Buňky RBL-2H3 – Význam buněk RBL-2H3 v alergické reakci a imunologických studiích
Buněčná linie RBL-2H3 je buněčná linie bazofilní leukémie odvozená z potkanů, která se používá v imunologickém výzkumu. Slouží jako modelový systém pro studium fyziologie, chování a funkcí žírných buněk. Tyto buňky se také využívají ke studiu alergických reakcí, imunologických procesů a k testování a vývoji léčiv.
- Růstové médium
- K kultivaci buněk RBL-2H3 se používá médium EMEM obsahující 10 % FBS, 2 mM L-glutaminu, 2,2 g/l NaHCO₃ a EBSS sůl. Médium by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně.
- Doba zdvojnásobení
- Doba zdvojnásobení počtu žírných buněk RBL-2H3 je přibližně 50–60 hodin.
- Typ růstu
- RBL-2H3 je adhezivní buněčná linie.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-2
- K dostání u
- Cytion — Objednat RBL-2H3
- Buňky RBL-2H3: Původ a obecné charakteristiky
- Buňky RBL-2H3: Informace o kultivaci
- Výhody a omezení bazofilní buněčné linie RBL-2H3
- Buněčná linie RBL-2H3: Základní kámen imunologického výzkumu
- Buněčná linie RBL-2H3: Nezbytné často kladené otázky pro výzkumníky
- Reference
- Buněčná linie RBL-2H3 pro pokročilý imunologický výzkum
- Buňky RBL-2H3: Výzkumné publikace
- Zdroje pro buněčnou linii RBL-2H3: protokoly, videa a další
- Často kladené otázky
Buňky RBL-2H3: Původ a obecné charakteristiky
Než začnete ve svém výzkumu používat buněčnou linii bazofilů, měli byste znát její původ a obecné vlastnosti. Tato část článku vás seznámí se základními informacemi o buňkách RBL-2H3. Například: Co jsou žírné buňky RBL-2H3? Proč používat buňky RBL-2H3? Co jsou buňky RBL-2H3 u bazofilní leukémie potkanů? Jaká je morfologie buněk RBL-2H3? Jsou buňky RBL-2H3 nesmrtelné?
- RBL-2H3 jsou buňky bazofilní leukémie odvozené z bazofilních buněk potkanů kmene Wistar v roce 1978 v Laboratoři imunologie Národního institutu zubního výzkumu.
- Buňky RBL-2H3 vykazují receptory tyrozinkinázy c-kit a receptory proteázy II žírných buněk (RMCP-II), což z nich činí potenciální model žírných buněk. Proto se jim běžně říká žírné buňky, ačkoli pocházejí z bazofilů potkanů [1].
- Po aktivaci uvolňují histamin a další mediátory a exprimují receptory IgE s vysokou afinitou.
- Buňky RBL-2H3 vykazují morfologii podobnou fibroblastům.
Buňky RBL-2H3: Informace o kultivaci
Tato část vám pomůže seznámit se s některými klíčovými aspekty kultivace buněčné linie RBL-2H3. Dozvíte se: Jaká je doba zdvojnásobení buněk RBL-2H3? Jaká je hustota výsevu buněk RBL-2H3? Jaký je protokol pro kultivaci buněk RBL-2H3? Jaké je médium pro zmrazení buněčné linie RBL-2H3?
Klíčové body pro kultivaci buněk RBL-2H3
Doba zdvojnásobení populace:
Doba zdvojnásobení počtu žírných buněk RBL-2H3 je přibližně 50–60 hodin.
Adherentní nebo v suspenzi:
RBL-2H3 je adhezivní buněčná linie.
Poměr při subkultivaci:
U buněk RBL-2H3 se poměr subkultivace udržuje v rozmezí 1:2 až 1:4. Adherentní buňky se promyjí roztokem 1× PBS bez obsahu hořčíku a vápníku. Přidá se pasážovací roztok Accutase a buňky se nechají 10 minut při pokojové teplotě, aby se odloučily od dna kultivační nádoby. Přidá se čerstvé médium a buňky se odstředí. Sklizené buňky se opatrně resuspendují v čerstvém médiu a přelijí do nových lahví obsahujících růstové médium.
Růstové médium:
K kultivaci buněk RBL-2H3 se používá médium EMEM obsahující 10 % FBS, 2 mM L-glutaminu, 2,2 g/l NaHCO₃ a EBSS sůl. Médium by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně.
