Клетките на КС

777,00 €*

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300604

Информационен лист за безопасност

Продуктов лист

Споразумение за трансфер на материали

Описание	KC (Kc167) е ембрионална клетъчна линия на Drosophila melanogaster, получена от женски ембрион в стадий на дорзално затваряне, регистрирана в Cellosaurus под номер CVCL_Z833. Линията е създадена първоначално и се използва широко в клетъчната биология на Drosophila, генетичните скрининги и функционалната геномика. Клетките Kc167 са иммортализирани с SV40 и растат полуадхезивно, образувайки смесена популация от прикрепени и свободно плаващи клетки. Те са сред най-добре характеризираните клетъчни линии на Drosophila и са напълно подходящи за генетично заглушаване, медиирано от RNAi, което ги превръща в основен модел за скрининг с RNAi в целия геном в биологията на безгръбначните. Клетките KC намират приложение в клетъчната биология на Drosophila, скрининги с RNAi и CRISPR в целия геном, изследвания на пътищата за сигнална трансдукция (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), изследвания на вродения имунитет и сравнителни изследвания на еволюционно консервирани пътища. Напълно секвенираният и анотиран геном на Drosophila, в съчетание с обширните публични бази данни за RNAi реагенти (например DRSC/TRiP), прави KC-клетките особено мощно средство за безпристрастно функционално геномно откритие. Прилага се класификация BSL-2 поради иммортализацията с SV40. Клетките KC се култивират в среда на Шнайдер за Drosophila, допълнена с 2 mM глутамин и 10% FBS. Важно е да се отбележи, че клетъчните линии на Drosophila се култивират при 25 °C в атмосферен въздух без CO₂ (а не при 37 °C / 5% CO₂, както при клетките на бозайници). Клетките се пресаждат чрез леко ресуспендиране и разреждане (полуадхезивен растеж). Средата се подменя или клетките се разреждат на всеки 2–3 дни.
Организъм	Drosophila melanogaster (плодова муха)
Тъкан	Ембрион
Заболяване	Нормален
Място на метастазата	Ембрион (стадий на затваряне на гърба)
Приложения	Клетъчна биология на Drosophila; скрининг чрез RNAi на ниво геном; скрининг чрез CRISPR; сигнална трансдукция (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); вроден имунитет; функционална геномика на безгръбначните
Синоними	К.С., К.С.

Възраст	Етап на затваряне на гръбната част
Пол	Жена
Морфология	Полуадхезивен, подобен на епител
Тип на клетката	Ембрионални клетки
Свойства на растежа	полуприлепващ

Цитиране	KC (каталожен номер на Cytion 300604)
Ниво на биобезопасност	2
NCBI_TaxID	7227
CellosaurusАкцесия	CVCL_Z833
Статус на ГМО	GMO-S2: Тази клетъчна линия от Drosophila съдържа стабилно интегрирана касета за безсмъртност SV40. Необходимо е спазване на нивото на биологична безопасност BSL-2. Тази класификация важи само на територията на Германия и може да се различава в други държави.

Чувствителност към вируси	SV40 – безсмъртен

Среда за култивиране	Среда на Шнайдер за Drosophila + 2 mM глутамин + 10% фетално телешко серум (FBS).
Добавки	Добавете към средата 2 mM глутамин и 10% FBS
Реагент за дисоциация	Не се изисква (полуприлепващо; разбъркайте внимателно)
Време за удвояване	приблизително 24 до 48 часа
Субкултивиране	Внимателно прехвърлете културата с пипета, за да ресуспендирате полуадхезивните клетки. Прехвърлете подходящ обем в нова колба и добавете прясна, предварително затоплена среда на Шнайдер. Разредете до плътност от 5 × 10⁵ до 1 × 10⁶ клетки/мл. Инкубирайте при 25 °C на въздух без CO₂.
Съотношение на разделяне	от 1 до 3
Гъстота на засяване	от 5 × 10⁵ до 1 × 10⁶ клетки/мл
Подновяване на флуидите	На всеки 2 до 3 дни
Средство за замразяване	Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Размразяване и култивиране на клетките	Уверете се, че флаконът остава дълбоко замразен при доставката, тъй като клетките се транспортират със сух лед, за да се поддържат оптимални температури по време на транспортирането. При получаване или съхранявайте незабавно криовиолата при температури под -150 °C, за да осигурите запазване на клетъчната цялост, или преминете към стъпка 3, ако е необходимо незабавно култивиране. За незабавно култивиране бързо размразете флакона, като го потопите във водна баня с чиста вода и антимикробен агент с температура 37 °C, като разбърквате внимателно в продължение на 40-60 секунди, докато остане малка ледена бучка. Извършвайте всички следващи стъпки при стерилни условия в аспиратор, като преди отваряне дезинфекцирате криовиолата със 70% етанол. Внимателно отворете дезинфекцирания флакон и прехвърлете клетъчната суспензия в 15 ml центрофужна епруветка, съдържаща 8 ml хранителна среда със стайна температура, като разбъркате внимателно. Центрофугирайте сместа при 300 x g в продължение на 3 минути, за да отделите клетките, и внимателно изхвърлете супернатантата, съдържаща остатъчна замразяваща среда. Внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета в 10 ml прясна хранителна среда. За адхезивни клетки разделете суспензията между две колби Т25; за суспензионни култури прехвърлете цялата среда в една колба Т25, за да стимулирате ефективното взаимодействие и растеж на клетките. Придържайте се към установените протоколи за субкултивиране за непрекъснат растеж и поддържане на клетъчната линия, като гарантирате надеждни експериментални резултати.
Инкубационна атмосфера	25 °C, околен въздух (не се изисква CO₂).
Условия за доставка	Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед във валидирана, изолирана опаковка с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
Условия за съхранение	За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Ако имате намерение да използвате клетъчните линии Cytion единствено за вътрешни изследвания в един изследователски център, моля, попълнете и подпишете нашето Споразумение за прехвърляне на материали (MTA) и го изпратете заедно с поръчката си.

За всякакви търговски приложения – включително, но не само, работа срещу заплащане, тестове за контрол на качеството, пускане на продукти на пазара, диагностична употреба или регулаторни проучвания – моля, попълнете формуляра за предвидена употреба, за да можем да подготвим подходящо споразумение, съобразено с вашия проект.

Моля, имайте предвид: MTA се отнася само за определени клетъчни линии. Ако това уведомление и документът MTA се появяват на страницата на продукта, споразумението е приложимо. За клетъчни линии, които не са обхванати от MTA, няма да се показва препратка към споразумението. MTA не е валидно за клиенти в Америка, Китай или Тайван. Моля, свържете се с нашето представителство в САЩ, за да получите подходящото споразумение.

Клетките на КС

Обща информация

Характеристики

Регулаторни данни

Биомолекулярни данни

Работа с

Контрол на качеството и молекулярен анализ

Споразумение за трансфер на материали