661w клетки

661W е клетъчна линия, получена от фоторецептори на конусите на мишки, първоначално създадена от тумор на ретината, възникнал в трансгенна мишка, изразяваща голям Т антиген на маймунски вирус 40 (SV40) под контрола на промотора на човешкия интерфоторецепторен ретиноид-свързващ протеин (IRBP). Линията е създадена от постнатални ретинални експланти и представлява безсмъртни прекурсори на фоторецептори на конусите. Клетките 661W проявяват адхезивен растеж и се поддържат рутинно в модифицирана среда на Dulbecco, допълнена с фетално телешко серум при стандартни условия на култивиране. Те са широко използвани като in vitro модел на фоторецептори на конусите, особено в проучвания на увреждания, предизвикани от светлина, оксидативен стрес, апоптоза и дегенеративни механизми на ретината.

Молекулярната и транскриптомна характеристика потвърждава, че 661W клетките експресират по-голямата част от маркерите на конусните фоторецептори, включително конусните опсини и гените, свързани с фототрансдукцията. Изследвания с висока разделителна способност показват, че тези клетки образуват първични реснички със структурни характеристики, наподобяващи ресничките, свързващи фоторецепторите, и външните сегменти. Имуноцитохимични и ултраструктурни анализи разкриват локализация на цилиарни протеини в аксонема, мембрана и преходна зона, което подкрепя тяхната полезност при изследване на ретинални цилиопатии. Функционални изследвания са показали, че siRNA-медиираното потискане на гени за интрафлагеларен транспорт, като Ift88, води до загуба на цилии, което потвърждава 661W като подходяща система за механистични изследвания на цилиарната биология.

Клетките 661W са силно чувствителни към фотооксидативен стрес. Излагането на видима светлина предизвиква апоптотична клетъчна смърт, свързана с понижаване на активността на NF-κB и активиране на каспазните пътища. Свръхекспресията на антиапоптотични протеини като Bcl-2 придава резистентност към индуцирана от светлина апоптоза, поддържайки ядрената активност на NF-κB и подобрявайки оцеляването на клетките. Тези свойства правят 661W стабилен модел за разлагане на молекулярните пътища, лежащи в основата на дегенерацията на фоторецепторите. Важно е да се отбележи, че линията 661W е била свързана и с исторически случаи на неправилна идентификация на клетъчни линии, включително кръстосано замърсяване с линията RGC-5, което подчертава необходимостта от строга автентификация при използването на този модел. Като цяло, 661W предоставя добре характеризирана платформа за миши фоторецептори на конусите за изучаване на дегенерацията на ретината, реакциите на оксидативния стрес, функцията на цилиарните клетки и терапевтичните интервенции, насочени към оцеляването на конусите.