Buňky HaCaT

Mrazicí médium CM-1 společnosti Cytion je nejmodernější kryokonzervační médium určené k zajištění nejvyšší úrovně životaschopnosti a funkčnosti buněk po rozmrazení. Toto univerzální médium je vhodné pro široké spektrum buněčných typů, včetně lidských i zvířecích buněk, což z něj činí základní nástroj pro různé výzkumné aplikace. Médium Freeze Medium CM-1, jehož složení obsahuje pečlivě vyváženou kombinaci kryoprotektantů a základních živin, minimalizuje tvorbu ledových krystalů a buněčný stres během procesu zmrazování, čímž zachovává buněčnou integritu.
Mezi hlavní vlastnosti Freeze Medium CM-1 patří:

Široká kompatibilita: Účinné pro širokou škálu buněčných typů, včetně primárních buněk, kmenových buněk a zavedených buněčných linií.
Vysoká životaschopnost: Optimalizováno pro maximální obnovu a životaschopnost buněk po rozmrazení, což zajišťuje spolehlivé výsledky experimentů.
Připraveno k použití: Pohodlně připravené a sterilizované pro okamžité použití, což zkracuje dobu přípravy a snižuje riziko kontaminace.
Zvýšená stabilita: Udržuje konzistentní výkonnost za standardních podmínek kryokonzervace a zajišťuje reprodukovatelné výsledky.
Dlouhá skladovatelnost: CM-1 je médium pro kryokonzervaci obsahující sérum, připravené k použití, které lze uchovávat v chladničce až jeden rok.


Použití přípravku CM-1 ke zmrazování buněk

Chcete-li použít CM-1 ke zmrazení adherentních i suspenzních buněk, postupujte podle následujících kroků

Pro adherentní buňky je omyjte a oddělte od kultivačního substrátu. U suspenzních buněk přejděte přímo k dalšímu kroku.
Spočítejte buňky, abyste zajistili jejich správnou koncentraci.
Odstřeďte buňky, abyste je peletovali, a poté je znovu rozpusťte v mrazicím médiu CM-1.
Resuspendované buňky přeneste do kryovialek.
Před přenosem buněk do dlouhodobého skladu použijte metodu pomalého zmrazování





Metoda
Popis
Kroky





❄️
Ruční zmrazení

Postupná metoda zahrnující postupné snižování teploty pro zajištění životaschopnosti buněk

1️⃣ Umístěte buňky do mrazicího média do mrazničky o teplotě 4 °C na 40 minut.
2️⃣ Přeneste na 24 hodin do mrazničky o teplotě -80 °C.
3️⃣ Pro dlouhodobé uchování uchovávejte buňky v tekutém dusíku



❄️
Použití přístroje Mr. Frosty

Praktické zařízení, které umožňuje řízenou rychlost zmrazování bez použití elektrické energie

1️⃣ Připravte buňky do kryovialek s mrazicím médiem.
2️⃣ Umístěte kryovialy do nádoby Mr. Frosty.
3️⃣ Před přenesením do kapalného dusíku uchovávejte při teplotě -80 °C po dobu 24 hodin



❄️
Mraznička s řízenou rychlostí

Vysoce přesný mrazák od společnosti Thermo Fisher nebo jiných výrobců určený k řízenému snižování teploty

1️⃣ Zařízení naprogramujte tak, aby postupně snižovalo teplotu.
2️⃣ Vložte připravené buňky do mrazničky.
3️⃣ Po skončení mrazicího cyklu přeneste buňky do tekutého dusíku









Kryovaky skladujte při teplotě nižší než -130 °C nebo v kapalném dusíku pro dlouhodobé uchování.


Složení

Obsahuje FBS, DMSO, glukózu, soli
Pufrovací schopnost: pH = 7,2 až 7,6


Mrazicí médium CM-1 společnosti Cytion nabízí spolehlivé řešení pro kryokonzervaci, které zajišťuje vysokou životaschopnost a funkčnost buněk po rozmrazení pro širokou škálu výzkumných aplikací.

