Buňky SW-620 – vliv na výzkum a experimenty v oblasti rakoviny tlustého střeva
Buňky SW-620 představují lidskou buněčnou linii kolorektálního karcinomu ve stadiu C podle Dukese. Vyznačují se vysokým tumorigenním a metastatickým potenciálem. Proto jsou široce využívány ve studiích zaměřených na rakovinu a toxikologii. Tento článek se bude zabývat základními aspekty buněčné linie rakoviny tlustého střeva SW-620.
- Růstové médium
- Pro ideální růst buněk SW-620 se používá médium DMEM doplněné 10 % fetálního bovinního séra, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutaminu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného. Média by se měla obnovovat dvakrát týdně.
- Doba zdvojnásobení
- Doba zdvojnásobení buněk SW-620 se pohybuje v rozmezí 20 až 26 hodin.
- Typ růstu
- Buněčná linie SW-620 je adhezivní. Buňky tvoří monovrstvy na povrchu kultivační nádoby.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-1
- K dostání u
- Cytion — Objednat SW-620
Původ a obecné charakteristiky buněk SW-620
Původ a obecné charakteristiky představují základní informace o buněčné linii. Předchozí znalost těchto údajů je nezbytná pro výzkumníky, kteří uvažují o jejím využití ve svém výzkumném projektu. Tato část článku vysvětlí klíčové vlastnosti a původ buněčné linie SW-620. Dozvíte se zejména: Co je buněčná linie SW-620? Jaké jsou vlastnosti buněčné linie SW-620? Jaký je původ buněčné linie SW-620? Jaká je velikost buněk SW-640? A jaký je rozdíl mezi buněčnými liniemi SW-620 a SW-480?
- SW-620, buněčná linie kolorektálního karcinomu, pochází z mediátizované léze lymfatické uzliny u 51letého muže kavkazského původu s adenokarcinomem tlustého střeva [1]. Tuto buněčnou linii uložili A. Leibovitz a jeho kolegové.
- Buňky SW-620 mají epiteliální morfologii. Skládají se také z malých kulatých a bipolárních buněk, které odpovídají mikrovilím.
- Velikost buněk SW-620 je 14,4 ± 0,3 μm v průměru.
- Tyto buňky rakoviny tlustého střeva mají hyperdiploidní karyotyp. Modální počet chromozomů u buněk SW-620 je 50, přičemž se může pohybovat v rozmezí od 45 do 53.
SW-480 vs. SW-620
SW480 a SW620 jsou buněčné linie kolorektálního karcinomu. SW-480 byla odvozena z primárního nádoru, zatímco SW-620 byla založena z metastázované lymfatické uzliny. Navíc se xenotransplantáty vyvinuté z těchto buněčných linií od sebe liší. Xenotransplantáty SW-620 vytvářejí vrstvy nádorových buněk, zatímco xenotransplantáty SW-480 tvoří žlázovité struktury [2]. Obě buněčné linie mají identické mutační profily.
Buňky SW-620: Informace o kultivaci
Porozumění základním principům kultivace buněčné linie je nezbytné, protože vede k jejímu správnému zacházení a udržování. V této části jsou uvedeny některé klíčové body pro kultivaci buněk SW-620, které vám pomohou zjistit: Co je to médium pro SW-620? Jaká je doba zdvojnásobení buněk SW-620? Jak se kultivují buňky SW-620?
Klíčové body pro kultivaci buněk SW-620
Doba zdvojnásobení:
Doba zdvojnásobení buněk SW-620 se pohybuje v rozmezí 20 až 26 hodin.
Adherentní nebo v suspenzi:
Buněčná linie SW-620 je adhezivní. Buňky tvoří monovrstvy na povrchu kultivační nádoby.
Poměr subkultivace:
Buňky SW-620 se subkultivují v poměru 1:3. Adherentní buňky se propláchnou fosfátovým solným pufrem (1X) bez hořčíku a vápníku. Následně se přidá pasážovací roztok Accutase a buňky se inkubují při pokojové teplotě po dobu 8 až 10 minut. Přidá se čerstvé médium a buňky se odstředí. Poté se sklizené buňky opatrně resuspendují v růstovém médiu a rozdělí se do nových lahví pro růst.
Růstové médium:
Pro ideální růst buněk SW-620 se používá médium DMEM doplněné 10 % fetálním bovinním sérem, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutaminu, 1,5 g/l NaHCO₃ a 1,0 mM pyruvátu sodného. Média by se měla vyměňovat dvakrát týdně.
