Células B-LCL-HROC313 (Bc HROC313)

800,00 €*

Los productos se envían congelados en hielo seco en criotubos. Cada criotubo contiene normalmente 3 × 10 ⁶ células para líneas adherentes o 5 × 10⁶ células para líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).

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cryovial

Número de producto: 302058

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Ficha del producto

Acuerdo con terceros

Descripción	B-LCL-HROC313 es una línea celular linfoblastoide B humana inmortalizada por el virus de Epstein-Barr (VEB) establecida a partir de linfocitos B aislados del tejido tumoral o de la sangre periférica de un paciente adulto. Las células se generaron mediante infección ex vivo con sobrenadante que contenía EBV derivado de la línea celular B95/8 de tití, en presencia de ciclosporina A para suprimir el crecimiento de células T y NK. Tras varias semanas de cultivo, se logró un crecimiento linfoblastoide estable, lo que dio lugar a una población de células B monoclonales u oligoclonales en continua proliferación, adecuada para la expansión in vitro a largo plazo. Inmunofenotípicamente, B-LCL-HROC313 presenta un perfil de células B maduras y activadas caracterizado por la expresión de CD19 y CD20, junto con altos niveles de marcadores de activación y maduración, como CD23 y CD80. La fuerte expresión de moléculas MHC de clase I y clase II indica una capacidad preservada de presentación de antígenos. Dependiendo del clon individual, se puede observar una expresión variable de marcadores asociados a la diferenciación, como CD27, CD38 o CD138, lo que refleja diferentes etapas de maduración de las células B. Las células son negativas para los marcadores de células T, lo que confirma la especificidad del linaje. Funcionalmente, B-LCL-HROC313 secreta inmunoglobulina de un isotipo definido (por ejemplo, IgG, IgM o IgA), que permanece estable durante el cultivo prolongado. Los anticuerpos secretados pueden recogerse de los sobrenadantes del cultivo y utilizarse para aplicaciones posteriores, como ensayos de unión a antígenos, estudios de reconocimiento de células tumorales o identificación de antígenos asociados a enfermedades. Como modelo de células B inmortalizadas por el VEB, B-LCL-HROC313 proporciona una plataforma in vitro robusta para investigar las respuestas inmunitarias humorales, la activación y diferenciación de las células B y los mecanismos mediados por anticuerpos en el contexto de la inmunología tumoral o las respuestas inmunitarias sistémicas.
Organismo	Humano
Tejido	Sangre periférica
Enfermedad	Carcinoma
Sinónimos	Bc HROC313

Edad	72 años
Género	Hombre
Etnia	Caucásico
Morfología	Células redondas
Tipo de célula	Linfoblasto B
Propiedades de crecimiento	Suspensión

Cita	B-LCL-HROC313 (número de catálogo de Cytion 302058)
Nivel de bioseguridad	2
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccesión	CVCL_A8RL
Depositante	M. Linnebacher

Antígenos de superficie	CD19
Virus	Transformante: VEB

Medio de cultivo	RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Suplementos	Complementar el medio con un 10% de FBS inactivado por calor
Subcultivo	Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando hacia arriba y hacia abajo, y luego tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión para alcanzar una concentración celular de 1 x 10⁵ células/ml con medio de cultivo fresco, y divida la suspensión ajustada en nuevos matraces para su posterior cultivo.
Medio de congelación	Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Descongelación y cultivo de células	Confirme que el vial permanece profundamente congelado en el momento de la entrega, ya que las células se envían en hielo seco para mantener temperaturas óptimas durante el transporte. Tras la recepción, almacene el criovial inmediatamente a temperaturas inferiores a -150°C para garantizar la conservación de la integridad celular, o proceda al paso 3 si se requiere el cultivo inmediato. Para el cultivo inmediato, descongele rápidamente el vial sumergiéndolo en un baño de agua a 37°C con agua limpia y un agente antimicrobiano, agitando suavemente durante 40-60 segundos hasta que quede un pequeño grumo de hielo. Realice todos los pasos siguientes en condiciones estériles en una campana de flujo, desinfectando el criovial con etanol al 70% antes de abrirlo. Abrir con cuidado el vial desinfectado y transferir la suspensión celular a un tubo de centrífuga de 15 ml que contenga 8 ml de medio de cultivo a temperatura ambiente, mezclando suavemente. Centrifugar la mezcla a 300 x g durante 3 minutos para separar las células y desechar cuidadosamente el sobrenadante que contiene medio de congelación residual. Resuspender suavemente el sedimento celular en 10 ml de medio de cultivo fresco. Para las células adherentes, dividir la suspensión entre dos matraces de cultivo T25; para los cultivos en suspensión, transferir todo el medio a un matraz T25 para promover la interacción y el crecimiento celular efectivos. Siga los protocolos de subcultivo establecidos para el crecimiento y mantenimiento continuos de la línea celular, garantizando resultados experimentales fiables.
Atmósfera de incubación	37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.
Recubrimiento de matraces	Ninguno
Procedimiento de congelación	Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.
Condiciones de envío	Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.
Condiciones de almacenamiento	Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Esterilidad	La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia. Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
Perfil de STR	Amelogenina: x,y CSF1PO: 11,12 D13S317: 11,12 D16S539: 12,13 D5S818: 11,13 D7S820: 10 TH01: 6,9.3 TPOX: 8,11 vWA: 14,15 D3S1358: 14,15 D21S11: 29,31.2 D18S51: 12,16 Penta E: 12,13 Penta D: 11,16 D8S1179: 13 FGA: 20,24
Alelos HLA	A: '01:01:01, '02:01:01 B: '08:01:01, '40:01:02 C: '03:04:01, '07:01:01 DRB1: '03:01:01, '08:01:01 DQA1: '04:01:01, '05:01:01 DQB1: '02:01:01, '04:02:01 DPB1*: '04:01:01G, '04:02:01 E: '01:01:01

Tenga en cuenta que esta línea celular no está disponible bajo un ATM estándar de Cytion, ya que requiere un acuerdo de terceros y/o está sujeta a negociación con el licenciante original.

Células B-LCL-HROC313 (Bc HROC313)

Información general

Características

Datos reglamentarios

Datos biomoleculares

Manejo de

Control de calidad / Perfil genético / HLA

Acuerdo con terceros