Клетки SiHa – хвърляне на светлина върху изследванията в областта на рака на шийката на матката

Клетките SiHa са клетки от рак на шийката на матката, широко използвани в биомедицинските изследвания. Те са отлични гостоприемници за трансфекция и поради това са подходящи за изследвания на генната експресия. Поради човешкия си произход и връзката им с рака на шийката на матката, тези клетки се използват предимно в изследвания в областта на биологията на рака, вирусологията и разработването на лекарства.

📋 Клетъчна линия SiHa — кратки факти

Среда за отглеждане: За идеалния растеж на SiHa клетките се използва минимална есенциална среда на Игъл (EMEM), съдържаща 10% FBS, 2 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3 и балансиран солев разтвор на Ърл (EBSS). Средата се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Време за удвояване: Времето за удвояване на SiHa клетките е приблизително 17 часа.
Тип растеж: SiHa е адхезивна клетъчна линия.
Ниво на биологична безопасност: BSL-1
Налична от: Cytion — Поръчайте SiHa

Общи характеристики и произход на клетките SiHa

Разбирането на произхода и общите характеристики на клетъчната линия е от решаващо значение, тъй като това влияе върху нейното използване във вашите изследвания. В тази част от статията ще научите за произхода на клетъчната линия SiHa, нейните отличителни характеристики и много други неща: Какво представлява раковата клетъчна линия SiHa? Какви са HPV-позитивните SiHa клетки? Какъв е произходът на клетъчната линия SiHa? Каква е морфологията на SiHa?

SiHa, клетъчната линия на карцином на шийката на матката, е получена от фрагменти от първична биопсия на матката на азиатка (на 55 години) с плоскоклетъчен рак [1].
Клетъчната линия SiHa показва хипертриплоиден кариотип. Повечето клетки имат среден брой хромозоми между 69 и 72. Около 24% от клетките обаче притежават модален брой хромозоми от 71.
Клетките SiHa са положителни за човешки папиломен вирус 16. Те показват интеграция на около 1 до 2 копия от генома на HPV на клетка [2].
Тези клетки от рак на шийката на матката имат епителна морфология.

Деление на раковите клетки HeLa от шийката на матката под микроскоп.

Клетъчна линия SiHa: Информация за култивирането

Поддържането на култура от клетъчна линия не е лесно, докато не се запознаете с всички ключови моменти при култивирането ѝ. Трябва да знаете: Какво е времето за удвояване на SiHa? Каква е средата за култивиране на SiHa? Как се култивира клетъчната линия SiHa?

Ключови моменти при култивирането на SiHa клетки

Време за удвояване:: Времето за удвояване на SiHa клетките е приблизително 17 часа.
Адхезивни или в суспензия:: SiHa е адхезивна клетъчна линия.
Съотношение при субкултивиране:: Съотношението на субкултивиране за SiHa клетките е 1:2 до 1:4. За пасажиране адхезивните клетки се изплакват с 1x PBS. Добавя се разтвор на Accutase и клетките се инкубират в продължение на 8 до 10 минути при стайна температура. След това се добавя културална среда и клетките се центрофугират. Клетъчният пелетен остатък се ресуспендира и клетките се прехвърлят в нова колба за култивиране.
Среда за растеж:: За идеалния растеж на SiHa клетките се използва минимална есенциална среда на Игъл (EMEM), съдържаща 10% FBS, 2 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3 и балансиран солев разтвор на Ърл (EBSS). Средата се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за отглеждане:: Клетките SiHa се поддържат в овлажнен инкубатор при 37 °C с подаване на 5% CO₂.
Съхранение:: Флаконите с замразената клетъчна линия SiHa за рак на шийката на матката се съхраняват при температура под -150 °C в електрически фризер или в парофазата на течен азот за по-дълъг период.
Процес на замразяване и среда:: За замразяването на SiHa клетки се използва среда за замразяване CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват чрез метод на бавно замразяване, който позволява понижение на температурата само с 1 °C на минута, за да се запази жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване:: Замразените клетки се държат от 40 до 60 секунди във водна баня при 37 °C, докато остане малък леден буцик. След това се добавя свежа среда за отглеждане и клетките се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. Клетъчният пелетен остатък се ресуспендира и клетките се прехвърлят в културална колба за отглеждане.
Ниво на биологична безопасност:: За работа с и поддържане на клетъчни култури от SiHa се изисква лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

Siha cells

Слой от прилепнали SiHa клетки при 10× и 20× увеличение.

