Клетки Wilms3

800,00 €*

Продуктите се доставят замразени в сух лед в криоепруви. Всяка криоепрува обикновено съдържа 3 × 10 ⁶ клетки за адхезивни линии или 5 × 10⁶ клетки за суспензионни линии (за подробности вижте сертификата за анализ на партидата).

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300414

Информационен лист за безопасност

Продуктов лист

Сертификат за анализ (CoA)

Споразумение за трансфер на материали

Описание	Клетъчната линия Wilms3 е създадена от първичен тумор на Wilms при педиатричен пациент, характеризиращ се със соматична мутация на WT1. За разлика от много други клетъчни линии с тумор на Wilms, Wilms3 е носител на хетерозиготна фреймшифт мутация в гена WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), която води до производството на съкратен протеин WT1. Тази частична загуба на функцията на WT1 се свързва с развитието на тумори, които показват стромален или мезенхимен фенотип. Въпреки това мутацията на WT1 в Wilms3 не е хомозиготна, което усложнява изследването ѝ, тъй като тя запазва част от функцията на WT1, която може да повлияе по различен начин на туморната биология в сравнение с клетъчните линии с пълна загуба на WT1. Wilms3 също така носи мутация в гена CTNNB1, засягаща по-специално треонин 41 (p.T41A), който играе критична роля в сигналния път на Wnt. Тази мутация стабилизира β-Катенин, предотвратявайки разграждането му и водейки до конститутивно активиране на пътя на Wnt. Постоянното активиране на Wnt сигнализацията стимулира клетъчната пролиферация и допринася за туморогенезата при Wilms3, което го прави ключов модел за изучаване на въздействието на CTNNB1 мутациите в контекста на частично функционален WT1 фон. Фенотипно клетките на Wilms3 показват мезенхимно-подобна морфология, експресират виментин и нямат цитокератин, което съответства на стромалните характеристики, наблюдавани в оригиналния тумор. Тези клетки показват ограничен диференцировъчен потенциал, като могат да претърпят известна мезенхимна диференциация при специфични условия. Протеомичните анализи на Wilms3 разкриват активирането на няколко рецепторни тирозинкинази (RTK), включително PDGFRβ и AXL, които подпомагат оцеляването и пролиферацията на клетките. Освен това се активират сигнални пътища надолу по веригата, като MAPK и PI3K/AKT, което засилва злокачествените свойства на клетките Wilms3. Един уникален аспект на Wilms3 е неговата частична функционалност на WT1, което осигурява различна перспектива за това как мутациите на WT1 допринасят за биологията на тумора на Wilms, когато мутацията не е пълна. Взаимодействието между WT1 и Wnt сигнализацията в Wilms3 предлага ценна възможност за изучаване на нюансираните роли, които тези пътища играят в развитието на туморите. Като цяло Wilms3 служи като важен модел за изследване на молекулярните механизми, лежащи в основата на тумора на Wilms при наличие на частична загуба на WT1 и конститутивно активиране на пътя на Wnt.
Организъм	Човек
Тъкан	Бъбреци
Заболяване	Тумор на Вилмс
Приложения	Модел на клетъчна култура in vitro. Биохимични изследвания

Възраст	11-12 месеца
Пол	Мъжки
Етническа принадлежност	Кавказки
Морфология	С форма на вретено
Тип на клетката	Клетки на Вилмс
Свойства на растежа	Придържащи се

Цитиране	Wilms3 (каталожен номер 300414 на Cytion)
Ниво на биобезопасност	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusАкцесия	CVCL_A5SF

Мутационен профил	Статус на мутация на WT1: хомозиготна c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, статус на мутация на CTNNB1: див тип

Среда за култивиране	Комплект MSCGM (от Lonza)
Реагент за дисоциация	Accutase
Субкултивиране	Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Средство за замразяване	Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Размразяване и култивиране на клетките	Уверете се, че флаконът остава дълбоко замразен при доставката, тъй като клетките се транспортират със сух лед, за да се поддържат оптимални температури по време на транспортирането. При получаване или съхранявайте незабавно криовиолата при температури под -150 °C, за да осигурите запазване на клетъчната цялост, или преминете към стъпка 3, ако е необходимо незабавно култивиране. За незабавно култивиране бързо размразете флакона, като го потопите във водна баня с чиста вода и антимикробен агент с температура 37 °C, като разбърквате внимателно в продължение на 40-60 секунди, докато остане малка ледена бучка. Извършвайте всички следващи стъпки при стерилни условия в аспиратор, като преди отваряне дезинфекцирате криовиолата със 70% етанол. Внимателно отворете дезинфекцирания флакон и прехвърлете клетъчната суспензия в 15 ml центрофужна епруветка, съдържаща 8 ml хранителна среда със стайна температура, като разбъркате внимателно. Центрофугирайте сместа при 300 x g в продължение на 3 минути, за да отделите клетките, и внимателно изхвърлете супернатантата, съдържаща остатъчна замразяваща среда. Внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета в 10 ml прясна хранителна среда. За адхезивни клетки разделете суспензията между две колби Т25; за суспензионни култури прехвърлете цялата среда в една колба Т25, за да стимулирате ефективното взаимодействие и растеж на клетките. Придържайте се към установените протоколи за субкултивиране за непрекъснат растеж и поддържане на клетъчната линия, като гарантирате надеждни експериментални резултати.
Инкубационна атмосфера	37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.
Покритие на колбата	Няма
Процедура за замразяване	Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед във валидирана, изолирана опаковка с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
Условия за доставка	Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед във валидирана, изолирана опаковка с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
Условия за съхранение	За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Стерилност	Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма. За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
HLA алели	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Номер на партидата	Тип на сертификата	Дата	Каталожен номер
300414-221	Сертификат за анализ	23. May. 2025	300414

Ако имате намерение да използвате клетъчните линии Cytion единствено за вътрешни изследвания в един изследователски център, моля, попълнете и подпишете нашето Споразумение за прехвърляне на материали (MTA) и го изпратете заедно с поръчката си.

За всякакви търговски приложения – включително, но не само, работа срещу заплащане, тестове за контрол на качеството, пускане на продукти на пазара, диагностична употреба или регулаторни проучвания – моля, попълнете формуляра за предвидена употреба, за да можем да подготвим подходящо споразумение, съобразено с вашия проект.

Моля, имайте предвид: MTA се отнася само за определени клетъчни линии. Ако това уведомление и документът MTA се появяват на страницата на продукта, споразумението е приложимо. За клетъчни линии, които не са обхванати от MTA, няма да се показва препратка към споразумението. MTA не е валидно за клиенти в Америка, Китай или Тайван. Моля, свържете се с нашето представителство в САЩ, за да получите подходящото споразумение.

Клетки Wilms3

Обща информация

Характеристики

Регулаторни данни

Биомолекулярни данни

Работа с

Контрол на качеството / Генетичен профил / HLA

Сертификат за анализ (CoA)

Споразумение за трансфер на материали