que contiene suero, listo para usar y que puede almacenarse en el frigorífico hasta un año.


Uso de CM-1 para congelar células

Para utilizar CM-1 para congelar células tanto adherentes como en suspensión, siga estos pasos

Para células adherentes, lavarlas y disociarlas del sustrato de cultivo. Para células en suspensión, proceder directamente al paso siguiente.
Contar las células para asegurarse de que tienen la concentración adecuada.
Centrifugar las células para granularlas y, a continuación, resuspenderlas en medio de congelación CM-1.
Transfiera las células resuspendidas a crioviales.
Utilizar un método de congelación lenta antes de transferir las células al almacenamiento a largo plazo





Método
Descripción
Pasos





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Congelación manual

Un método paso a paso que implica la reducción gradual de la temperatura para garantizar la viabilidad celular

1️⃣ Colocar las células en medio de congelación en un congelador a 4°C durante 40 minutos.
2️⃣ Transferir a un congelador a -80°C durante 24 horas.
3️⃣ Almacenar las células en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo



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Utilización de Mr. Frosty

Un práctico dispositivo que permite velocidades de congelación controladas sin energía eléctrica

1️⃣ Preparar las células en crioviales con medio de congelación.
2️⃣ Colocar los crioviales en el contenedor Mr. Frosty.
3️⃣ Almacenar a -80°C durante 24 horas antes de transferir al nitrógeno líquido



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Congelador de velocidad controlada

Congelador de alta precisión de Thermo Fisher u otros fabricantes diseñado para la reducción controlada de la temperatura

1️⃣ Programar el aparato para que disminuya gradualmente la temperatura.
2️⃣ Colocar las células preparadas en el congelador.
3️⃣ Tras el ciclo de congelación, transfiera las células a nitrógeno líquido









Almacenar los crioviales a temperaturas inferiores a -130°C o en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo.


Ingredientes

Contiene FBS, DMSO, glucosa, sales
Capacidad tampón: pH = 7,2 a 7,6


El Medio de Congelación CM-1 de Cytion ofrece una solución fiable para la criopreservación, asegurando una alta viabilidad celular y funcionalidad post-descongelación para una amplia gama de aplicaciones de investigación.

Medium 199 es un medio de cultivo celular versátil y ampliamente utilizado, especialmente formulado para el cultivo de explantes primarios. Este completo medio combina vitaminas esenciales, aminoácidos y otros factores para proporcionar una fuente de nutrientes totalmente definida para una gran variedad de tipos celulares. Es especialmente adecuado para células no transformadas, lo que lo convierte en una herramienta inestimable para la investigación biológica.
El medio 199 ofrece una amplia gama de aplicaciones en este campo. Puede mantener eficazmente el complejo cumulus-oocyte (COC) y apoyar la maduración in vitro de ovocitos. Además, se emplea en el lavado de líneas de aspiración durante la recogida de óvulos de vacas Holstein alemanas. Por otra parte, el Medio 199 sirve como un excelente medio para el cultivo de células endoteliales cardíacas derivadas de ratas. Estas aplicaciones demuestran la versatilidad y adaptabilidad del Medio 199 a diversas necesidades experimentales.
Historia
El desarrollo del Medio 199 en la década de 1950 marcó un avance significativo en los medios de cultivo de tejidos. Antes de su introducción, muchos medios de cultivo se basaban en productos derivados de animales y extractos de tejidos. Sin embargo, Morgan y sus colegas revolucionaron el campo al formular una fuente nutricional completamente definida para los cultivos celulares. Gracias a sus experimentos con diferentes combinaciones de vitaminas, aminoácidos y otros factores, descubrieron las excepcionales propiedades del Medio 199 para promover el crecimiento.
Control de calidad

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Cada lote ha sido sometido a pruebas de esterilidad y ausencia de micoplasma y bacterias.

Mantenimiento

Conservar refrigerado entre +2°C y +8°C en la oscuridad. La congelación y el calentamiento hasta +37° C minimizan la calidad del producto.
No calentar el medio a más de 37° C ni utilizar fuentes de calor incontrolables (por ejemplo, aparatos de microondas).
Si sólo se va a utilizar una parte del medio, retire esta cantidad del frasco y caliéntelo a temperatura ambiente.
La caducidad de cualquier medio, excepto el medio básico, es de 8 semanas a partir de la fecha de fabricación.