Предимства и недостатъци на клетъчната линия SiHa

Подобно на други човешки карциномни клетъчни линии, SiHa също притежава някои отличителни характеристики, свързани с определени предимства и недостатъци. Тук сме обсъдили няколко значими от тях.

Предимства на клетъчната линия SiHa за рак на шийката на матката

Модел на рак на шийката на матката
- Произхожда от плоскоклетъчен карцином на шийката на матката.
- Използва се за изучаване на механизмите, растежа и развитието на рака на шийката на матката.
- Експресира гените p53+ и pRB+, които са свързани с репарацията на ДНК, регулацията на клетъчния цикъл и потискането на тумори.
Туморогенен потенциал
- Клетките SiHa са туморогенни и могат да предизвикат слабодиференцирани епидермоидни тумори от III степен при голи мишки.
- Използват се за in vivo изследвания на рака и тестване на противоракови терапии.

Недостатъци на SiHa клетките

Скорост на пролиферация
- Клетките SiHa се размножават бързо, което води до прекомерно разрастване.
- Изискват често пресаждане, което увеличава риска от генетична нестабилност, което с течение на времето може да повлияе на поведението на клетките.

Приложения на клетъчната линия SiHa в научните изследвания

Клетъчната линия SiHa се използва широко в изследванията на рака на шийката на матката. Тук се разглеждат няколко конкретни приложения на тази клетъчна линия.

Изследвания, свързани с човешкия папиломен вирус (HPV): Клетките SiHa са HPV 16-позитивни, поради което са ценен източник за изучаване на инфекцията с човешки папиломен вирус, нейните молекулярни механизми и ролята ѝ в развитието и прогресирането на рака на шийката на матката. Изследователите използват тези клетки и за проучване на вирусната репликация, интеграция и влиянието ѝ върху процесите в клетката-гостоприемник. В проучване, проведено през 2020 г., клетъчната линия SiHa беше използвана за изследване на ролята на онкопротеините E6/E7 на HPV в развитието на рака на шийката на матката чрез тяхното инхибиране с помощта на CRISPR-технологията. Резултатите показаха, че потискането на гените E6/E7 води до инхибиране на растежа на SiHa-клетките и до апоптоза. Следователно тези вирусни гени могат да служат като ключови мишени за разработване на терапии срещу рака на шийката на матката, свързан с HPV [3].
Биология на рака: Клетките SiHa служат като безценен модел за изучаване на биологията на рака на шийката на матката, включително развитието, прогресията, метастазирането и инвазията на рака. Изследователите използват тези клетки, за да проучват генетичните мутации и основните молекулярни пътища, допринасящи за развитието и растежа на рака на шийката на матката; например, в едно проучване, използващо SiHa клетки, беше установено, че повишената експресия на SEC61G (гама-субединица на SEC61 транслокона) стимулира пролиферацията на раковите клетки на шийката на матката чрез активиране на MAPK каскадата [4].
Скрининг и тестване на лекарства: SiHa е широко използвана клетъчна линия за рак на шийката на матката за оценка на ефикасността на потенциални противоракови лекарства, специфични за рака на шийката на матката, свързан с HPV. Изследователите проучват антипролиферативния, апоптотичния и антиметастатичния потенциал на лекарствата, като използват тези клетки. Пример за това е проучване, проведено през 2019 г., което изследва цитотоксичния потенциал на екстракти от плодове на Vatica diospyroides Symington тип SS върху клетъчната линия SiHa за рак на шийката на матката [5].

Клетки SiHa за вашите научни изследвания!

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305023

Научни публикации, посветени на клетките SiHa

Някои значими и често цитирани научни публикации представят клетъчната линия SiHa за плоскоклетъчен карцином на шийката на матката.

