Клетки LLC-PK1

Средата за замразяване CM-1 на Cytion е най-съвременна среда за криоконсервация, предназначена да осигури най-високо ниво на жизнеспособност и функционалност на клетките след размразяване. Тази универсална среда е подходяща за широк спектър от клетъчни типове, включително човешки и животински клетки, което я прави основен инструмент за различни изследователски приложения. Формулирана с внимателно балансирана комбинация от криопротектори и основни хранителни вещества, средата за замразяване CM-1 свежда до минимум образуването на ледени кристали и клетъчния стрес по време на процеса на замразяване, като по този начин запазва клетъчната цялост.
Основните характеристики на Freeze Medium CM-1 включват:

Широка съвместимост: Ефективна за широк спектър от клетъчни типове, включително първични клетки, стволови клетки и установени клетъчни линии.
Висока жизнеспособност: Оптимизирана за максимално възстановяване на клетките след размразяването им и тяхната жизнеспособност, което гарантира надеждни експериментални резултати.
Готов за употреба: Удобно подготвени и стерилизирани за незабавно приложение, което намалява времето за подготовка и риска от замърсяване.
Повишена стабилност: Поддържа постоянна производителност при стандартни условия на криоконсервация, като осигурява възпроизводими резултати.
Дълъг срок на съхранение: CM-1 е готова за употреба среда за криоконсервация, съдържаща серум, която може да се съхранява в хладилник до една година.


Използване на CM-1 за замразяване на клетки

За да използвате CM-1 за замразяване на адхезивни и суспензионни клетки, следвайте следните стъпки

За адхерентни клетки ги измийте и ги отделете от субстрата за култивиране. За суспензионни клетки преминете директно към следващата стъпка.
Пребройте клетките, за да се уверите, че те са с подходяща концентрация.
Центрофугирайте клетките, за да ги пелетирате, след което ги ресуспендирайте в среда за замразяване CM-1.
Прехвърлете ресуспендираните клетки в криовиали.
Използвайте метод за бавно замразяване, преди да прехвърлите клетките за дългосрочно съхранение





Метод
Описание
Стъпки





❄️
Ръчно замразяване

Метод, включващ постепенно намаляване на температурата, за да се осигури жизнеспособността на клетките

1️⃣ Поставете клетките в среда за замразяване във фризер с температура 4 °C за 40 минути.
2️⃣ Прехвърлете във фризер с температура -80°C за 24 часа.
3️⃣ Съхранявайте клетките в течен азот за дългосрочно запазване



❄️
Използване на Mr. Frosty

Удобно устройство, което позволява контролирана скорост на замразяване без електрическо захранване

1️⃣ Подгответе клетките в криовиали със замразяваща среда.
2️⃣ Поставете криовиолите в контейнера на Mr. Frosty.
3️⃣ Съхранявайте при -80 °C за 24 часа, преди да прехвърлите в течен азот



❄️
Фризер с контролирана скорост

Високопрецизен фризер на Thermo Fisher или на други производители, предназначен за контролирано намаляване на температурата

1️⃣ Програмирайте устройството за постепенно намаляване на температурата.
2️⃣ Поставете подготвените клетки във фризера.
3️⃣ След цикъла на замразяване прехвърлете клетките в течен азот









Съхранявайте криовиолите при температури под -130 °C или в течен азот за дългосрочно съхранение.


Съставки

Съдържа FBS, DMSO, глюкоза, соли
Буфериращ капацитет: pH = 7,2 до 7,6


Средата за замразяване CM-1 на Cytion предлага надеждно решение за криоконсервация, като осигурява висока клетъчна жизнеспособност и функционалност след размразяване за широк спектър от изследователски приложения.

DMEM: Ham's F12 е широко призната и широко използвана базова среда за клетъчни култури за биологични изследвания. Тя служи като основен източник на хранителни вещества за растежа на различни клетъчни линии от бозайници, особено когато е допълнена с фетален говежди серум (FBS).

Тази уникална формула съчетава модифицирана среда на Дюлбеко (DMEM) и Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) в точно съотношение 1:1. Добавянето на L-глутамин допълнително подобрява нейния състав.

DMEM, получена от Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), предлага повишена концентрация на аминокиселини и витамини в сравнение с предшественика си. За разлика от нея, Ham's F-12 се основава на средата Ham's F-10, като осигурява допълнителен набор от основни компоненти.

За да се поддържа оптимален клетъчен растеж, обичайната практика е DMEM:Ham's F12 да се допълва с FBS с типична концентрация от 5-10 %. Тази добавка е необходима, тъй като в средата липсват хормони на растежа, липиди и протеини, които са от решаващо значение за клетъчното развитие.

