DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 je široce uznávané a hojně používané základní médium v buněčných kulturách pro biologický výzkum. Slouží jako základní zdroj živin pro růst různých savčích buněčných linií, zejména pokud je doplněno fetálním bovinním sérem (FBS).
Tato jedinečná formulace kombinuje Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) a Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) v přesném poměru 1:1. Přidání L-glutaminu dále vylepšuje jeho složení.
DMEM, odvozené od Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), nabízí ve srovnání se svým předchůdcem zvýšenou koncentraci aminokyselin a vitamínů. Naproti tomu Ham's F-12 je založeno na médiu Ham's F-10 a poskytuje doplňkovou sadu esenciálních složek.
Pro podporu optimálního růstu buněk je běžnou praxí doplňovat DMEM:Ham's F12 o FBS v typické koncentraci 5–10 %. Tento přídavek je nezbytný, protože médiu chybí růstové hormony, lipidy a proteiny, které jsou pro buněčný vývoj zásadní.
DMEM:Ham's F12 obsahuje pH pufrovací systém a je často doplňováno fenolovou červení, indikátorem pH. Kultivované buňky v DMEM:Ham's F12 nebo v jakémkoli médiu využívajícím bikarbonátový pufrovací systém vyžadují kontrolované prostředí s obsahem CO2 5–10 % k udržení vhodné hladiny pH.
Kontrola kvality
- Sterilně filtrováno
Skladování a trvanlivost
- Skladujte při teplotě +2 °C až +8 °C, chráněno před světlem.
- Po otevření skladujte při teplotě 4 °C a spotřebujte do 6–8 týdnů.
Přepravní podmínky
- Okolní teplota
Skladování
- Skladujte v chladu při teplotě +2 °C až +8 °C v temnu. Vyhněte se zmrazení a častému ohřívání na +37 °C, protože to snižuje kvalitu produktu.
- Nezahřívejte médium nad 37 °C ani nepoužívejte nekontrolované zdroje tepla, jako jsou mikrovlnné trouby.
- Pokud se má použít pouze část média, odeberte potřebné množství a před použitím jej ohřejte na pokojovou teplotu.
Složení
| Kategorie | Složky | Koncentrace (mg/l) |
| Aminokyseliny | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| Kyselina L-asparagová | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin 2 HCl | 31,29 | |
| Kyselina L-glutamová | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin HCl H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin HCl | 91,25 | |
| L-metionin | 17,24 | |
| L-fenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-threonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitamíny | D-biotin | 0,0035 |
| Cholin chlorid | 8,98 | |
| D-pantothenát vápenatý | 2,24 | |
| Kyselina listová | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoxin HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Thiamin HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Anorganické soli | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Ostatní složky | D-glukóza | 3151,00 |
| Hypoxantin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Kyselina linolová | 0,042 | |
| Kyselina lipoová | 0,105 | |
| Fenolová červená, sodná sůl | 8,63 | |
| Putrescin 2 HCl | 0,081 | |
| Pyruvát sodný | 55,00 | |
| Thymidin | 0,365 |