Podmínky kultivace:
Buňky RBL-2H3 se kultivují ve zvlhčeném inkubátoru nastaveném na teplotu 37 °C a připojeném ke zdroji 5 % CO₂.
Skladování:
Buňky se skladují v plynné fázi kapalného dusíku nebo při teplotě pod -150 °C v elektrickém mrazáku, aby byla dlouhodobě zachována jejich životaschopnost.
Proces zmrazování a médium:
K zmrazení buněk RBL-2H3 se používá zmrazovací médium CM-1 nebo CM-ACF a postup pomalého zmrazování. Stručně řečeno, tato metoda umožňuje pokles teploty o 1 °C za minutu a chrání buňky před teplotním šokem.
Proces rozmrazování:
Buňky RBL-2H3 se rozmrazují v předem nastavené vodní lázni (37 °C) po dobu přibližně 60 sekund. Poté se buňky přidají do čerstvého kultivačního média a odstředí se. Tento krok je nezbytný k odstranění složek mrazicího média. Následně se buněčný pelet resuspenduje v růstovém médiu a buňky se přenesou do baňky pro kultivaci.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Buňky RBL-2H3 by měly být udržovány v laboratořích s úrovní biologické bezpečnosti 1.
Vydáno: 2023 | Poslední revize: květen 2026
Výhody a omezení buněčné linie bazofilů RBL-2H3
Buňky RBL-2H3 se běžně používají v imunologickém výzkumu. Tato část popisuje jejich hlavní výhody a omezení.
Výhody
- Snadná kultivace: Buňky RBL-2H3 lze snadno kultivovat a udržovat v laboratorním prostředí. To usnadňuje nákladově efektivní a reprodukovatelné experimenty, díky čemuž jsou oblíbenou volbou pro úvodní studie v imunologii.
Omezení
- Nehumánní původ: Buňky RBL-2H3 pocházejí z bazofilů potkanů, a proto nemusí přesně napodobovat lidské biologické procesy, což může omezovat jejich použitelnost ve výzkumných studiích zaměřených specificky na člověka. To vyžaduje opatrnou interpretaci dat při extrapolaci výsledků na lidské systémy.
- Zjednodušený model žírných buněk: Ačkoli tyto buňky poskytují základní model pro studium funkcí žírných buněk, plně nereprezentují komplexní povahu interakcí žírných buněk v rámci lidského imunitního systému. V důsledku toho nemusí adekvátně modelovat mnohostranné role žírných buněk v imunitních reakcích nebo při onemocnění in vivo.
Buněčná linie RBL-2H3: Základní kámen imunologického výzkumu
Výzkum bazofilů a žírných buněk s využitím buněčné linie RBL-2H3
Buněčná linie RBL-2H3, odvozená z Rattus norvegicus, slouží jako klíčový model pro studium biologie bazofilů a žírných buněk. Tyto žírné buňky potkana poskytují zásadní poznatky o uvolňování mediátorů žírnými buňkami, což je klíčové pro pochopení alergických stavů, jako je alergická rýma. Prostřednictvím těchto buněk vědci zkoumají dynamiku buněčných receptorů a vznik imunologických synapsí, které hrají ústřední roli v reakci imunitního systému na alergeny. Zajímavá studie publikovaná v roce 2019 využila buněčnou linii RBL-2H3 a zkoumala mechanismy stojící za pseudoalergickými reakcemi vyvolanými injekcí přípravku Qingkailing. Studie zjistila, že signální kaskáda PI3K-RAC1 částečně vyvolává tuto alergickou reakci v buňkách [2].
Dynamika imunologických synapsí ve výzkumu alergií
Buňky RBL-2H3, které se hojně využívají v imunologickém výzkumu, jsou obzvláště účinné při zkoumání dynamiky imunologických synapsí. To pomáhá objasnit komunikační procesy imunitního systému a nachází uplatnění při studiu jak žírných buněk v periferní krvi, tak v peritoneální tekutině. Takový výzkum je zásadní pro komplexní pochopení imunitní reakce jak v systémovém, tak v lokalizovaném kontextu.