DMEM:Ham's F12 включва pH буферна система и често се допълва с фенолово червено, индикатор за pH. Култивирането на клетки в DMEM:Ham's F12 или всяка друга среда, използваща бикарбонатна буферна система, изисква контролирана среда от 5-10 % CO2, за да се поддържат подходящи нива на рН.


Контрол на качеството

Стерилно филтриран


Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +8°C, защитени от светлина.
След отваряне съхранявайте при 4°C и използвайте в рамките на 6-8 седмици.


Условия за транспортиране

Температура на околната среда


Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.


Състав



Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)


Аминокиселини
Глицин
18.75


L-аланин
4.45


L-аргинин HCl
147.50


L-аспарагин H₂O
7.50


L-аспарагинова киселина
6.65


L-цистеин HCl H₂O
17.56


L-цистин 2 HCl
31.29


L-глутаминова киселина
7.35


L-глутамин
365.00


L-Histidine HCl H₂O
31.48


L-изолевцин
54.47


L-Leucine
59.05


L-лизин HCl
91.25


L-метионин
17.24


L-фенилаланин
35.48


L-пролин
17.25


L-серин
26.25


L-треонин
53.45


L-триптофан
9.02


L-тирозин динатриева сол
48.10


L-валин
52.85


Витамини
D-биотин
0.0035


Холин хлорид
8.98


D-калциев пантотенат
2.24


Фолиева киселина
2.66


мио-инозитол
12.60


Никотинамид
2.02


Пиридоксин HCl
0.031


Пиридоксал HCl
2.00


Рибофлавин
0.219


Тиамин HCl
2.17


Витамин В12
0.68


Неорганични соли
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Други компоненти
D-глюкоза
3151.00


Хипоксантин
2.40


HEPES
3574.50


Линолова киселина
0.042


Липоева киселина
0.105


Фенол червено натриева сол
8.63


Путресцин 2 HCl
0.081


Натриев пируват
55.00


Тимидин
0.365

Реагент за клетъчна дисоциация Accutase
- щадяща алтернатива на трипсина
Accutase е разтвор за отделяне на клетки, който прави революция в производството на клетъчни култури. Това е смес от протеолитични и колагенолитични ензими, която имитира действието на трипсин и колагеназа. За разлика от трипсина Accutase не съдържа никакви бозайнически или бактериални компоненти и е много по-щадящ за клетките, което го прави идеално решение за рутинно отделяне на клетки от стандартни пластмасови съдове за тъканни култури и пластмасови съдове с адхезионно покритие. В тази публикация в блога ще разгледаме ползите и приложенията на Accutase и как тя променя правилата на играта в клетъчните култури.
Предимства на Accutase
Accutase има няколко предимства пред традиционните разтвори на трипсин. Първо, тя може да се използва винаги, когато е необходимо нежно и ефикасно отделяне на всяка адхезивна клетъчна линия, което я прави директен заместител на трипсина. Второ, Accutase работи изключително добре с ембрионални и невронни стволови клетки и е доказано, че запазва жизнеспособността на тези клетки след пасиране. Трето, Accutase запазва повечето епитопи за последващ анализ с поточна цитометрия, което я прави идеална за анализ на маркери на клетъчната повърхност.
Освен това Accutase не трябва да се неутрализира при пасиране на адхерентни клетки. Добавянето на повече среда след разделянето на клетките разрежда Accutase, така че тя вече не е в състояние да отдели клетките. Това елиминира нуждата от стъпка за инактивиране и спестява време на техниците, занимаващи се с клетъчни култури. И накрая, не е необходимо Accutase да се аликвотира, а една бутилка е стабилна в хладилника в продължение на 2 месеца.
Приложения на Accutase
Accutase е директен заместител на разтвора на трипсин и може да се използва за пасиране на клетъчни линии. Освен това Accutase се представя добре при отделяне на клетки за анализ на много маркери на клетъчната повърхност с помощта на поточна цитометрия и за сортиране на клетки. Други приложения надолу по веригата на обработка с Accutase включват анализ на маркери на клетъчната повърхност, анализ на растежа на вируси, клетъчна пролиферация, анализи на миграцията на туморни клетки, рутинно пасиране на клетки, увеличаване на производството (биореактор) и поточна цитометрия.
Състав на Accutase
Accutase не съдържа компоненти от бозайници или бактерии и представлява естествена ензимна смес с протеолитична и колагенолитична ензимна активност. Тя е формулирана в много по-ниска концентрация от трипсина и колагеназата, което я прави по-малко токсична и по-нежна, но също толкова ефективна.
Ефективност на Accutase
Доказано е, че Accutase е ефективна при отделянето на първични и стволови клетки и поддържането на висока клетъчна жизнеспособност в сравнение с ензими от животински произход, като трипсин. 100 % от клетките се възстановяват след 10 минути и няма вреда от оставянето на клетките в Accutase до 45 минути, благодарение на авторазграждането на Accutase.
В обобщение
В заключение, Accutase е мощно решение, което променя правилата на играта в клетъчните култури. Със своята щадяща природа, ефективност и гъвкавост Accutase е идеалната алтернатива на трипсина. Ако търсите надеждно и ефикасно решение за отделяне на клетки, Accutase е решението за вас.