Podmínky kultivace:
Buňky karcinomu tlustého střeva SW-620 se kultivují ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a s 5 % CO₂.
Skladování:
Po zmrazení se buňky SW-620 skladují při teplotě pod -150 °C v mrazničkách s extrémně nízkou teplotou nebo v plynné fázi kapalného dusíku.
Proces zmrazení a médium:
CM-1 nebo CM-ACF je ideální médium pro zmrazení buněk SW-620. K zmrazení buněk SW-620 se používá postup pomalého zmrazování. Ten umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, čímž chrání životaschopnost buněk.
Proces rozmrazování:
Zmrazené buňky SW-620 se rozmrazují ve vodní lázni předem nastavené na 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Po rozmrazení se přidá kultivační médium a buňky se odstředí, aby se odstranily zbytky mrazicího média. Poté se získaný buněčný pelet resuspenduje v růstovém médiu a buňky se přelijí do nové baňky pro růst.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Pro práci s kulturami SW-620 je nutná laboratoř úrovně biologické bezpečnosti 1 (BSL-1).
Výhody článků SW-620
Výhody
- Modelování karcinomu tlustého střeva: Buňky SW-620 slouží jako klíčový model pro karcinom tlustého střeva a umožňují podrobné studium mechanismů nádorů a metastáz, zejména v modelech xenotransplantátů.
- Výzkum rakoviny a terapie: Tyto buňky usnadňují zkoumání biologie rakoviny, účinnosti chemoterapie a mechanismů buněčné smrti, včetně anoikis.
- Exprese CD133: Exprese CD133 v buňkách SW-620 poskytuje vhled do biologie rakovinných kmenových buněk a jejích dopadů na tumorigenezi a rezistenci vůči léčbě.
- Aplikace průtokové cytometrie: Analýza těchto buněk pomocí průtokové cytometrie umožňuje posouzení buněčných populací, úrovní apoptózy a proliferace.
Výzkumné aplikace buněčné linie SW-620
Níže jsou popsány oblasti výzkumu, ve kterých se buňky SW-620 jeví jako slibné:
- Výzkum rakoviny: SW-620 je neocenitelný buněčný model pro studium biologie kolorektálního karcinomu. Vědci tento in vitro model využívají k prozkoumání molekulárních mechanismů řídících růst, invazi a migraci rakovinných buněk. Kromě toho lze tento model využít ke studiu mutací v buněčné linii SW620, tj. p53, APC a KRAS. Výzkum provedený v roce 2021 zkoumal vliv mutace genu KRAS v buněčné linii SW620 na citlivost nového léčiva FL118. Bylo zjištěno, že nadměrná exprese genu KRAS zvyšuje FL118-indukovanou apoptózu kolorektálních buněk, zatímco jeho potlačení ji snižuje. Tyto výsledky mohou pomoci předpovědět použití FL118 u pacientů s karcinomem tlustého střeva s mutací v genu KRAS [3].
- Screening a vývoj léčiv: Buněčná linie SW-620 se široce používá ke screeningu a testování potenciálních kandidátů na léky proti rakovině tlustého střeva. Výzkumníci tyto buňky využívají k hodnocení cytotoxicity a účinnosti léčiv, což může vést k vývoji cílených léčebných přístupů. Například jedna studie zkoumala protikolorektální protinádorové účinky jednotlivých složek éterických olejů ze skořice a hřebíčku s využitím buněčné linie SW-620 [4].
- Studie metastázování: Vzhledem k vysokému metastatickému potenciálu lze buňky SW-620 použít k výzkumu molekulárních drah, které jsou základem metastázování rakovinných buněk. Například Zhou Yang a jeho kolegové zjistili úlohu genu Grainy-head-like 2 (GRHL2) v progresi a metastázování rakoviny tlustého střeva. Navrhli, že exprese genu GRHL2 inhibuje progresi a metastázování kolorektálního karcinomu prostřednictvím potlačení epiteliálně-mezenchymální transformace (EMT) [5].
Zabezpečte svou buněčnou linii SW620
Články o článcích SW-620
V této sekci se podíváme na některé zajímavé a nejčastěji citované vědecké publikace týkající se buněk SW-620.
Tato studie publikovaná v časopise Molecular Carcinogenesis (2017) navrhla, že léčba polyfenolem urolithinem A indukuje autofagii v buněčné linii kolorektálního karcinomu SW620. Rovněž potlačila metastázy rakovinných buněk.
