Las células Hep2 y su papel en la investigación del cáncer de laringe
Las células Hep 2 constituyen un modelo in vitro fundamental que se utiliza ampliamente en diversos ámbitos de la investigación biomédica, como la reumatología, la investigación sobre el cáncer y la inmunología. Procedentes del carcinoma de laringe, estas células humanas han sido fundamentales para dilucidar el tejido de origen y las características específicas de las neoplasias laríngeas. Su importancia está ampliamente reconocida en la investigación traslacional del cáncer, donde han contribuido en gran medida a nuestra comprensión de la naturaleza laríngea y el origen de los cánceres, lo que les ha otorgado una presencia destacada en las publicaciones sobre investigación del cáncer de laringe [1].
- Medio de crecimiento
- Para el cultivo de las células Hep 2 se utiliza EMEM o medio mínimo esencial de Eagle. Este medio se complementa con un 10 % de FBS, 1,0 g/l de glucosa, 2,2 g/l de NaHCO3, 2,0 mM de L-glutamina, un 1 % de NEAA y 1 mM de piruvato sódico para un crecimiento celular óptimo. El medio debe renovarse de 2 a 3 veces por semana.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación descrito para las células Hep 2 es de aproximadamente 40 horas.
- Tipo de crecimiento
- Las células Hep 2 son adherentes y crecen en monocapas.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir Hep2
Origen y características generales de las células Hep 2
El origen y las características generales de una línea celular definen su aplicabilidad en la investigación. Esta sección le ayudará a conocer el origen y algunas características destacadas de las células Hep 2. Por ejemplo, descubrirá: ¿Qué es la línea celular HEp-2? ¿Cuál es el origen de las células Hep 2? ¿Y cuál es la morfología de las Hep 2?
- Hep 2, una línea celular epitelial humana inmortal, fue descrita por primera vez por H.W. Toolan como células de carcinoma laríngeo en 1954. Sin embargo, recientemente se ha informado de que la línea celular Hep 2 está compuesta por células de adenocarcinoma cervical y se originó a partir de una contaminación de la línea celular Hela [2].
- Las células Hep 2 contienen cromosomas marcadores de Hela y dan positivo para queratina y secuencias de ADN del virus del papiloma humano, tal y como se ha confirmado mediante tinción con inmunoperoxidasa y PCR, respectivamente.
- La línea celular Hep 2, derivada de la línea Hela, posee una morfología de tipo epitelial.
- La línea celular Hep 2 presenta aberraciones cromosómicas tanto estructurales como numéricas, con un cariotipo casi triploide [3].
Línea celular Hep 2: Información sobre el cultivo
Antes de trabajar con una línea celular, debemos conocer los siguientes puntos clave para su cultivo. Esta información puede resultar útil para cultivar y mantener eficazmente la línea celular. Debes saber: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células HEp-2? ¿Son las células Hep 2 adherentes? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células Hep 2?
Tiempo de duplicación de la población:
El tiempo de duplicación descrito para las células Hep 2 es de aproximadamente 40 horas.
Adherentes o en suspensión:
Las células Hep 2 son adherentes y crecen en monocapas.
Densidad de siembra:
Una densidad de siembra de 1 x 10⁴ células/cm² es ideal para el cultivo de células Hep 2. Para la siembra, las células Hep 2 adherentes se enjuagan con una solución 1 x PBS, seguida de una incubación con solución de disociación Accutase. Tras una incubación de 8-10 minutos a temperatura ambiente, las células se resuspenden en medio y se centrifugan. A continuación, las células recogidas se dispensan en medio fresco y se vierten en nuevos frascos para su cultivo.
Medio de crecimiento:
Para el cultivo de células Hep 2 se utiliza EMEM o medio esencial mínimo de Eagle. Este medio se suplementa con un 10 % de FBS, 1,0 g/l de glucosa, 2,2 g/l de NaHCO3, 2,0 mM de L-glutamina, un 1 % de NEAA y 1 mM de piruvato sódico para un crecimiento celular óptimo. El medio debe renovarse de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:
Al igual que otras líneas celulares de mamíferos, Hep 2 también se cultiva en una incubadora humidificada a una temperatura de 37 °C y con un suministro continuo de 5 % de CO₂.
Almacenamiento:
Las células Hep 2 pueden almacenarse en congeladores eléctricos de temperatura ultrabaja (por debajo de -150 °C) o en fase de vapor de nitrógeno líquido para su almacenamiento a largo plazo.
Proceso de congelación y medio:
Los medios de congelación recomendados para las células Hep 2 son CM-1 o CM-ACF. Las células deben congelarse mediante un proceso de congelación lenta que permita un descenso gradual de la temperatura de 1 °C y proteja la viabilidad celular.