Screening léčiv a testování toxicity
Při screeningu a testování léčiv se využívá reaktivita buněk RBL na různé podněty, včetně studia toho, jak H₂O₂ inhibuje reakce zprostředkované IgE. Tyto buňky hrají zásadní roli při vývoji léčby onemocnění, jako jsou streptokokové infekce, při nichž streptokoky skupiny mitis inhibují aktivaci žírných buněk. Kromě toho vědci pomocí tohoto modelu RBL 2H3 mc hodnotí toxické účinky různých látek, včetně chemikálií, léčiv a nanočástic. Například nedávná studie (2022) hodnotila cytotoxicitu polystyrenových mikroplastů na buňkách RBL-2H3. Zjistili, že mikroplasty poškozují organely buněk RBL-2H3 a podporují buněčnou smrt [3]. Další studie z roku 2021 hodnotila antialergický a protizánětlivý potenciál přírodního produktu, neferinu, s využitím modelu RBL 2H3 mc. Studie odhalila dobré antialergické a protizánětlivé vlastnosti této sloučeniny [4].
Pokročilé metodiky v imunologickém měření
Díky konzistentnímu a měřitelnému uvolňování mediátorů z buněk RBL-2H3 jsou tyto buňky ideální pro pohodlnou fluorimetrii, což usnadňuje přesná a přesná měření, která jsou zásadní pro studium nemocí a hodnocení terapeutických látek.
Buněčná linie RBL-2H3, pocházející z druhu Rattus norvegicus, je neocenitelným přínosem jak pro základní, tak pro aplikovaný výzkum v oboru imunologie. Nabízí rozsáhlé možnosti pro prohlubování našich znalostí a zlepšování léčby imunologických onemocnění.
Buněčná linie RBL-2H3 pro pokročilý imunologický výzkum
Buňky RBL-2H3: Vědecké publikace
Níže uvádíme několik zajímavých výzkumných publikací zabývajících se žírnými buňkami RBL-2H3:
Inhibiční účinek narirutinu na degranulaci buněk RBL-2H3
Tato výzkumná práce byla publikována v časopise Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studie navrhla, že narirutin, přírodní sloučenina, vykazuje inhibiční účinky na degranulaci buněk RBL-2H3 prostřednictvím regulace signálních drah NF-κB, MAPK a tyrozinkinázy.
Tento výzkum publikovaný v časopise International Journal of Molecular Sciences (2020) naznačil, že sloučenina apigenin významně potlačuje alergické a zánětlivé reakce buněk RBL-2H3 a RAW264.7. Může proto sloužit jako potenciální látka pro boj s imunitními onemocněními.
Tento výzkumný článek v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) hodnotil antialergické a protizánětlivé účinky přírodního produktu, saponarinu, s využitím různých buněčných linií, včetně RBL-2H3.
Tato studie publikovaná v časopise „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2014) zjistila, že extrakty z Benchalokawichianu a některé jeho aktivní složky vykazují potenciální inhibiční účinky na uvolňování β-hexosaminidázy z buněk RBL-2H3.
Tento článek byl publikován v roce 2018 v časopise International Journal of Biological Macromolecules. Studie uvádí, že přírodní produkt spirulina maxima inhibuje degranulaci buněk RBL 2H3 tím, že brání fosforylaci MAPK a AKT.
Zdroje pro buněčnou linii RBL-2H3: protokoly, videa a další
RBL-2H3 je široce používaná linie žírných buněk. Zde jsou uvedeny dostupné zdroje týkající se protokolů pro kultivaci a transfekci buněk RBL-2H3:
- Model žírných buněk RBL-2H3: Tento výzkumný článek obsahuje protokoly pro udržování kultur RBL-2H3 a pro transfekci RBL-2H3.
Zde je několik zdrojů vysvětlujících protokol kultivace buněk RBL-2H3:
- Buňky RBL-2H3: Tato webová stránka je užitečná pro seznámení se s protokoly pro kultivaci buněčné linie RBL-2H3. Kromě toho obsahuje informace o kultivačních médiích pro buňky RBL-2H3 a o podmínkách kultivace.
Buněčná linie RBL-2H3: Nezbytné často kladené otázky pro výzkumníky
Literatura
- Passante, E. a N. Frankish, Buněčná linie RBL-2H3: její původ a vhodnost jako modelu žírné buňky. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737–45.
- Li, Q. a kol., Pseudoalergická reakce vyvolaná injekcí přípravku Qingkailing částečně prostřednictvím signální dráhy PI3K-Rac1 v buňkách RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353–360.
- Liu, L., a kol., Mikro- (nano-)plasty z polystyrenu poškozují organely buněk RBL-2H3 a podporují MOAP-1 při indukci apoptózy. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M. a kol., Antialergické a protizánětlivé účinky neferinu na buňky RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.