CTX buňky

CTX (označovaná také jako CTX0E03) je podmíněně imortalizovaná linie lidských nervových kmenových buněk odvozená z kortikálního neuroepitelu lidského plodu v prvním trimestru těhotenství. Tato linie byla vytvořena retrovirovou integrací fúzního transgenu c-mycER^TAM, který řídí buněčnou proliferaci pouze v přítomnosti 4-hydroxytamoxifenu (4-OHT). V nepřítomnosti 4-OHT a v médiu bez mitogenů dochází u buněk CTX0E03 k zastavení růstu a k jejich diferenciaci na neurony a astrocyty, přičemž si zachovávají multipotentní diferenciační schopnost. Tato buněčná linie je klonální, má normální lidský karyotyp (46,XY) a byla vyvinuta za podmínek kompatibilních s GMP pro potenciální klinické použití.

CTX0E03 byla hodnocena v předklinických modelech ischemické cévní mozkové příhody (model MCAo u potkanů), kde implantované buňky podpořily významné zotavení senzomotorických funkcí. Tato linie vstoupila do fáze klinických studií zaměřených na léčbu cévní mozkové příhody. Používá se také jako in vitro model pro biologii neurálních kmenových buněk, diferenciaci kortikálních neuronů, výzkum Alzheimerovy choroby (studie toxicity Abeta) a neurofarmakologický screening. Díky systému podmíněné imortalizace je CTX0E03 obzvláště vhodný pro studie bezpečnosti a účinnosti, protože proliferaci lze zastavit odstraněním 4-OHT před transplantací.

CTX0E03 se kultivuje v médiu DMEM/F12 doplněném o N2, EGF (20 ng/ml) a FGF-2 (20 ng/ml) s 4-OHT (1 μM) na površích potažených lamininem při teplotě 37 °C v prostředí s 5 % CO₂. Pro diferenciaci se růstové faktory a 4-OHT odstraní. Tato linie je zařazena do úrovně biologické bezpečnosti 1 (v Německu GMO-S1 z důvodu integrovaného transgenu c-mycERTAM). Uživatelé by měli dodržovat platné předpisy týkající se GMO ve své jurisdikci.