Proceso de descongelación:
El vial de células congeladas se descongela rápidamente mediante agitación en un baño de agua a 37 °C hasta que quede un pequeño trozo de hielo. A continuación, las células se añaden a un medio fresco y se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. Posteriormente, el sedimento celular se resuspende en medio y las células se dispensan en frascos de cultivo. Las células deben reposar durante casi 24 horas para adherirse.
Nivel de bioseguridad
Se recomienda un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para la manipulación y el mantenimiento de cultivos de células Hep 2.
Ventajas y limitaciones de las células Hep 2
Casi todas las líneas celulares presentan una combinación única de ventajas y limitaciones que influyen en su uso en el ámbito de la investigación. En esta sección se describen algunas de las principales ventajas e inconvenientes asociados a la línea celular Hep 2.
Ventajas
Las principales ventajas de la línea celular Hep 2 son:
- Origen humano: Hep 2 se deriva de células epiteliales humanas, lo que la convierte en un valioso modelo in vitro para el estudio de enfermedades humanas e infecciones virales.
- Detección de ANA: La línea celular Hep 2 posee un conjunto de proteínas nativas que presenta numerosos antígenos, lo que la convierte en un sustrato excelente para la detección de anticuerpos antinucleares (ANA). Esta característica permite un cribado específico y altamente sensible de los ANA en suero, lo que la convierte en una herramienta diagnóstica crucial para identificar enfermedades del tejido conectivo.
Limitaciones
- Anomalías cromosómicas: Las células Hep 2 presentan múltiples anomalías cromosómicas numéricas y estructurales. Estas anomalías pueden afectar al comportamiento celular y limitar su aplicabilidad en determinados experimentos de laboratorio.
- Tumorigenicidad: Hep 2, una línea celular epitelial humana derivada de un tumor, puede presentar anomalías genéticas que suelen estar ausentes en las células epiteliales. En consecuencia, el uso de células Hep 2 podría verse limitado en estudios específicos centrados en la fisiología celular normal.
Ampliación de las aplicaciones de la línea celular Hep 2 en la investigación biomédica
La línea celular Hep 2 destaca como un modelo ejemplar para una multitud de aplicaciones dentro de la investigación biomédica. Reconocidas por su versatilidad, estas células desempeñan funciones críticas en experimentos in vitro, que van desde el análisis de receptores hasta el estudio de enfermedades complejas.
Exploración de los mecanismos tumorigénicos y las dianas terapéuticas con células Hep 2
Las células Hep 2, al ser tumorigénicas, son fundamentales para profundizar en las complejidades de la biología del cáncer. Proporcionan información sobre las vías de señalización del cáncer y los estudios mecánicos, y constituyen un pilar en la selección y evaluación de fármacos anticancerosos. Por ejemplo, un estudio revelador utilizó Hep 2 para delinear la influencia del miARN-33a en la proliferación de las células cancerosas. Los hallazgos pusieron de manifiesto los efectos antiproliferativos del miARN-33a a través de su interacción con PIM1, un oncogén conocido, lo que sugiere una nueva diana terapéutica [4]. En otro caso, se empleó Hep 2 para evaluar el potencial terapéutico de las nanopartículas de óxido de zinc de Marsdenia tenacissima, destacando su eficacia antiproliferativa y apoptótica [5].
Avances en la investigación virológica gracias a los conocimientos sobre las células Hep 2
La susceptibilidad de las células Hep 2 a diversos virus humanos las convierte en un recurso inestimable para la investigación virológica. Se han utilizado eficazmente en la expresión de genes virales del SARS-CoV-2 para desentrañar la compleja interacción entre el virus y los mecanismos celulares del huésped [6]. Esta aplicación es especialmente crucial en la era actual, en la que comprender y combatir infecciones virales como la COVID-19 es una prioridad mundial.
Descifrando las funciones celulares: manipulación genética en las células Hep 2
La adaptabilidad de la línea celular Hep 2 a la manipulación genética subraya su utilidad en los estudios mecanísticos. Los investigadores aprovechan esta característica para modular la expresión génica y dilucidar las funciones de genes específicos en los procesos celulares. Un estudio destacado se centró en la sobreexpresión de la proteína de unión al ARN RBM6 en células Hep 2, lo que facilitó la investigación de su potencial supresor de tumores, proporcionando información valiosa sobre los fundamentos moleculares del cáncer [7].
Mejora del diagnóstico de enfermedades mediante aplicaciones de la línea celular Hep 2
Más allá de estos ámbitos de investigación, las células Hep 2 son reconocidas por sus capacidades diagnósticas, especialmente en la detección de ANA, que son fundamentales en el diagnóstico de enfermedades autoinmunes como el lupus eritematoso sistémico. La precisión con la que las células Hep 2 pueden presentar ANA respalda el diagnóstico y el desarrollo de tratamientos dirigidos, lo que mejora nuestra comprensión de las patologías autoinmunes y la atención al paciente.