Composición




Componentes
mg/L


Sales inorgánicas
Cloruro de calcio x 2H2O
264,92



Nitrato de hierro (III) x 9H2O
0,72



Sulfato de magnesio
97,67



Cloruro de potasio
400,00



Acetato de sodio x 3H2O
82,95



Cloruro sódico
6,800.00



Dihidrogenofosfato de sodio x H2O
140,00


Otros componentes
Sulfato de adenina
10,00



AMP
0,20



ATP
1,00



Colesterol
0,20



2'-Deoxirribosa
0,50



D(+)-Glucosa anhidra
1,000.00



Glutatión (rojo.)
0,05



Guanina x HCl
0,30



Hipoxantina
0,30



Fenol rojo
10,00



D-Ribosa
0,50



Timina
0,30



Tween 80
4,90



Uracilo
0,30



Xantina
0,30



NaHCO3
2,200.00


Aminoácidos
L-Alanina
25,00



L-Arginina x HCl
70,00



Ácido L-aspártico
30,00



L-cisteína x HCl x H2O
0,10



L-Cistina
20,00



L-Glutamina estable
149,00



L-ácido glutámico
67,00



Glicina
50,00



L-Histidina x HCl x H2O
21,88



L-Hidroxiprolina
10,00



L-Isoleucina
20,00



L-Leucina
60,00



L-Lisina x HCl
70,00



L-Metionina
15,00



L-Fenilalanina
25,00



L-Prolina
40,00



L-Serina
25,00



L-Treonina
30,00



L-Triptófano
10,00



L-Tirosina
40,00



L-Valina
25,00


Vitaminas
ácido 4-amino benzoico
0,05



Ácido ascórbico
0,05



D(+)-Biotina
0,01



Calciferol
0,10



D-Pantotenato cálcico
0,01



Cloruro de colina
0,50



Ácido fólico
0,01



mio-inositol
0,05



Menadiona
0,01



Ácido nicotínico
0.025



Nicotinamida
0.025



Piridoxal x HCl
0.025



Piridoxol x HCl
0.025



Riboflavina
0,01



DL-α-Tocoferol fosfato sal disódica
0,01



Tiamina x HCl
0,01



Acetato de vitamina A
0,14

Reactivo de disociación celular Accutase
- Una alternativa suave a la tripsina
Accutase es una solución de disociación celular que está revolucionando la industria del cultivo celular. Es una mezcla de enzimas proteolíticas y colagenolíticas que imita la acción de la tripsina y la colagenasa. A diferencia de la tripsina, Accutase no contiene ningún componente mamífero o bacteriano y es mucho más suave con las células, por lo que es una solución ideal para el desprendimiento rutinario de células del material plástico estándar de cultivo de tejidos y del material plástico recubierto de adherencia. En esta entrada del blog, exploraremos los beneficios y usos de Accutase y cómo está cambiando las reglas del juego en el cultivo celular.
Ventajas de Accutase
Accutase tiene varias ventajas sobre las soluciones tradicionales de tripsina. En primer lugar, puede utilizarse siempre que se necesite un desprendimiento suave y eficaz de cualquier línea celular adherente, lo que la convierte en un sustituto directo de la tripsina. En segundo lugar, Accutase funciona extremadamente bien en células madre embrionarias y neuronales, y se ha demostrado que mantiene la viabilidad de estas células después del pasaje. En tercer lugar, Accutase conserva la mayoría de los epítopos para su posterior análisis por citometría de flujo, por lo que es ideal para el análisis de marcadores de superficie celular.
Además, no es necesario neutralizar Accutase al pasar células adherentes. La adición de más medio después de dividir las células diluye Accutase de modo que ya no es capaz de desprender células. Esto elimina la necesidad de un paso de inactivación y ahorra tiempo a los técnicos de cultivo celular. Por último, Accutase no necesita alícuotas y una botella es estable en el frigorífico durante 2 meses.
Aplicaciones de Accutase
Accutase es un sustituto directo de la solución de tripsina y puede utilizarse para el pasaje de líneas celulares. Además, Accutase funciona bien al separar células para el análisis de muchos marcadores de superficie celular mediante citometría de flujo y para la clasificación celular. Otras aplicaciones posteriores del tratamiento con Accutase incluyen el análisis de marcadores de la superficie celular, el ensayo de crecimiento de virus, la proliferación celular, los ensayos de migración de células tumorales, el pasaje celular rutinario, el escalado de la producción (biorreactor) y la citometría de flujo.
Composición de Accutase
Accutase no contiene componentes mamíferos ni bacterianos y es una mezcla enzimática natural con actividad enzimática proteolítica y colagenolítica. Está formulada a una concentración mucho menor que la tripsina y la colagenasa, lo que la hace menos tóxica y más suave, pero igual de eficaz.
Eficacia de Accutase
Accutase ha demostrado ser eficaz en el desprendimiento de células primarias y madre y en el mantenimiento de una alta viabilidad celular en comparación con enzimas de origen animal como la tripsina. el 100% de las células se recuperan al cabo de 10 minutos, y no hay ningún inconveniente en dejar las células en Accutase hasta 45 minutos, gracias a la autodigestión de Accutase.
En resumen
En conclusión, Accutase es una potente solución que está cambiando las reglas del juego en el cultivo celular. Por su naturaleza suave, eficacia y versatilidad, Accutase es la alternativa ideal a la tripsina. Si está buscando una solución fiable y eficaz para el desprendimiento celular, Accutase es la solución para usted.