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) je vysoce univerzální a široce používané základní médium určené k podpoře růstu různých savčích buněk v biologickém výzkumu. Slouží jako ideální médium pro kultivaci primárních fibroblastů, neuronů, gliových buněk, HUVEC, buněk hladkého svalstva a také oblíbených buněčných linií jako HeLa, 293, Cos-7 a PC-12.
DMEM se od ostatních médií liší svým jedinečným složením. Obsahuje působivé čtyřnásobné zvýšení koncentrace aminokyselin a vitaminů ve srovnání s původním Eagle's Minimal Essential Medium. DMEM bylo původně vyvinuto s nízkým obsahem glukózy (1 g/l) a pyruvátu sodného, ale často se používá s vyššími hladinami glukózy, buď s pyruvátem sodným, nebo bez něj. DMEM zejména neobsahuje proteiny, lipidy ani růstové faktory, což vyžaduje doplňování. Pro dosažení optimálního růstu je běžným přístupem doplnění DMEM 10% fetálním hovězím sérem (FBS). Kromě toho DMEM používá pufrový systém hydrogenuhličitanu sodného, který vyžaduje 5-10% prostředí CO2 pro udržení fyziologického pH.
Dulbeccovo modifikované médium Eagle (DMEM) je vysoce ceněno mezi definovanými médii pro buněčné a tkáňové kultury, které uspokojuje potřeby růstu různých fenotypů adherentních buněk. Překonává původní Eagleovo médium, vyvinuté v 50. letech 20. století pro kultivaci kuřecích buněk, díky vylepšenému doplňkovému složení známému jako Dulbeccova modifikace. Tato modifikace výrazně zvyšuje obsah vybraných aminokyselin a vitaminů až čtyřnásobně ve srovnání s původním médiem.
V oblasti buněčných kultur hraje DMEM zásadní roli jako růstové médium pro různé typy buněk, včetně primárních buněk, kmenových buněk a transformovaných buněk. Výzkumníci také používají modifikovanou verzi DMEM pro širokou škálu výzkumných aplikací, jako je objevování léčiv, tkáňové inženýrství a studium buněčných signálních drah.

Kontrola kvality

Sterilně filtrovaný


Skladování a doba použitelnosti

Skladujte při teplotě +2 °C až +8 °C, chráněné před světlem.
Po otevření skladujte při 4 °C a spotřebujte do 6-8 týdnů.


Přepravní podmínky

Okolní teplota


Údržba

Uchovávejte v chladu při teplotě +2°C až +8°C v temnu. Vyhněte se zmrazování a častému zahřívání na +37 °C, protože to snižuje kvalitu výrobku.
Nezahřívejte médium na teplotu vyšší než 37 °C a nepoužívejte nekontrolované zdroje tepla, jako jsou mikrovlnné spotřebiče.
Pokud má být použita pouze část média, odeberte požadované množství a před použitím jej zahřejte na pokojovou teplotu.


Složení



Kategorie
Složky
Koncentrace (mg/l)


Aminokyseliny
Glycin
30.00



L-Arginin HCl
84.00



L-Cystin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-histidin HClH2O
42.00



L-Isoleucin
105.00



L-leucin
105.00



L-Lysin HCl
146.00



L-methionin
30.00



L-fenylalanin
66.00



L-serin
42.00



L-Treonin
95.00



L-tryptofan
16.00



L-Tyrosin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valin
94.00


Vitamíny
Cholinchlorid
4.00



D-pantothenát vápenatý
4.00



Kyselina listová
4.00



myo-Inositol
7.20



Nikotinamid
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Thiamin HCl
4.00


Anorganické soli
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Ostatní složky
D-glukóza
4500.00