Преглед на продукта
Обем: 100 ml Съхранение: ≤-15°C Стерилност: Стерилно филтриран
Антибиотик/антимикотичен разтвор (100x ) е стерилен, готов за употреба концентрат, предназначен за намаляване на рисковете от микробно замърсяване в клетъчни култури и свързани с тях лабораторни приложения. Този разтвор 100x съдържа утвърдена комбинация от пеницилин, стрептомицин и амфотерицин В
- осигуряваща широк спектър на антимикробна активност срещу грам-положителни и грам-отрицателни бактерии, дрожди и нишковидни гъбички. Формулата е подходяща за използване в еукариотни клетъчни култури, бактериални среди и други чувствителни към замърсяване системи, като подпомага чистите и последователни лабораторни операции.
Приложение и предимства Оптимизиран за рутинни изследователски протоколи, този разтвор се използва широко за поддържане на асептични условия в работните процеси на клетъчни култури. То предлага надеждна работа в чувствителни към замърсяване среди, като помага на изследователите да намалят риска от свръхрастеж на микроорганизми, без да се компрометира здравето на клетките или възпроизводимостта на експериментите. Стерилно-филтрираният състав елиминира необходимостта от допълнителни етапи на разтваряне, като подпомага рационализираното приготвяне на среди и намалява променливостта в ежедневните лабораторни процедури.
Употреба и съвместимост За да постигнете стандартни работни концентрации, разредете разтвора в съотношение 1:100 в пълна хранителна среда. Продуктът е съвместим с широк спектър от клетъчни линии на бозайници и базови среди. С постоянната наличност на склад изследователите се възползват от надеждна непрекъснатост на доставките и опростено логистично планиране. За да се запази стабилността, разтворът трябва да се съхранява при ≤ -15 °C и да се предпазва от многократни цикли на замразяване и размразяване. Само за изследователска употреба. Не е предназначен за използване в диагностични или терапевтични процедури. Не е предназначен за употреба при хора или животни.

Разтвор на фосфатно-буфериран физиологичен разтвор (PBS)
Фосфатно-буферираният физиологичен разтвор (PBS) е широко използван буферен разтвор в биологичните и химичните изследвания. Той играе решаваща роля за поддържане на pH баланса и осмоларността по време на различни експериментални процедури, включително обработка на тъкани и клетъчни култури. Нашият разтвор на PBS е щателно формулиран с висококачествени съставки, за да се гарантира стабилност и надеждност при всеки експеримент. Осмоларността и концентрацията на йони в нашия разтвор PBS са близки до тези в човешкото тяло, което го прави изотоничен и нетоксичен за повечето клетки.

Състав на нашия разтвор на PBS
Нашият разтвор на PBS е смес от свръхчисти фосфатни буфери и физиологични разтвори с коригирано pH. В работна концентрация 1Х той съдържа:

8000 mg/L Натриев хлорид (NaCl)
200 mg/L Калиев хлорид (KCl)
1150 mg/L Натриев фосфат двуосновен безводен (Na2HPO4)
200 mg/L Калиев фосфат монобазичен безводен (KH2PO4)

Този състав осигурява оптимално рН и йонно равновесие, подходящи за широк спектър от биологични приложения.

Приложения на нашия разтвор на PBS
Нашият разтвор на PBS е идеален за различни приложения в биологичните изследвания. Неговите изотонични и нетоксични свойства го правят подходящ за разреждане на вещества и за изплакване на клетъчни контейнери. Разтворите PBS, съдържащи EDTA, са ефективни за отделяне на прикрепени и слепени клетки. Въпреки това към PBS не трябва да се добавят двувалентни метали, като например цинк, тъй като това може да доведе до утаяване. В такива случаи се препоръчват буферите на Good's. Освен това нашият разтвор на PBS е приемлива алтернатива на вирусната транспортна среда за транспортиране и съхранение на РНК вируси, включително SARS-CoV-2.

Контрол на качеството

Стерилно филтриран


Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +25°C, защитени от светлина.
След отваряне съхранявайте при 2°C до 25°C и използвайте в рамките на 24 месеца.


Условия за транспортиране

Температура на околната среда


Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.

Състав



Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)


Соли
Калиев хлорид
200



Калиев фосфат монобазичен безводен
200



Натриев хлорид
8000



Натриев фосфат двуосновен безводен
1150