DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 je široce uznávané a hojně využívané základní médium v buněčných kulturách pro biologický výzkum. Slouží jako základní zdroj živin pro růst různých savčích buněčných linií, zejména je-li doplněno fetálním bovinním sérem (FBS).
Toto jedinečné složení kombinuje Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) a Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) v přesném poměru 1:1. Přidání L-glutaminu dále vylepšuje jeho složení.
DMEM, odvozené od Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), nabízí ve srovnání se svým předchůdcem vyšší koncentraci aminokyselin a vitamínů. Naproti tomu Ham's F-12 vychází z média Ham's F-10 a poskytuje doplňující sadu esenciálních složek.
Pro podporu optimálního buněčného růstu je běžnou praxí doplňovat DMEM:Ham's F-12 frakcionovaným boviním sérem (FBS) v typické koncentraci 5–10 %. Tento přídavek je nezbytný, protože médiu chybí růstové hormony, lipidy a bílkoviny, které jsou pro buněčný vývoj zásadní.
DMEM:Ham's F12 obsahuje systém pH pufru a je často doplněno fenolovou červení, indikátorem pH. Kultivované buňky v DMEM:Ham's F12 nebo v jakémkoli médiu využívajícím bikarbonátový pufrovací systém vyžadují kontrolované prostředí s obsahem CO₂ v rozmezí 5–10 %, aby se udržela správná úroveň pH.
Kontrola kvality
- Sterilně filtrované
Skladování a trvanlivost
- Skladujte při teplotě +2 °C až +8 °C, chráněno před světlem.
- Po otevření skladujte při teplotě 4 °C a spotřebujte do 6–8 týdnů.
Podmínky přepravy
- Okolní teplota
Skladování
- Uchovávejte v chladničce při teplotě +2 °C až +8 °C na tmavém místě. Zabraňte zamrznutí a častému ohřívání na +37 °C, protože to snižuje kvalitu produktu.
- Nezahřívejte médium nad 37 °C ani nepoužívejte nekontrolované zdroje tepla, jako jsou mikrovlnné trouby.
- Pokud má být použita pouze část média, odeberte potřebné množství a před použitím jej ohřejte na pokojovou teplotu.
Složení
| Kategorie | Složky | Koncentrace (mg/l) |
| Aminokyseliny | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| Kyselina L-asparagová | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin 2 HCl | 31,29 | |
| Kyselina L-glutamová | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin HCl H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin HCl | 91,25 | |
| L-metionin | 17,24 | |
| L-fenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-threonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitamíny | D-biotin | 0,0035 |
| Cholin chlorid | 8,98 | |
| D-pantothenát vápenatý | 2,24 | |
| Kyselina listová | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoxin HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Thiamin HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Anorganické soli | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5 H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Ostatní složky | D-glukóza | 3151,00 |
| Hypoxanthin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Kyselina linolová | 0,042 | |
| Kyselina lipoová | 0,105 | |
| Fenolová červená, sodná sůl | 8,63 | |
| Putrescin 2 HCl | 0,081 | |
| Pyruvát sodný | 55,00 | |
| Thymidin | 0,365 |