Sodná sůl fenolové červeně
15.90



Pyruvát sodný
110.00

Reagencie pro disociaci buněk Accutase
- šetrná alternativa trypsinu
Accutase je roztok pro oddělování buněk, který přináší revoluci v oblasti buněčných kultur. Jedná se o směs proteolytických a kolagenolytických enzymů, která napodobuje působení trypsinu a kolagenázy. Na rozdíl od trypsinu neobsahuje Accutase žádné savčí ani bakteriální složky a je mnohem šetrnější k buňkám, což z ní činí ideální řešení pro rutinní oddělování buněk od standardního plastového nádobí pro tkáňové kultury a plastového nádobí s adhezním povlakem. V tomto příspěvku na blogu se budeme zabývat výhodami a použitím přípravku Accutase a tím, jak mění pravidla hry v oblasti buněčných kultur.
Výhody přípravku Accutase
Přípravek Accutase má oproti tradičním roztokům trypsinu několik výhod. Zaprvé ji lze použít vždy, když je potřeba šetrně a účinně oddělit jakoukoli adherentní buněčnou linii, takže je přímou náhradou trypsinu. Za druhé, Accutase funguje velmi dobře na embryonálních a neuronálních kmenových buňkách a bylo prokázáno, že zachovává životaschopnost těchto buněk i po pasážování. Za třetí, Accutase zachovává většinu epitopů pro následnou analýzu průtokovou cytometrií, takže je ideální pro analýzu markerů buněčného povrchu.
Navíc Accutase nemusí být při pasážování adherentních buněk neutralizována. Přidání dalšího média po rozdělení buněk Accutase zředí, takže již není schopna buňky oddělit. Tím se eliminuje nutnost inaktivního kroku a šetří se čas techniků buněčných kultur. A konečně, Accutase se nemusí alikvotovat a lahvička je stabilní v chladničce po dobu 2 měsíců.
Použití přípravku Accutase
Accutase je přímou náhradou roztoku trypsinu a lze ji použít k pasážování buněčných linií. Kromě toho se Accutase dobře osvědčuje při oddělování buněk pro analýzu mnoha povrchových buněčných markerů pomocí průtokové cytometrie a pro třídění buněk. Další následné aplikace ošetření Accutase zahrnují analýzu povrchových markerů buněk, test růstu virů, buněčnou proliferaci, testy migrace nádorových buněk, rutinní pasážování buněk, škálování výroby (bioreaktor) a průtokovou cytometrii.
Složení přípravku Accutase
Accutase neobsahuje žádné savčí ani bakteriální složky a je směsí přírodních enzymů s proteolytickou a kolagenolytickou enzymovou aktivitou. Její složení je mnohem nižší než koncentrace trypsinu a kolagenázy, takže je méně toxická a šetrnější, ale stejně účinná.
Účinnost přípravku Accutase
Bylo prokázáno, že Accutase je účinná při oddělování primárních a kmenových buněk a udržování vysoké životaschopnosti buněk ve srovnání s enzymy živočišného původu, jako je trypsin. po 10 minutách je obnoveno 100 % buněk a díky autodigesci přípravku Accutase není na škodu ponechat buňky v přípravku Accutase až 45 minut.
Shrnutí
Závěrem lze říci, že Accutase je výkonné řešení, které mění pravidla hry v oblasti buněčných kultur. Díky své šetrnosti, účinnosti a všestrannosti je Accutase ideální alternativou trypsinu. Pokud hledáte spolehlivé a účinné řešení pro oddělování buněk, Accutase je řešením pro vás.

Přehled produktů
Objem: 100 ml Skladování: ≤-15 °C Sterilita: Sterilně filtrováno
Antibiotický/antimykotický roztok (100x ) je sterilní koncentrát připravený k použití, určený ke snížení rizika mikrobiální kontaminace v buněčných kulturách a příbuzných laboratorních aplikacích. Tento 100x roztok obsahuje osvědčenou kombinaci penicilinu, streptomycinu a amfotericinu B, která poskytuje široké spektrum antimikrobiální aktivity proti grampozitivním a gramnegativním bakteriím, kvasinkám a vláknitým houbám. Složení je vhodné pro použití v eukaryotických buněčných kulturách, bakteriálních médiích a dalších systémech citlivých na kontaminaci, což podporuje čistý a konzistentní laboratorní provoz.
Použití a výhody Tento roztok je optimalizován pro rutinní výzkumné protokoly a je široce používán k udržování aseptických podmínek v pracovních postupech buněčných kultur. Nabízí spolehlivý výkon v prostředí citlivém na kontaminaci a pomáhá výzkumníkům snížit riziko přemnožení mikroorganismů, aniž by bylo ohroženo zdraví buněk nebo reprodukovatelnost experimentů. Sterilně filtrované složení eliminuje potřebu dalších solubilizačních kroků, čímž podporuje zefektivnění přípravy médií a snižuje variabilitu každodenních laboratorních postupů.
Použití a kompatibilita Pro dosažení standardních pracovních koncentrací roztok nařeďte v poměru 1:100 do kompletního kultivačního média. Produkt je kompatibilní se širokou škálou savčích buněčných linií a základních médií. Díky stálé skladové dostupnosti mohou výzkumní pracovníci těžit ze spolehlivé kontinuity dodávek a zjednodušeného plánování logistiky. Roztok by měl být skladován při teplotě ≤ -15 °C a chráněn před opakovanými cykly zmrazování a rozmrazování, aby byla zachována jeho stabilita. Pouze pro výzkumné použití. Není určeno k použití při diagnostických nebo terapeutických postupech. Není určeno k použití u lidí nebo zvířat.