Антитуморният ефект на алое-емодин върху клетките на рака на шийката на матката е свързан с човешкия папиломен вирус E6/E7 и метаболизма на глюкозата

Тази публикация в списанието „OncoTargets and Therapy“ (2019 г.) предлага хипотезата, че естественото съединение алое-емодин оказва апоптотични ефекти, свързани с HPV E6/E7 и метаболизма на глюкозата, върху клетките на рак на шийката на матката SiHa.

Оценка на противораковия потенциал на екстракт от листата на Excoecaria agallocha (L.) върху клетъчната линия на рак на шийката на матката при човека (SiHa) и оценка на основния механизъм на действие

Тази статия е публикувана в списанието „Future Journal of Pharmaceutical Sciences“ през 2022 г. В това проучване са изследвани противотуморните свойства на екстракта от листата на растението Excoecaria agallocha (L.) върху клетъчната линия SiHa на рак на шийката на матката.

Антипролиферативен ефект на 1,10-фенантролин, свързан със сулфатирани наночастици от ZnO, върху клетъчната линия SiHa на рак на шийката на матката

Това проучване, публикувано в списанието „Journal of Sol-Gel Science and Technology“ (2022 г.), предлага хипотезата, че молекулата 1,10-фенантролин, след свързване с наночастици от цинков сулфат, проявява значителен антипролиферативен ефект върху клетките SiHa.

Астрагалозид IV инхибира инвазията и метастазирането на клетките на рак на шийката на матката SiHa чрез TGF‑β1-медиираните PI3K и MAPK пътища

Това изследване беше публикувано в списанието „Oncology Reports“ през 2019 г. Проучването разкри, че астрагалозид IV, естествен продукт, потиска миграцията и инвазията на SiHa клетките чрез модулиране на TGF‑β1-медиираните PI3K и MAPK сигнални пътища.

IFI16 стимулира прогресията на рака на шийката на матката чрез повишаване на експресията на PD-L1 в имуномикросредата чрез STING-TBK1-NF-kB пътя

Това проучване, публикувано в списанието „Biomedicine & Pharmacotherapy“ (2020 г.), разкри, че IFI16 (интерферон-гама-индуцируем протеин 16) регулира гена PD-L1 чрез активиране на STING-TBK1-NF-kB пътя, за да стимулира растежа на раковите клетки SiHa на шийката на матката.

Ресурси за клетъчната линия SiHa: протоколи, видеоклипове и други

Ето някои онлайн ресурси, посветени на клетките SiHa.

Трансфекция на SiHa клетки: Тази научна статия съдържа протокол за поддържане на SiHa клетки от рак на шийката на матката и за трансфекция на SiHa клетки.

Следният линк съдържа информация за клетъчната култура на SiHa клетките.

Клетъчна линия SiHa: Този уебсайт съдържа много ценни данни за клетъчната линия SiHa. Това включва информация за среди за растеж, условия за култивиране, протоколи за субкултивиране на клетки SiHa и работа с пролиферативни и криоконсервирани култури.

Често задавани въпроси за клетките на шийния карцином SiHa

Източници

Melzer, C., J. von der Ohe и R. Hass, Кратък преглед: взаимодействието между мезенхимната строма/стволоподобните клетки и раковите клетки предлага терапевтичен потенциал. Stem cells, 2018. 36(7): стр. 951-968.
Островска, К.М. и др., Изследване на влиянието на човешкия папиломен вирус с висок риск върху биохимичния състав на раковите клетки на шийката на матката чрез вибрационна спектроскопия. Analyst, 2010. 135(12): стр. 3087–3093.
Чен, Й., и др., Инхибиране на растежа in vitro и in vivo на човешки ракови клетки на шийката на матката чрез разцепване на мРНК на E6/E7 на човешкия папиломен вирус посредством системата CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: стр. 104794.
Фан, Й., и др., SEC61G стимулира пролиферацията на рака на шийката на матката чрез активиране на MAPK сигналния път. Disease Markers, 2022. 2022.
Чотипират, А., и др., Противораков потенциал на плодови екстракти от Vatica diospyroides тип Symington SS и тяхното въздействие върху програмираната клетъчна смърт на клетъчни линии на рак на шийката на матката. The Scientific World Journal, 2019. 2019.