A través de estas diversas aplicaciones, las células Hep 2 han contribuido de manera significativa a los avances en la investigación traslacional del cáncer, el estudio de las infecciones virales y la exploración de los mecanismos celulares. Su contribución a la generación de datos clínicamente relevantes es inestimable, lo que confirma su papel indispensable tanto en el laboratorio como en la clínica. A medida que la investigación sigue evolucionando, la línea celular Hep 2 seguirá sin duda a la vanguardia, contribuyendo al descubrimiento de nuevos tratamientos y ampliando nuestro conocimiento sobre la salud y las enfermedades humanas.
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Células Hep 2: Publicaciones de investigación
A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación interesantes y más citadas sobre las células Hep 2.
- La síntesis de nanopartículas de óxido de zinc a partir de Marsdenia tenacissima inhibe la proliferación celular e induce la apoptosis en células de cáncer de laringe (Hep-2)
Este artículo, publicado en la revista Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019), exploró el potencial anticancerígeno de las nanopartículas de óxido de zinc biosintetizadas a partir de Marsdenia tenacissima en la línea celular Hep 2. - Las nanopartículas de PLGA bioformuladas cargadas con hesperidina contrarrestan la vía apoptótica intrínseca mediada por las mitocondrias en las células
cancerosas Este artículo se publicó en la revista Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials en 2021. Este estudio examinó las propiedades anticancerígenas de nanopartículas de ácido poliláctico-co-glicólico (PLGA) bioformuladas y cargadas con hesperidina en células Hep 2. - Actividad antiviral del extracto etanólico de Lophatherum gracile contra la infección
por el virus respiratorio sincitial. Esta publicación en la revista Journal of Ethnopharmacology en 2019 utilizó células Hep 2 para estudiar la infección por el virus respiratorio sincitial y seleccionar fármacos antivirales contra él. El estudio informó del prometedor potencial antiviral del extracto etanólico de una planta medicinal, Lophatherum gracile, contra la infección por el virus respiratorio sincitial. - Evaluación de extractos acuosos de cuatro plantas aromáticas para determinar su actividad contra la adhesión de Candida albicans a las células
epiteliales HEp-2 humanas. Esta investigación se publicó en Gene Reports (2020). Este estudio exploró el potencial inhibidor de los extractos acuosos de cuatro plantas aromáticas contra la adhesión de Candida albicans a las células epiteliales Hep 2 humanas. - La proteína de señalización inducible por Wnt1 regula la glucólisis y la quimiorresistencia del carcinoma escamoso de laringe a través de la vía
YAP1/TEAD1/GLUT1 Este estudio se publicó en la revista Journal of Cellular Physiology en 2019. El estudio informa de que la proteína de señalización inducible por Wnt1 (WISP1) interactúa con la vía YAP1/TEAD1/GLUT1 y regula el metabolismo de la glucosa y la quimiorresistencia en la línea celular Hep 2.
Recursos para la línea celular Hep 2: protocolos, vídeos y más
Hep 2 es una línea celular muy conocida. Existen varios recursos disponibles sobre la línea celular Hep 2.
- Subcultivo de la línea celular Hep 2: este vídeo es una guía paso a paso para el subcultivo de células Hep 2.
- Cribado de ANA en células Hep 2: este vídeo explica el cribado de anticuerpos antinucleares (ANA) utilizando la línea celular Hep 2.
- Cultivo de Hep 2: este enlace contiene información básica sobre el cultivo de células Hep 2. Incluye la división celular, la congelación y la descongelación de células.
Preguntas frecuentes sobre las células HEp-2 en la investigación biomédica
Referencias
- Fusi, M. y S. Dotti, Adaptación de la línea celular HEp-2 a sistemas de cultivo totalmente libres de componentes de origen animal y análisis en tiempo real del crecimiento celular. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
- Gorphe, P., Una revisión exhaustiva de la línea celular Hep-2 en la investigación traslacional del cáncer de laringe. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
- Wang, M., et al., Los fibroblastos asociados al cáncer en un tumor laríngeo xenoinjertado establecido en HEp-2 humano no se derivan de células cancerosas a través de la transición epitelial-mesenquimal, sino que están fenotípicamente activados pero son cariotípicamente normales. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
- Karatas, O.F., Potencial antiproliferativo del miR-33a en células Hep-2 de cáncer de laringe mediante la inhibición de PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
- Wang, Y., et al., La síntesis de nanopartículas de óxido de zinc a partir de Marsdenia tenacissima inhibe la proliferación celular e induce la apoptosis en células de cáncer de laringe (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
- Zhang, J., et al., Estudio sistémico y molecular de la localización subcelular de las proteínas del SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
- Wang, Q., et al., La proteína de unión al ARN RBM6, como gen supresor de tumores, reprime el crecimiento y la progresión del carcinoma de laringe. Gene, 2019. 697: p. 26-34.