Roztok fyziologického roztoku s fosfátovým pufrem (PBS)
Fosfátem pufrovaný fyziologický roztok (PBS) je široce používaný pufrovací roztok v biologickém a chemickém výzkumu. Hraje klíčovou roli při udržování rovnováhy pH a osmolarity během různých experimentálních postupů, včetně zpracování tkání a buněčných kultur. Náš roztok PBS je pečlivě sestaven z vysoce čistých složek, aby byla zajištěna stabilita a spolehlivost při každém experimentu. Osmolarita a koncentrace iontů našeho roztoku PBS věrně kopíruje osmolaritu a koncentraci iontů v lidském těle, takže je izotonický a netoxický pro většinu buněk.

Složení našeho roztoku PBS
Náš roztok PBS je směs fosfátových pufrů a fyziologických roztoků ultračisté kvality s upraveným pH. V pracovní koncentraci 1X obsahuje:

8000 mg/l chloridu sodného (NaCl)
200 mg/l chloridu draselného (KCl)
1150 mg/L bezvodý fosforečnan sodný dvoubazický (Na2HPO4)
200 mg/L Fosforečnan draselný jednobazický bezvodý (KH2PO4)

Toto složení zajišťuje optimální pH a iontovou rovnováhu vhodnou pro širokou škálu biologických aplikací.

Aplikace našeho roztoku PBS
Náš roztok PBS je ideální pro různé aplikace v biologickém výzkumu. Díky svým izotonickým a netoxickým vlastnostem je vhodný pro ředění látek a oplachování buněčných nádob. Roztoky PBS s obsahem EDTA jsou účinné pro uvolnění připojených a shlukovaných buněk. Do PBS by se však neměly přidávat dvojmocné kovy, jako je zinek, protože mohou způsobit srážení. V takových případech se doporučují Goodovy pufry. Kromě toho je náš roztok PBS přijatelnou alternativou virového transportního média pro transport a skladování RNA virů, včetně SARS-CoV-2.

Kontrola kvality

Sterilně filtrované


Skladování a doba použitelnosti

Skladujte při teplotě +2 °C až +25 °C, chráněné před světlem.
Po otevření skladujte při teplotě 2 °C až 25 °C a spotřebujte do 24 měsíců.


Přepravní podmínky

Okolní teplota


Údržba

Uchovávejte v chladu při teplotě +2°C až +8°C v temnu. Vyhněte se zmrazování a častému zahřívání na +37 °C, protože to snižuje kvalitu výrobku.
Nezahřívejte médium na teplotu vyšší než 37 °C a nepoužívejte nekontrolované zdroje tepla, jako jsou mikrovlnné spotřebiče.
Pokud má být použita pouze část média, odeberte požadované množství a před použitím jej zahřejte na pokojovou teplotu.

Složení



Kategorie
Složky
Koncentrace (mg/l)


Soli
Chlorid draselný
200



Fosforečnan draselný monobazický bezvodý
200



Chlorid sodný
8000



Fosforečnan sodný dvoubazický bezvodý
1150

Organismus	Člověk
Tkáň	Předkožka