EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Eagleovo minimální esenciální médium (EMEM) je jedním z nejčastěji používaných bazálních médií pro kultivaci široké škály savčích buněk, zejména adhezivních buněčných linií. Tato klasická receptura, původně vyvinutá Harrym Eaglem, obsahuje esenciální aminokyseliny, vitamíny a anorganické soli nezbytné pro podporu růstu jak primárních buněk, tak zavedených buněčných linií za standardních kultivačních podmínek.
Tato sterilně filtrovaná kapalná formulace připravená k okamžitému použití je doplněna o Earleův vyvážený solný roztok (EBSS), 2 mM L-glutamin, D-glukózu (1,0 g/l) a 2,2 g/l hydrogenuhličitanu sodného (NaHCO3), díky čemuž je vhodná pro použití v atmosféře inkubátoru s regulovaným obsahem CO2 (obvykle 5 % CO2). Obsažený fenolrudý slouží jako indikátor pH, což umožňuje pohodlné vizuální sledování stavu média během buněčné kultury.
Hlavní vlastnosti
- Klasické složení Eagle’s MEM s Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS)
- Obsahuje 2 mM L-glutamin – připraveno k okamžitému použití
- 2,2 g/l hydrogenuhličitanu sodného – pufrováno pro inkubaci s 5 % CO2
- S D-glukózou (1,0 g/l) jako primárním zdrojem uhlíku
- S fenolovou červení jako indikátorem pH
- Bez HEPES a bez pyruvátu sodného
- Sterilně filtrované tekuté médium, připravené k použití
- pH 7,0 – 7,6
Typické aplikace
EMEM podporuje kultivaci široké škály savčích buněčných linií, včetně HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 a mnoha primárních buněk. Mezi běžné aplikace patří:
- Rutinní udržování a expanze adhezivních buněčných linií
- Pracovní postupy pro množení virů a výrobu vakcín
- Aplikace v oblasti cytotoxicity a biologických testů
- Studie transfekce a exprese proteinů
- Základní výzkum v oblasti buněčné biologie a molekulární biologie
Pro optimální růst buněk se EMEM obvykle doplňuje 5–10 % fetálního bovinního séra (FBS) a, v závislosti na buněčné linii, neesenciálními aminokyselinami (NEAA) a antibiotiky, jako je penicilin/streptomycin.
Manipulace a skladování
Neotevřenou lahvičku skladujte při teplotě +2 °C až +8 °C, chráněnou před světlem. Po otevření používejte za aseptických podmínek. L-glutamin v roztoku podléhá postupné degradaci – pro dosažení nejlepšího výkonu doporučujeme médium spotřebovat do 4 týdnů od otevření, nebo v případě delšího skladování doplnit před použitím čerstvým L-glutaminem. Než médium přidáte k buňkám, nechte jej ohřát na 37 °C.
Kvalita
Vyrobeno podle přísných standardů kvality. Každá šarže je testována na sterilitu, pH, osmolalitu a hladinu endotoxinů, aby byla zajištěna konzistentní výkonnost při použití v buněčných kulturách.
Specifikace produktu
| Specifikace | Detail |
|---|---|
| Typ produktu | MEM |
| Kategorie produktu | Média pro buněčné kultury |
| Formát | Kapalina |
| Sterilní | Ano |
| Velikost | 500 ml |
| L-glutamin | S L-glutaminem (2 mM) |
| Glukóza | S glukózou (1,0 g/l) |
| Hydrogenuhličitan sodný | S NaHCO3 (2,2 g/l) |
| HEPES | Bez HEPES |
| Pyruvát sodný | Bez pyruvátu sodného |
| Fenolová červeň | S fenolovou červení |
| Solný roztok | Earleův vyvážený solný roztok (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Obsah endotoxinů | Není specifikováno |
| Skladování | +2 °C až +8 °C |
Složení (složení na litr)
| Složka | Koncentrace (mg/l) |
|---|---|
| Anorganické soli | |
| Chlorid vápenatý · 2H2O | 265,00 |
| Síran hořečnatý | 97,72 |
| Chlorid draselný | 400,00 |
| Chlorid sodný | 6 800,00 |
| Dihydrogenfosforečnan sodný, bezvodý | 122,00 |
| Hydrogenuhličitan sodný (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Aminokyseliny | |
| L-arginin · HCl | 126,00 |
| L-cystin · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamin | 292,00 |
| L-histidin · HCl · H2O | 42,00 |
| L-isoleucin | 52,00 |
| L-leucin | 52,00 |
| L-lysin · HCl | 72,50 |
| L-metionin | 15,00 |
| L-fenylalanin | 32,00 |
| L-threonin | 48,00 |
| L-tryptofan | 10,00 |
| L-tyrosin · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valin | 46,00 |
| Vitamíny | |
| D-pantothenát vápenatý | 1,00 |
| Cholin chlorid | 1,00 |
| Kyselina listová | 1,00 |
| myo-inositol | 2,00 |
| Nikotinamid | 1,00 |
| Pyridoxal · HCl | 1,00 |
| Riboflavin | 0,10 |
| Thiamin · HCl | 1,00 |
| Ostatní složky | |
| D(+)-glukóza | 1 000,00 |
| Fenolová červeň | 10,00 |