Descripción general del producto
Volumen: 100 ml Almacenamiento: ≤-15°C Esterilidad: Filtrado estéril
La Solución Antibiótica/Antimicótica (100x ) es un concentrado estéril, listo para usar, diseñado para reducir los riesgos de contaminación microbiana en cultivos celulares y aplicaciones de laboratorio relacionadas. Esta solución 100x contiene una combinación bien establecida de penicilina, estreptomicina y anfotericina B, que proporciona una actividad antimicrobiana de amplio espectro contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, levaduras y hongos filamentosos. La formulación es adecuada para su uso en cultivos de células eucariotas, medios bacterianos y otros sistemas sensibles a la contaminación, lo que favorece unas operaciones de laboratorio limpias y consistentes.
Aplicación y ventajas Optimizada para protocolos de investigación rutinarios, esta solución se utiliza ampliamente para mantener condiciones asépticas en flujos de trabajo de cultivos celulares. Ofrece un rendimiento fiable en entornos sensibles a la contaminación, ayudando a los investigadores a reducir el riesgo de sobrecrecimiento microbiano sin comprometer la salud celular o la reproducibilidad experimental. La formulación filtrada estéril elimina la necesidad de pasos adicionales de solubilización, lo que permite una preparación racionalizada de los medios y reduce la variabilidad en los procedimientos diarios de laboratorio.
Uso y compatibilidad Para alcanzar concentraciones de trabajo estándar, diluya la solución 1:100 en su medio de cultivo completo. El producto es compatible con una amplia gama de líneas celulares de mamíferos y medios basales. Con una disponibilidad de stock constante, los investigadores se benefician de una continuidad de suministro fiable y una planificación logística simplificada. La solución debe almacenarse a ≤ -15 °C y protegerse de ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la estabilidad. Sólo para uso en investigación. No para uso en procedimientos diagnósticos o terapéuticos. No para uso en humanos o animales.

Solución salina tamponada con fosfato (PBS)
La solución salina tamponada con fosfato (PBS) es una solución tampón muy utilizada en la investigación biológica y química. Desempeña un papel crucial en el mantenimiento del equilibrio del pH y la osmolaridad durante diversos procedimientos experimentales, como el procesamiento de tejidos y el cultivo celular. Nuestra solución PBS está meticulosamente formulada con ingredientes de gran pureza para garantizar la estabilidad y fiabilidad en cada experimento. La osmolaridad y las concentraciones de iones de nuestra PBS imitan fielmente las del cuerpo humano, por lo que es isotónica y no tóxica para la mayoría de las células.

Composición de nuestra solución PBS
Nuestra solución PBS es una mezcla de soluciones salinas y tampones de fosfato de grado ultrapuro con pH ajustado. A una concentración de trabajo de 1X, contiene:

8000 mg/L de cloruro sódico (NaCl)
200 mg/L Cloruro potásico (KCl)
1150 mg/L Fosfato sódico dibásico anhidro (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfato potásico monobásico anhidro (KH2PO4)

Esta composición garantiza un pH y un equilibrio iónico óptimos, adecuados para una amplia gama de aplicaciones biológicas.

Aplicaciones de nuestra solución PBS
Nuestra solución PBS es ideal para diversas aplicaciones en investigación biológica. Sus propiedades isotónicas y no tóxicas la hacen adecuada para la dilución de sustancias y el enjuague de contenedores celulares. Las soluciones de PBS que contienen EDTA son eficaces para desprender células adheridas y aglomeradas. Sin embargo, los metales divalentes como el zinc no deben añadirse al PBS, ya que pueden provocar precipitación. En tales casos, se recomiendan los tampones de Good. Además, nuestra solución de PBS es una alternativa aceptable al medio de transporte viral para el transporte y almacenamiento de virus de ARN, incluido el SARS-CoV-2.

Control de calidad

Filtrado estéril


Almacenamiento y vida útil

Almacenar a +2°C a +25°C, protegido de la luz.
Una vez abierto, conservar entre 2°C y 25°C y utilizar antes de 24 meses.


Condiciones de envío

Temperatura ambiente


Conservación

Conservar refrigerado a +2°C a +8°C en la oscuridad. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37°C, ya que reduce la calidad del producto.
No calentar el medio a más de 37°C ni utilizar fuentes de calor no controladas, como aparatos de microondas.
Si sólo se va a utilizar una parte del medio, retirar la cantidad necesaria y calentarla a temperatura ambiente antes de su uso.

Composición



Categoría
Componentes
Concentración (mg/L)


Sales
Cloruro de potasio
200



Fosfato potásico monobásico anhidro
200



Cloruro sódico
8000



Fosfato sódico dibásico anhidro
1150