CTX клетки

CTX (известна още като CTX0E03) е условно безсмъртна линия от човешки невронални стволови клетки, получена от кортикалния невроепителиум на човешки фетал от първия триместър. Линията е създадена чрез ретровирусна интеграция на трансген за c-mycER^TAM-фузия, който стимулира клетъчната пролиферация само в присъствието на 4-хидрокситамоксифен (4-OHT). При отсъствие на 4-OHT и в среда без митогени клетките CTX0E03 претърпяват спиране на растежа и се диференцират в неврони и астроцити, като запазват способността си за мултипотентна диференциация. Линията е клонална, има нормален човешки кариотип (46,XY) и е разработена при условия, съвместими с GMP, с оглед потенциално клинично приложение.

CTX0E03 е оценена в предклинични модели на исхемичен инсулт (модел на плъхове с MCAo), където имплантираните клетки са допринесли за значително възстановяване на сензомоторната функция. Линията е влязла в клинични изпитвания за терапия на инсулт. Тя се използва също като in vitro модел за биологията на невронните стволови клетки, диференциацията на корковите неврони, изследвания на болестта на Алцхаймер (проучвания за токсичността на Abeta) и неврофармакологичен скрининг. Системата за условна иммортализация прави CTX0E03 особено подходящ за проучвания на безопасността и ефикасността, тъй като пролиферацията може да бъде преустановена чрез отстраняване на 4-OHT преди трансплантацията.

CTX0E03 се размножава в DMEM/F12, допълнен с N2 добавка, EGF (20 ng/ml) и FGF-2 (20 ng/ml) с 4-OHT (1 μM) върху повърхности, покрити с ламинин, при 37 °C в 5 % CO₂. За диференциация растежните фактори и 4-OHT се отстраняват. Линията е класифицирана на ниво на биологична безопасност 1 (GMO-S1 в Германия поради интегрирания трансген c-mycERTAM). Потребителите трябва да спазват приложимите разпоредби за ГМО в своята юрисдикция.