Клетки RBL-2H3 – Значение на RBL-2H3 за алергичната реакция и имунологичните изследвания
Клетъчната линия RBL-2H3 е клетъчна линия от базофилна левкемия, получена от плъхове, която се използва в имунологичните изследвания. Тя служи като моделна система за изучаване на физиологията, поведението и функциите на мастоцитите. Тези клетки се използват също за изучаване на алергични реакции, имунологични процеси, както и за тестване и разработване на лекарства.
- Среда за отглеждане
- За култивиране на клетките RBL-2H3 се използва среда EMEM, съдържаща 10% FBS, 2 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3 и EBSS сол. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на мастоцитите RBL-2H3 е приблизително 50–60 часа.
- Тип растеж
- RBL-2H3 е адхезивна клетъчна линия.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-2
- Налична от
- Cytion — Поръчайте RBL-2H3
- Клетки RBL-2H3: Произход и общи характеристики
- Клетки RBL-2H3: Информация за култивиране
- Предимства и ограничения на базофилната клетъчна линия RBL-2H3
- Клетъчна линия RBL-2H3: Краеъгълен камък в имунологичните изследвания
- Клетъчна линия RBL-2H3: Важни често задавани въпроси за изследователи
- Източници
- Клетъчна линия RBL-2H3 за напреднали имунологични изследвания
- Клетки RBL-2H3: Научни публикации
- Ресурси за клетъчната линия RBL-2H3: протоколи, видеоклипове и др.
- Често задавани въпроси
Клетки RBL-2H3: Произход и общи характеристики
Преди да използвате клетъчна линия от базофили в изследванията си, трябва да знаете нейния произход и общите й характеристики. В тази част от статията ще намерите основна информация за клетките RBL-2H3. Например: Какви са мастоцитите RBL-2H3? Защо да използвате клетки RBL-2H3? Какви са клетките RBL-2H3 при базофилната левкемия при плъхове? Каква е морфологията на RBL-2H3? Клетките RBL-2H3 безсмъртни ли са?
- RBL-2H3 са клетки от базофилна левкемия, получени от базофилни клетки на плъхове от породата Wistar през 1978 г. в Лабораторията по имунология към Националния институт за стоматологични изследвания.
- Клетките RBL-2H3 притежават рецептори за тирозин киназа c-kit и протеаза II на мастоцитите (RMCP-II), което ги превръща в потенциален модел на мастоцити. Поради това те обикновено се наричат мастоцити, въпреки че произхождат от базофили на плъхове [1].
- При активиране те освобождават хистамин и други медиатори и експресират IgE-рецептори с висока афинитет.
- Клетките RBL-2H3 имат фибробластоподобна морфология.
Клетки RBL-2H3: Информация за култивиране
Този раздел ще ви помогне да научите някои ключови аспекти при култивирането на клетъчната линия RBL-2H3. Ще разберете: Какво е времето за удвояване на клетките RBL-2H3? Каква е плътността на засяване на клетките RBL-2H3? Какъв е протоколът за култивиране на клетките RBL-2H3? Каква е средата за замразяване на клетъчната линия RBL-2H3?
Ключови моменти при култивирането на клетки RBL-2H3
Време за удвояване на популацията:
Времето за удвояване на мастоцитите RBL-2H3 е приблизително 50–60 часа.
Адхезивна или в суспензия:
RBL-2H3 е адхезивна клетъчна линия.
Съотношение при субкултивиране:
За клетките RBL-2H3 съотношението на разделяне се поддържа между 1:2 и 1:4. Адхезивните клетки се промиват с 1 x PBS разтвор, свободен от магнезий и калций. Добавя се разтвор за пасажиране Accutase и клетките се оставят при стайна температура за 10 минути, за да се отлепят от дъното на културалния съд. Добавя се свежа среда и клетките се центрофугират. Събраните клетки се ресуспендират внимателно в свежа среда и се прехвърлят в нови колби, съдържащи среда за растеж.
Среда за растеж:
За култивиране на клетките RBL-2H3 се използва среда EMEM, съдържаща 10% FBS, 2 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO₃ и EBSS сол. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж:
Клетките RBL-2H3 се култивират във влажен инкубатор, настроен на температура 37 °C и свързан с източник на 5% CO₂.