Tento článek v časopise Oncology Letters (2018) zkoumal antimetastatický potenciál tetrandrin, alkaloidu z skupiny bis-benzylisochinolinu, na buněčné linii SW-620.
Tento článek byl publikován v časopise Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Navrhuje, že gen CDCA3 (Cell division cycle associated 3) je v buňkách kolorektálního karcinomu nadměrně exprimován a podporuje jejich proliferaci prostřednictvím aktivace signální dráhy NF-κB.
Studie publikovaná v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) zkoumala synergický účinek bispecifické protilátky (ABL001) a chemoterapeutických léků na progresi nádoru v xenotransplantátu SW620.
Tento článek byl publikován v časopise Cells (2018). V této studii byl extrakt z Bacopa monnieri, Bacopasid II, zkoumán z hlediska protinádorových účinků na buněčnou linii SW-620 a další buňky kolorektálního karcinomu.
Zdroje pro buněčnou linii SW-620: protokoly, videa a další
Níže uvádíme několik online zdrojů věnovaných buňkám karcinomu tlustého střeva SW-620.
- Transfekce buněk SW-620: Tento článek stručně popisuje protokol pro stabilní transfekci buněčné linie SW-620.
Následující odkaz obsahuje protokol pro kultivaci buněk SW-620.
- Protokol pro kultivaci buněk SW-620: Tento odkaz poskytuje základní informace o buněčné linii SW-620. Pomůže vám také seznámit se s protokolem pro subkultivaci buněk SW-620 a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferujícími kulturami SW-620.
- Protokoly pro kultivaci buněk: Toto video je skvělým zdrojem informací o protokolech pro pasážování adhezivních buněk, jejich zmrazování a rozmrazování.
Často kladené otázky o buňkách SW620
Buňky SW620 jsou buňky lidského kolorektálního adenokarcinomu získané z metastáz lymfatických uzlin pacienta s rakovinou tlustého střeva, které jsou významné pro výzkum rakoviny.
Průměr buněk SW620 se obvykle pohybuje od 15 do 30 mikrometrů, i když se může lišit v závislosti na kultivačních podmínkách.
Buňky SW620 vykazují několik mutací, mimo jiné v genu TP53. Tyto mutace mohou ovlivnit morfologii buněk, což vede k různým tvarům a velikostem v rámci populace.
Buňky SW620 a SW480 pocházejí z adenokarcinomů tlustého střeva, ale buňky SW620 pocházejí z metastatického ložiska, zatímco buňky SW480 z primárního nádoru. Tento rozdíl může ovlivnit jejich genetickou výbavu, chování v kultuře a odpověď na léčbu.
Buňky SW620 jsou důležité pro studium nádorového bujení, zejména díky své schopnosti vytvářet nádory v xenograftových myších modelech a expresi markerů nádorových kmenových buněk, jako je CD133.
Ano, buňky SW620 se používají ke studiu cest buněčné smrti, včetně apoptózy a anoikis, jak reagují na různé terapie rakoviny a podmínky prostředí.
Vysoký metastatický potenciál buněk SW620 a jejich původ z metastatické lymfatické uzliny z nich činí vhodný model pro studium šíření rakoviny tlustého střeva.
Průtoková cytometrie umožňuje výzkumníkům analyzovat vlastnosti buněk SW620, včetně exprese CD133 a míry apoptózy nebo citlivosti na anoikis.
Buňky SW620 mají vysoký tumorigenní potenciál, když jsou zavedeny do imunodeficitních xenografických myších modelů, což je činí cennými pro studie in vivo progrese rakoviny.
Literatura
- Siekmann, W., et al., Vliv lidokainu a ropivakainu na primární (SW480) a metastatické (SW620) buněčné linie rakoviny tlustého střeva. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395–401.
- Hewitt, R.E. a kol., Validace modelu progrese rakoviny tlustého střeva. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446–54.
- Thangaiyan, R., a kol., Podtypy mutací genu KRAS výrazně ovlivňují citlivost buněk kolorektálního karcinomu na FL118, nový inhibitor survivinu, Mcl-1, XIAP, cIAP2 a MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
- Petrocelli, G., a kol., Molekuly přítomné v éterických olejích rostlin pro prevenci a léčbu kolorektálního karcinomu (CRC). Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
- Yang, Z., a kol., GRHL2 inhibuje progresi a metastázy kolorektálního karcinomu potlačením epiteliálně-mezenchymální transformace. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195–1205.