KC buňky
Obecné informace
| Popis | KC (Kc167) je embryonální buněčná linie Drosophila melanogaster odvozená z samičího embrya ve stadiu dorzálního uzavření, registrovaná v databázi Cellosaurus pod označením CVCL_Z833. Tato linie byla původně založena a je široce využívána v buněčné biologii Drosophila, genetických skríningech a funkční genomice. Buňky Kc167 byly imortalizovány pomocí SV40 a rostou poloadhezivně, přičemž tvoří smíšenou populaci přilnutých a volně plovoucích buněk. Patří mezi nejlépe charakterizované buněčné linie Drosophila a jsou plně vhodné pro genové umlčování zprostředkované RNAi, což z nich činí základní model pro celogenomové RNAi screeningy v biologii bezobratlých. Buňky KC jsou použitelné v buněčné biologii Drosophila, při genomových screeningových testech pomocí RNAi a CRISPR, ve studiích signálních transdukčních drah (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), ve výzkumu vrozené imunity a v komparativních studiích evolučně konzervovaných drah. Díky plně sekvenovanému a anotovanému genomu Drosophila v kombinaci s rozsáhlými veřejnými databázemi RNAi reagencií (např. DRSC/TRiP) jsou buňky KC obzvláště účinné pro nestranné objevy v oblasti funkční genomiky. Vzhledem k imortalizaci virem SV40 se na ně vztahuje klasifikace BSL-2. Buňky KC se kultivují v Schneiderově médiu pro Drosophila doplněném 2 mM glutaminu a 10 % FBS. Je důležité, že buněčné linie Drosophila se kultivují při teplotě 25 °C na vzduchu bez CO₂ (nikoli při 37 °C / 5 % CO₂, jako je tomu u savčích buněk). Buňky se pasážují jemným resuspendováním a ředěním (poloadhezivní růst). Médium se obnovuje nebo se buňky ředí každé 2–3 dny. |
|---|---|
| Organismus | Drosophila melanogaster (ovocná muška) |
| Tkáň | Embrya |
| Nemoc | Normální |
| Metastatické ložisko | Embryo (stadium uzavření hřbetní štěrbiny) |
| Aplikace | Buněčná biologie Drosophila; celogenomové screeningy pomocí RNAi; screeningy pomocí CRISPR; signální transdukce (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); vrozená imunita; funkční genomika bezobratlých |
| Synonyma | KC, K C |
Charakteristika
| Věk | Fáze uzavření hřbetní části |
|---|---|
| Pohlaví | Ženy |
| Morfologie | Částečně přilnavý, epiteliální typ |
| Typ buňky | Embryonální buňky |
| Růstové vlastnosti | částečně přilnavý |
Regulační údaje
| Citace | KC (katalogové číslo Cytion 300604) |
|---|---|
| Úroveň biologické bezpečnosti | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusAccession | CVCL_Z833 |
| Status GMO | GMO-S2: Tato buněčná linie Drosophila obsahuje stabilně integrovanou imortalizační kazetu SV40. Je vyžadováno bezpečnostní opatření BSL-2. Toto zařazení platí pouze v Německu a v jiných zemích se může lišit. |
Biomolekulární data
| Vnímavost k virům | SV40 – virus způsobující nesmrteľnost buněk |
|---|
Zpracování
| Kultivační médium | Schneiderovo médium pro Drosophila + 2 mM glutamin + 10 % fetálního bovinního séra (FBS). |
|---|---|
| Doplňky | Do média přidejte 2 mM glutaminu a 10 % FBS |
| Disociační činidlo | Není nutné (částečně ulpívající; jemně resuspendujte) |
| Doba zdvojnásobení | přibližně 24 až 48 hodin |
| Subkultivace | Jemně pipetujte kulturu, abyste resuspendovali částečně adhezivní buňky. Přemístěte odpovídající objem do nové baňky a přidejte čerstvé, předem ohřáté Schneiderovo médium. Nařeďte na hustotu 5 × 10⁵ až 1 × 10⁶ buněk/ml. Inkubujte při teplotě 25 °C na vzduchu bez CO₂. |
| Poměr rozdělení | 1 až 3 |
| Hustota výsevu | 5 × 10⁵ až 1 × 10⁶ buněk/ml |
| Obnova tekutin | Každé 2 až 3 dny |
| Zmrazovací médium | Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo. |
| Rozmrazování a kultivace buněk |
|
| Inkubační atmosféra | 25 °C, okolní vzduch (není třeba CO₂). |
| Přepravní podmínky | Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu. |
| Podmínky skladování | Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku. |
Kontrola kvality a molekulární analýza
Dohoda o převodu materiálu
Pokud máte v úmyslu používat buněčné linie Cytion výhradně pro interní výzkum na jednom výzkumném pracovišti, vyplňte a podepište naši smlouvu o převodu materiálu (MTA) a přiložte ji k vaší objednávce.
Pro jakékoli komerční použití – včetně, ale nejen, práce za úplatu, testování kontroly kvality, uvolňování produktů, diagnostické použití nebo regulační studie – vyplňte prosím formulář zamýšleného použití, abychom mohli připravit vhodnou smlouvu přizpůsobenou vašemu projektu.
Upozornění: MTA se vztahuje pouze na určité buněčné linie. Pokud se toto oznámení a dokument MTA objeví na stránce produktu, smlouva je platná. U buněčných linií, na které se MTA nevztahuje, nebude odkaz na smlouvu zobrazen. MTA není platná pro zákazníky v Americe, Číně nebo na Tchaj-wanu. Chcete-li obdržet příslušnou smlouvu, kontaktujte naši americkou pobočku.