Buňky HT55

HT55 je lidská buněčná linie adenokarcinomu konečníku, která byla izolována z primárního nádoru konečníku 54leté ženy kavkazského původu. Tato linie roste jako adhezivní monovrstva s epiteliální morfologií a je zaregistrována v databázi Cellosaurus pod označením CVCL_1294. HT55 nese několik heterozygotních a homozygotních mutací s ztrátou funkce v tumor supresorovém genu APC (adenomatózní polypóza tlustého střeva), včetně p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr a p.Lys241Ter (všechny heterozygotní), stejně jako homozygotní substituci p.Arg213Leu. Díky tomuto mutačnímu profilu je HT55 biologicky relevantním modelem karcinogeneze tlustého střeva a konečníku řízené genem APC, který odráží dysregulaci kanonické WNT dráhy, která je příčinou většiny případů kolorektálního karcinomu u lidí.

HT55 se široce používá ve výzkumu kolorektálního karcinomu pro studie WNT/β-kateninové signalizace, funkce tumor-supresorového genu APC, citlivosti a rezistence na léky a pro předklinické hodnocení cílených látek namířených proti složkám WNT signální dráhy. Tato linie je vhodná pro in vitro farmakologické testy a studie xenotransplantátů v myších modelech s oslabenou imunitou, čímž poskytuje adhezivní a snadno ovladatelnou in vitro platformu pro mechanistický a translační výzkum kolorektálního karcinomu. Díky přítomnosti několika mutací způsobujících zkrácení genu APC je linie HT55 reprezentativní pro mikrosatelitově stabilní, chromozomálně nestabilní podtyp kolorektálního karcinomu, který je běžně způsoben ztrátou funkce genu APC.

HT55 se kultivuje v médiu EMEM (MEM Eagle, w: 2 mM L-glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO₃, w: EBSS; číslo artiklu Cytion 820100a) doplněném 10 % FBS při teplotě 37 °C ve zvlhčené atmosféře s 5 % CO₂. Buňky se subkultivují pomocí Accutase, když dosáhnou přibližně 80–90 % konfluence, s doporučeným poměrem dělení 1:3 až 1:5 a výsevní hustotou 1–3 × 10⁴ buněk/cm². Médium se obnovuje každé 2–3 dny. Doba zdvojnásobení je přibližně 28 hodin.