Съхранение:
Клетките се съхраняват във фазата на пари на течен азот или при температура под -150 °C в електрически фризер, за да се запази жизнеспособността на клетките в дългосрочен план.
Процес на замразяване и среда:
За замразяването на клетките RBL-2H3 се използват замразяващи среди CM-1 или CM-ACF чрез процес на бавно замразяване. Накратко, този метод позволява понижение на температурата с 1 °C на минута и предпазва клетките от термичен шок.
Процес на размразяване:
Клетките RBL-2H3 се размразяват в предварително настроена водна баня (37 °C) за приблизително 60 секунди. След това клетките се добавят към свежа културална среда и се центрофугират. Тази стъпка е от съществено значение за отстраняване на компонентите на средата за замразяване. След това клетъчният пелетен остатък се ресуспендира в среда за растеж, а клетките се прехвърлят в колба за култивиране.
Ниво на биологична безопасност:
Клетките RBL-2H3 трябва да се съхраняват в лаборатории с ниво на биологична безопасност 1.
Публикувано: 2023 г. | Последно преразгледано: май 2026 г.
Предимства и ограничения на клетъчната линия RBL-2H3 от базофили
Клетките RBL-2H3 се използват широко в имунологичните изследвания. В този раздел са описани основните им предимства и ограничения.
Предимства
- Лесни за култивиране: Клетките RBL-2H3 могат лесно да се култивират и поддържат в лабораторна среда. Това улеснява провеждането на икономически ефективни и възпроизводими експерименти, което ги прави популярен избор за начални изследвания в областта на имунологията.
Ограничения
- Нечовешки произход: Произхождащи от базофили на плъхове, клетките RBL-2H3 може да не имитират точно човешките биологични процеси, което може да ограничи приложимостта им в изследвания, специфични за човека. Това налага предпазливо тълкуване на данните при екстраполиране на резултатите към човешките системи.
- Опростен модел на мастоцитите: Въпреки че тези клетки предоставят основен модел за изучаване на функциите на мастоцитите, те не отразяват напълно сложната природа на взаимодействията на мастоцитите в човешката имунна система. Следователно те може да не моделират адекватно многостранните роли на мастоцитите в имунните реакции или при заболявания in vivo.
Клетъчна линия RBL-2H3: Краеъгълен камък в имунологичните изследвания
Изследвания на базофилите и мастоцитите с използване на клетъчната линия RBL-2H3
Клетъчната линия RBL-2H3, получена от Rattus norvegicus, служи като ключов модел за изучаване на биологията на базофилите и мастоцитите. Тези мастоцити от плъхове предоставят съществена информация за освобождаването на медиатори от мастоцитите, което е от решаващо значение за разбирането на алергични състояния като алергичния ринит. Чрез тези клетки изследователите проучват динамиката на клетъчните рецептори и образуването на имунологични синапси, които са от централно значение за реакцията на имунната система към алергени. Интересно проучване, публикувано през 2019 г., използва клетъчната линия RBL-2H3 и изследва механизмите, стоящи зад псевдоалергичните реакции, предизвикани от инжектирането на Qingkailing. Проучването установи, че сигналната каскада PI3K-RAC1 частично предизвиква тази алергична реакция в клетките [2].
Динамика на имунологичните синапси в изследванията на алергиите
Широко използвани в имунологичните изследвания, клетките RBL-2H3 са особено ефективни за проучване на динамиката на имунологичните синапси. Това спомага за изясняване на комуникационните процеси в имунната система, като намира приложение при изследването както на мастоцитите в периферната кръв, така и на тези в перитонеалната течност. Такива изследвания са от жизненоважно значение за цялостното разбиране на имунния отговор както в системни, така и в локализирани контексти.
Скрининг на лекарства и тестване за токсичност
При скрининга и тестването на лекарства се използва реактивността на RBL-клетките към различни стимули, включително проучването на това как H₂O₂ инхибира IgE-медиираните реакции. Тези клетки играят съществена роля в разработването на лечения за заболявания като стрептококови инфекции, при които стрептококите от групата „mitis“ инхибират активирането на мастоцитите. Освен това изследователите оценяват токсичните ефекти на различни вещества, включително химикали, лекарства и наночастици, като използват този модел на RBL 2H3 mc. Например, в едно скорошно проучване (2022 г.) е оценена цитотоксичността на микропластмаси от полистирен върху RBL-2H3 клетки. Учените са установили, че микропластмасите увреждат органелите на RBL-2H3 клетките и предизвикват клетъчна смърт [3]. Друго проучване от 2021 г. оцени антиалергичния и противовъзпалителния потенциал на естествения продукт неферин, като използва модела RBL 2H3 mc. Проучването разкри добрите антиалергични и противовъзпалителни свойства на съединението [4].
Усъвършенствани методологии за имунологични измервания
Постоянното и измеримо освобождаване на медиатори от клетките RBL-2H3 ги прави идеални за удобна флуориметрия, което улеснява прецизните и точни измервания, които са от решаващо значение за изследването на заболявания и оценката на терапевтични средства.
Клетъчната линия RBL-2H3, произхождаща от Rattus norvegicus, е безценен ресурс както за фундаментални, така и за приложни изследвания в областта на имунологията. Тя предлага значителни възможности за разширяване на знанията ни и за лечението на имунологични заболявания.
Клетъчна линия RBL-2H3 за напреднали имунологични изследвания
Клетки RBL-2H3: Научни публикации
Ето някои интересни научни публикации, посветени на мастоцитите RBL-2H3:
Инхибиторна активност на нарирутин върху дегранулацията на RBL-2H3 клетки
Тази научна статия е публикувана в списанието „Immunopharmacology and Immunotoxicology“ (2021 г.). Проучването предполага, че нарирутинът, естествено съединение, оказва инхибиторно действие върху дегранулацията на RBL-2H3 чрез регулиране на NF-κB, MAPK и сигналния път на тирозин киназата.
Това изследване, публикувано в International Journal of Molecular Sciences (2020 г.), предполага, че съединението апигенин значително потиска алергичните и възпалителните реакции на клетките RBL-2H3 и RAW264.7. Следователно то може да служи като потенциално средство за борба с имунологично обусловени заболявания.
В тази научна статия, публикувана в списанието „International Journal of Molecular Sciences“ (2021 г.), са оценени антиалергичните и противовъзпалителните ефекти на естествения продукт сапонарин, като са използвани различни клетъчни линии, включително RBL-2H3.
Това проучване, публикувано в списанието „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2014 г.), установи, че екстрактите от „Бенчалокавичиан“ и някои от активните му съставки оказват потенциално инхибиторно действие върху освобождаването на β-хексозаминидаза от клетките RBL-2H3.
Тази статия беше публикувана през 2018 г. в списанието „International Journal of Biological Macromolecules“. Проучването посочва, че спирулина максима, естествен продукт, инхибира дегранулацията на RBL 2H3, като предотвратява фосфорилирането на MAPKs и AKT.
Ресурси за клетъчната линия RBL-2H3: протоколи, видеоклипове и др.
RBL-2H3 е широко използвана линия мастоцити. Наличните ресурси, обхващащи протоколите за култивиране и трансфекция на RBL-2H3, са посочени тук:
- Модел на мастоцити RBL 2H3: Тази научна статия съдържа протоколи за поддържане на култури от RBL-2H3 и за трансфекция на RBL-2H3.
Ето някои ресурси, обясняващи протокола за култивиране на клетки RBL-2H3:
- Клетки RBL-2H3: Този уебсайт е полезен за запознаване с протоколите за клетъчна култура на клетъчната линия RBL-2H3. Освен това той съдържа информация за клетъчните среди за RBL-2H3 и условията за култивиране.
Клетъчна линия RBL-2H3: Основни често задавани въпроси за изследователи
Източници
- Passante, E. и N. Frankish, Клетъчната линия RBL-2H3: нейният произход и пригодност като модел за мастоцитите. Inflamm Res, 2009. 58(11): стр. 737-45.
- Li, Q. и др., Псевдоалергична реакция, предизвикана от инжекция с Qingkailing, частично чрез сигналния път PI3K-Rac1 в клетки RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): стр. 353-360.
- Liu, L., и др., Микро- (нано-) пластмасите от полистирен увреждат органелите на RBL-2H3 клетките и стимулират MOAP-1 да индуцира апоптоза. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: стр. 129550.
- Чиу, К.-М. и др., Антиалергични и противовъзпалителни ефекти на неферина върху клетките RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): стр. 10994.